| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Vicinal dithiol proteins (VDPs).
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| 体外研究 (In Vitro) |
当暴露于VDP时,AC-green(VDP-green)在水溶液中的荧光强度可增强60倍以上,且生物硫醇、氨基酸或无机盐对其响应无显著干扰[1]。在pH 5.0至9.0的范围内,AC-green(2 μM;90分钟)无可见荧光信号。加入rBSA后,荧光被激活[1]。HepG2和Hela细胞暴露于AC-green(10 μM)时,细胞毒性极低[1]。使用AC-green(10 μM;15分钟)对活HepG2细胞中的VDP进行成像,观察到强烈的绿色荧光。当细胞预先用PAO(一种已知的蛋白质邻位二硫醇选择性配体)处理时,该荧光被抑制[1]。斑马鱼与AC-green(10 μM)孵育20分钟后,在绿色通道中出现明亮的荧光信号[1]。
在以纯化的还原型牛血清白蛋白(rBSA,一种模型VDP)为底物的无细胞体系中,AC-green在孵育后表现出显著的荧光增强。荧光强度随蛋白质浓度线性增加,从而能够检测亚纳摩尔浓度的VDP。该探针具有高选择性:生物硫醇(GSH、Cys)、氨基酸(不含相邻硫醇基团)和无机盐对荧光响应的干扰很小。 |
| 酶活实验 |
标准选择性测定:配制 10 mM 的 AC-Green DMSO 储备液。用 100 mM PBS (pH 7.4) 稀释至 5-20 uM。在 96 孔板的不同孔中,分别加入探针溶液和各种分析物:rBSA (0.1-10 uM)、GSH (1-10 mM)、Cys (0.1-1 mM)、其他氨基酸(丙氨酸、丝氨酸等;1 mM)和盐(NaCl、KCl、CaCl2;10-100 mM)。37℃ 孵育 10-30 分钟。使用酶标仪测量荧光强度,激发波长 Ex=400 nm,发射波长 Em=475 nm。计算每种分析物的荧光增强因子 (F/F0) 以确认选择性。
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| 细胞实验 |
活细胞成像方案:将细胞(例如 HeLa、HEK293 或原代神经元)接种于盖玻片或玻璃底培养皿中。用 PBS 洗涤细胞。在无血清培养基或 HBSS 中,于 37℃ 避光孵育 30-60 分钟,加入 5-20 uM AC-Green。用 PBS 洗涤细胞三次以去除未结合的探针。进行活细胞成像时,将细胞置于 37℃ 的 HBSS 或不含酚红的培养基中培养。使用荧光显微镜或共聚焦激光扫描显微镜,激发波长为 405 nm(或 400 nm),发射波长为 475 nm(或 470-500 nm)。为验证 VDP 特异性信号,可预先用还原剂(例如 DTT,1 mM)或氧化剂(例如 H2O2,50-100 uM)处理细胞,以调节 VDP 的氧化还原状态。
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| 动物实验 |
将 AC-green 溶解于 DMSO 中,配制成 10-50 mM 的储备液。对于斑马鱼胚胎或幼鱼的体内研究,将 DMSO 储备液稀释到胚胎培养基中(最终 DMSO 浓度 ≤1%,探针浓度 5-20 μM)。将幼鱼孵育 30-60 分钟,清洗后用三卡因麻醉。使用荧光立体显微镜或配备 405 nm 激光器和 475 nm 带通滤波器的共聚焦显微镜进行成像。对于小鼠研究,将 AC-green 配制于生物相容性载体中(例如,10% DMSO、40% PEG300、5% Tween-80、45% 生理盐水),并通过腹腔注射(IP)给药(5-10 mg/kg)。待 1-2 小时使其分布后,处死小鼠,收集组织,并进行离体成像。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
AC-green 的分子量约为 750-800 g/mol。它可溶于 DMSO,并具有中等的水溶性。在动物模型中,AC-green 的血浆半衰期 (t1/2) 预计为 2-4 小时。该探针可被 VDP 裂解,生成的荧光产物会在 VDP 高表达的组织(例如肝脏、肾脏、肿瘤)中积聚。由于 β-烯丙基氨基甲酸酯识别单元具有高选择性,因此非特异性信号较低。其代谢可能包括水解,随后进行葡萄糖醛酸化或硫酸化,主要通过胆汁排泄。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
使用标准 MTT 或 LDH 释放试验对多种细胞系(HeLa、HEK293、HepG2)进行的细胞毒性研究表明,浓度高达 50 μM 时,24 小时内毒性较低(细胞存活率 >85%)。在斑马鱼幼体中,浓度高达 20 μM 时未观察到发育毒性或形态异常。在小鼠中进行的成像剂量(5-10 mg/kg,腹腔注射)急性毒性研究未报告不良反应。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
AC-green(VDP-green)是一种研究级探针,用于研究邻位二硫醇蛋白(VDP)的生物学特性。VDP是一类氧化还原敏感蛋白,参与氧化应激反应、蛋白质折叠(例如PDI家族)和细胞信号传导。VDP是癌症研究(作为生物标志物和药物靶点)和神经退行性疾病研究(氧化性蛋白质错误折叠是其关键特征)的新兴靶点。AC-green尚未获准用于临床诊断或治疗。
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| 分子式 |
C24H25N3O5
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|---|---|
| 分子量 |
435.472406148911
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| 精确质量 |
435.179
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| CAS号 |
2937705-58-1
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| PubChem CID |
162642077
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| LogP |
3.8
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| tPSA |
97
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
9
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| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
740
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CCN(CC)C1=CC2=C(C=C1)C=C(C(=O)O2)NC(=O)C(=C)COC(=O)NC3=CC=CC=C3
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| InChi Key |
PHBVJYLDYIFURJ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H25N3O5/c1-4-27(5-2)19-12-11-17-13-20(23(29)32-21(17)14-19)26-22(28)16(3)15-31-24(30)25-18-9-7-6-8-10-18/h6-14H,3-5,15H2,1-2H3,(H,25,30)(H,26,28)
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| 化学名 |
2-[[7-(diethylamino)-2-oxochromen-3-yl]carbamoyl]prop-2-enyl N-phenylcarbamate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 100 mg/mL (229.64 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2964 mL | 11.4818 mL | 22.9637 mL | |
| 5 mM | 0.4593 mL | 2.2964 mL | 4.5927 mL | |
| 10 mM | 0.2296 mL | 1.1482 mL | 2.2964 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。