L-γ-Glutamyl-p-nitroanilide hydrate

别名: L-gamma-谷氨酰-p-硝基苯胺水合物
目录号: V68021 纯度: ≥98%
L-γ-谷氨酰-对硝基苯胺(水合物)是一种谷氨酸类似物。
L-γ-Glutamyl-p-nitroanilide hydrate CAS号: 122864-94-2
产品类别: Amino Acid Derivatives
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
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产品描述
L-γ-谷氨酰-对硝基苯胺(水合物)是一种谷氨酸类似物。
L-γ-谷氨酰-对硝基苯胺水合物(CAS 122864-94-2)是一种谷氨酸衍生物,也是一种显色底物。它通过γ-谷氨酰连接对硝基苯胺,使其成为γ-谷氨酰转移酶(GGT)及相关酶的底物。该化合物用于酶活性测定,以测量GGT活性,因为酶促裂解会释放对硝基苯胺,而对硝基苯胺可在405 nm处进行分光光度定量。它是研究谷胱甘肽代谢、氨基酸转运和酶动力学的重要工具。本产品仅供研究使用,不得用于人体治疗。作为一种显色底物,它能够灵敏便捷地检测生物样品中的酶活性。
生物活性&实验参考方法
靶点
The primary target of L-γ-Glutamyl-p-nitroanilide is γ-glutamyl transferase (GGT), an enzyme that catalyzes the transfer of γ-glutamyl groups from glutathione and other γ-glutamyl compounds to acceptors. GGT plays a critical role in glutathione metabolism, amino acid transport, and cellular redox balance. The compound serves as a chromogenic substrate for GGT, with enzymatic cleavage releasing p-nitroaniline for spectrophotometric detection. This makes it useful for studying GGT activity in various biological contexts, including liver function, oxidative stress, and cancer. The compound may also interact with other γ-glutamyl-processing enzymes.
体外研究 (In Vitro)
使用该化合物进行的体外研究通常包括测定细胞裂解液、组织匀浆或纯化酶制剂中的酶活性。标准方案包括将底物与样品在合适的缓冲体系(例如,最佳pH值的Tris-HCl或甘氨酸-NaOH缓冲液)中于37°C孵育,然后使用分光光度计或微孔板读数仪在405 nm处测定对硝基苯胺的释放量。该化合物可用于定量各种细胞类型中的GGT活性,并用于筛选GGT抑制剂。它还用于研究细胞内谷胱甘肽代谢和γ-谷氨酰循环功能。
体内研究 (In Vivo)
由于该化合物主要用作体外诊断试剂,因此其体内研究较为有限。然而,该化合物或其衍生物可用于动物实验,以评估组织中GGT活性或评价GGT调节对谷胱甘肽代谢和氧化应激的影响。标准实验方案包括向啮齿动物模型注射给药,随后收集组织进行酶活性测定。所有动物实验必须遵守机构伦理准则,并按照适用的实验动物饲养和使用法规进行。
酶活实验
针对该化合物的非细胞酶活性测定方法是将底物与纯化的γ-谷氨酰转移酶 (GGT) 或其他γ-谷氨酰加工酶在合适的缓冲体系中孵育。标准操作流程包括:在37°C下制备反应混合物,其中包含底物(通常为1-10 mM)、酶源和缓冲液(例如,Tris-HCl,pH 8.0-9.0)。在特定时间点终止反应,并通过测量405 nm处的吸光度来定量对硝基苯胺的释放量。该测定方法可用于测定酶动力学参数(Km、Vmax)、筛选抑制剂以及研究各种化合物对GGT活性的影响。由于底物具有显色性,因此可以连续监测酶活性。
细胞实验
使用该化合物的细胞检测通常包括在合适的培养基中培养细胞,然后裂解细胞或收集条件培养基以测定GGT活性。标准方案包括在37°C下用合适的缓冲液中的底物(通常为0.5-5 mM)处理细胞30-60分钟,然后离心并在405 nm处测量对硝基苯胺的吸光度。该检测可用于测量细胞内或细胞外GGT活性,研究各种处理对GGT表达或活性的影响,以及筛选GGT功能调节剂。该化合物还可用于组织切片中GGT活性的组织化学染色。
动物实验
由于该化合物主要用作体外诊断试剂,因此使用其进行的体内动物研究有限。然而,该化合物可用于动物模型,以评估各种治疗或疾病状态下组织中的GGT活性。标准方案包括注射给药,然后在特定时间点采集组织,使用显色底物测定酶活性。药效学评估可能包括测量肝脏、肾脏或其他组织中的GGT活性,以及监测谷胱甘肽水平和氧化应激标志物。所有动物研究必须遵守机构伦理准则。
药代性质 (ADME/PK)
由于该化合物主要用作体外诊断试剂而非治疗药物,因此其药代动力学性质研究有限。该化合物溶于水,在适当的储存条件下稳定。体外检测时,通常将其配制成水或缓冲液的储备液,并新鲜使用。该化合物应以粉末形式储存于-20°C,以进行长期保存,并避光防潮。酶促裂解产生的对硝基苯胺产物可通过分光光度法检测,并可用于定量生物样品中的酶活性。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
该化合物在酶活性测定常用浓度(0.1-10 mM)下,体外使用毒性较低。然而,其裂解产物对硝基苯胺是一种已知的有毒化合物,应谨慎操作。操作过程中应采取适当的安全预防措施,包括使用个人防护装备并在通风良好的区域工作。该化合物接触皮肤和眼睛后可能引起刺激。体外使用时,应遵循标准的实验室安全操作规程。该化合物不适用于人类治疗用途。
其他信息
L-γ-谷氨酰基-p-硝基苯胺水合物是一种γ-谷氨酰转移酶(GGT)的显色底物,该酶在谷胱甘肽代谢、氨基酸转运和细胞氧化还原平衡中发挥关键作用。该底物的酶切会释放p-硝基苯胺,可以在405 nm处通过分光光度法定量,从而成为测量生物样本中GGT活性的有价值工具。它用于研究肝功能、氧化应激和癌症。它不是一种批准的药物,也未经过临床试验;仅供研究使用。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C11H15N3O6
分子量
285.25
精确质量
285.096
CAS号
122864-94-2
PubChem CID
24208779
外观&性状
Light yellow to yellow solid powder
熔点
192-193ºC
LogP
1.957
tPSA
147.47
氢键供体(HBD)数目
4
氢键受体(HBA)数目
7
可旋转键数目(RBC)
5
重原子数目
20
分子复杂度/Complexity
347
定义原子立体中心数目
1
SMILES
C1=CC(=CC=C1NC(=O)CC[C@@H](C(=O)O)N)[N+](=O)[O-].O
InChi Key
HAFIAIPYVFZHSY-FVGYRXGTSA-N
InChi Code
InChI=1S/C11H13N3O5.H2O/c12-9(11(16)17)5-6-10(15)13-7-1-3-8(4-2-7)14(18)19;/h1-4,9H,5-6,12H2,(H,13,15)(H,16,17);1H2/t9-;/m0./s1
化学名
(2S)-2-amino-5-(4-nitroanilino)-5-oxopentanoic acid;hydrate
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO: 4 mg/mL (14.02 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.5057 mL 17.5285 mL 35.0570 mL
5 mM 0.7011 mL 3.5057 mL 7.0114 mL
10 mM 0.3506 mL 1.7528 mL 3.5057 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们