| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| 500mg |
|
||
| 1g |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
The enzymatic target of 4-Nitrocatechol sulfate dipotassium salt is sulfatase enzymes, specifically arylsulfatases (including arylsulfatase A, B, and C). More specifically, in clinical diagnostics it is used as a substrate to measure arylsulfatase B (ARSB, also known as N-acetylgalactosamine-4-sulfatase) activity. The sulfate group on the catechol ring is recognized and hydrolyzed by the active-site cysteine residue of sulfatases via a formylglycine-dependent mechanism. Upon cleavage, the chromogenic 4-nitrocatechol product is released and detected.
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验使用4-硝基儿茶酚硫酸酯作为底物，定量细胞裂解液或纯化酶制剂中的硫酸酯酶活性。与芳基硫酸酯酶B (ARSB) 或相关硫酸酯酶孵育后，硫酸酯键被水解。产物4-硝基儿茶酚在碱性条件下呈现黄色（λmax = 515 nm），可用于分光光度法定量。每裂解一个底物分子，就生成一个4-硝基儿茶酚分子，从而可以直接计算酶活性（单位为每毫克蛋白质）。
|
| 体内研究 (In Vivo) |
该底物不用于动物治疗评估，而是用于从动物身上获取的生物样本的离体检测。例如，在MPS VI（芳基硫酸酯酶B敲除）小鼠模型中，将组织匀浆（肝脏、肾脏、脾脏）或培养的成纤维细胞与4-硝基儿茶酚硫酸酯孵育，以定量残余的ARSB活性。然后，可以将活性水平与疾病严重程度相关联，或用于评估酶替代疗法（ERT）的疗效。目前尚无体内PK/PD研究涉及直接给药该底物。
|
| 酶活实验 |
使用 4-硝基儿茶酚硫酸二钾盐测定硫酸酯酶活性的方案：配制反应混合物，其中包含 50 mM 乙酸钠缓冲液（pH 5.0-5.6）、10 mM 底物（溶于缓冲液）和 10-50 uL 酶样品（细胞裂解液或组织匀浆，通常含 50-200 ug 蛋白质），总体积为 200 uL。在 37℃ 下孵育 1-4 小时。加入 800 uL 1.0 M NaOH 溶液终止反应，以提高 pH 值并显色。在 515 nm 波长处测定吸光度，并以空白对照作为对照。一个酶活性单位定义为每小时释放 1 umol 4-硝基儿茶酚的酶量。设置阳性对照（纯化的芳基硫酸酯酶）和阴性对照（煮沸的酶）。
|
| 细胞实验 |
测定硫酸酯酶活性的标准体外细胞实验方案：将细胞（例如人成纤维细胞、HeLa细胞或COS-7细胞）培养至汇合，接种于6孔板中。用胰蛋白酶消化收集细胞，用PBS洗涤两次，然后在含0.1% Triton X-100的水溶液（或含蛋白酶抑制剂的裂解缓冲液）中裂解细胞。4℃下以14,000 rpm离心10分钟以去除细胞碎片。测定上清液的蛋白浓度（BCA法）。进行活性测定时，将10-50 uL裂解液（50-200 ug蛋白）与含有10 mM 4-硝基儿茶酚硫酸酯的50 mM乙酸钠缓冲液（pH 5.6）混合，最终体积为200 uL。37℃孵育1-4小时。用 800 uL 1 N NaOH 终止反应，并读取 A515。计算比活性（nmol/h/mg 蛋白质）。
|
| 动物实验 |
动物实验组织样本分析：处死小鼠，收集组织（肝脏、肾脏、脾脏、脑组织）。将100 mg组织在500 μL预冷的裂解缓冲液（含0.1% Triton X-100和蛋白酶抑制剂的水溶液）中匀浆。4℃下以10,000 × g离心15分钟。收集上清液，测定蛋白浓度。进行蛋白定量分析时，将20-50 μL组织匀浆（100-200 μg蛋白）与10 mM底物在50 mM乙酸钠缓冲液（pH 5.6）中于37℃孵育2-16小时。用1 N NaOH终止反应，在515 nm处测定吸光度。或者，也可以在405 nm处连续测定吸光度。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
由于4-硝基儿茶酚硫酸二钾盐仅用作体外非吸收性底物而非药物，因此目前尚无其药代动力学数据。若该化合物在体内给药，其硫酸基团很可能被组织硫酸酯酶迅速裂解，释放出4-硝基儿茶酚。已知4-硝基儿茶酚在高剂量下具有肝毒性和肾毒性。4-硝基儿茶酚在大鼠体内的血浆半衰期约为2-4小时，其主要代谢途径为葡萄糖醛酸化和硫酸化。目前尚无其母体底物的相关数据。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
该化合物吸收不良，急性毒性较低。然而，其水解产物4-硝基儿茶酚已被报道具有肝毒性和肾毒性。避免吸入粉末和皮肤接触。应采取标准实验室防护措施。该化合物在干燥、阴凉的储存条件下稳定。含有4-硝基儿茶酚的废弃物应作为危险化学废弃物处理。目前尚无致癌性分类。可能引起眼睛和皮肤刺激。
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
4-硝基儿茶酚硫酸二钾盐并非药物，而是一种用于酶活性测定的诊断研究试剂，尚未进行临床试验。然而，该底物在临床诊断实验室中广泛用于从干血斑、白细胞或培养的成纤维细胞中确诊粘多糖贮积症VI型（MPS VI）。阳性诊断结果（ARSB活性不足）可指导使用重组人ARSB（半硫酸酯酶，商品名Naglazyme）进行治疗，这是一种经FDA批准的酶替代疗法。该化合物还用于高通量筛选，以发现新型硫酸酯酶抑制剂或激活剂。
|
| 分子式 |
C6H3K2NO7S
|
|---|---|
| 分子量 |
311.35
|
| 精确质量 |
310.89
|
| CAS号 |
14528-64-4
|
| 相关CAS号 |
10485-66-2 (Parent)
|
| PubChem CID |
16219779
|
| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
|
| 密度 |
1.87 g/cm3
|
| 熔点 |
>300°C
|
| LogP |
2.181
|
| tPSA |
143.69
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
1
|
| 重原子数目 |
17
|
| 分子复杂度/Complexity |
315
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
C1=CC(=C(C=C1[N+](=O)[O-])OS(=O)(=O)[O-])[O-].[K+].[K+]
|
| InChi Key |
CKWWBDCAYRJAJB-UHFFFAOYSA-L
|
| InChi Code |
InChI=1S/C6H5NO7S.2K/c8-5-2-1-4(7(9)10)3-6(5)14-15(11,12)13;;/h1-3,8H,(H,11,12,13);;/q;2*+1/p-2
|
| 化学名 |
dipotassium;(5-nitro-2-oxidophenyl) sulfate
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 100 mg/mL (321.18 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.2118 mL | 16.0591 mL | 32.1182 mL | |
| 5 mM | 0.6424 mL | 3.2118 mL | 6.4236 mL | |
| 10 mM | 0.3212 mL | 1.6059 mL | 3.2118 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
