| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
AKT and NQO1. KP372-1 is an inhibitor of AKT kinase activity. It has an IC50 of 250 nM for AKT inhibition in cellular assays and an IC50 of 30-60 nM for inhibiting the growth of thyroid cancer cells. Concurrently, it acts as a redox-cycling agent for NQO1, an enzyme often overexpressed in cancer cells, leading to the generation of reactive oxygen species (ROS) and subsequent DNA damage.
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| 体外研究 (In Vitro) |
KP372-1（0.0625、0.125、0.25、0.5、1.0 μM；48 小时）对 JMARc42 和 Tu167c2 细胞的增殖具有抑制作用，其 IC50 值分别为 200 nM 和 100 nM [1]。在 Tu167c2 细胞中，KP372-1（125 nM；24 小时）诱导细胞凋亡，而在 JMARc42 细胞中，则诱导细胞失巢凋亡 [1]。在 Tu167 和 JMAR 细胞中，KP372-1（125 nM；30 分钟）通过阻断 Akt 信号通路降低 S6 核糖体蛋白的磷酸化水平 [1]。 KP372-1 (IC50 = 250 nM) 在 0.250、0.5 和 1.0 μM 浓度下作用 30 分钟可抑制 JMAR 细胞中的 Akt 激酶活性 [1]。
体外实验表明，KP372-1具有显著的抗增殖活性。在低微摩尔浓度（0.25-1.0 uM）下，它能有效抑制AKT激酶活性，抑制细胞增殖，并诱导多种癌细胞系发生凋亡（程序性细胞死亡）和失巢凋亡（一种由细胞黏附丧失引起的细胞死亡）。例如，在甲状腺癌细胞中，KP372-1抑制细胞生长的IC50值在30-60 nM范围内。其作用机制还包括通过产生活性氧（ROS）导致DNA片段化，这进一步增强了其强大的细胞毒性作用。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
KP372-1（10、20 mg/kg；静脉注射；每日一次，持续 33 天）可抑制体内肿瘤的生长，并引起 NADH 氧化，且似乎无害[2]。
体内实验表明，KP372-1 能有效抑制动物模型中的肿瘤生长。全身给药后，该化合物利用肿瘤中 NQO1 的高表达产生有害的活性氧（ROS），同时抑制促生存的 AKT 通路。这种联合作用可显著抑制癌细胞/肿瘤细胞的生长并诱导细胞死亡，从而减轻肿瘤负荷。 |
| 酶活实验 |
采用标准的无细胞检测方法测定KP372-1的两个主要靶点。对于AKT抑制，采用激酶活性测定法。将重组活性AKT1酶（10-50 ng）与不同浓度的KP372-1（0-1000 nM）在反应缓冲液（50 mM HEPES，pH 7.5，10 mM MgCl2，1 mM DTT）中孵育，同时加入合成肽底物和10 uM ATP。在22℃下孵育30分钟后，终止反应并测定磷酸化底物的水平，例如使用基于发光的检测方法（如ADP-Glo）或时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）方法。根据所得抑制曲线计算AKT抑制的IC50值。对于NQO1氧化还原循环活性，采用无细胞酶活性测定法。将纯化的NQO1酶（50 nM）与不同浓度的KP372-1（0-100 uM）在含有100 uM NADH（作为电子供体）和细胞色素c（50 uM）（作为电子受体）的Tris-HCl缓冲液（pH 7.4）中孵育。通过测量550 nm处吸光度在5-10分钟内的增加来监测细胞色素c的还原。在KP372-1存在下还原速率的增加表明存在NQO1依赖的氧化还原循环活性。
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| 细胞实验 |
细胞增殖实验[1]
细胞类型： JMARc42 和 Tu167c2 细胞 测试浓度： 0.0625、0.125、0.25、0.5、1.0 µM 孵育时间： 48 小时 实验结果： 显示出抗增殖活性。 细胞凋亡分析[1] 细胞类型： Tu167c2 和 JMARc42 细胞 测试浓度： 125 nM 孵育时间： 24 小时 实验结果： 诱导约 90% 的细胞凋亡。 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型： Tu167 和 JMAR 细胞 测试浓度： 125 nM 孵育时间： 30 分钟 实验结果： 诱导 Akt 磷酸化水平出现轻微但持续的下降，同时 S6 磷酸化水平也显著下降。抑制 EGF 诱导的 Tu167 细胞中 AktSer473 和 JMAR 细胞中 AktThr308 的磷酸化。 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型： JMAR 细胞 测试浓度： 0.250、0.5、1.0 µM 孵育时间： 30 分钟 实验结果： 以剂量依赖的方式显著抑制 Akt 激酶活性，IC50 为 250 nM。 对于体外细胞实验，将高表达NQO1的人类癌细胞系，例如H1299肺癌细胞或MIA PaCa-2胰腺癌细胞，接种于96孔板（5000个细胞/孔），培养基为DMEM/10% FBS。24小时后，用不同浓度的KP372-1（0.01-10 uM）处理细胞。48-72小时后，使用CellTiter-Glo发光法检测细胞活力。为评估细胞凋亡，收集用KP372-1处理24小时的细胞，用Annexin V-FITC和碘化丙啶（PI）染色，然后进行流式细胞术分析。为检测细胞内活性氧（ROS），将细胞用10 uM DCFH-DA孵育30分钟，洗涤后，再用KP372-1处理。通过实时测量荧光强度（激发波长 485 nm，发射波长 535 nm）的增加来量化 ROS 的产生。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：裸鼠（H1299异种移植模型）[2]。
剂量：10、20 mg/kg 给药途径：尾静脉注射；每日一次，持续33天 实验结果：影响肿瘤代谢并抑制肿瘤生长。 KP372-1 的体内疗效研究通常在携带人源肿瘤异种移植瘤的无胸腺裸鼠中进行。将 5×10⁶ 个癌细胞（例如 H1299）皮下注射到 6-8 周龄的雌性小鼠体内。当肿瘤平均体积达到 100-150 mm³ 时，将小鼠随机分为治疗组（n=8）。KP372-1 配制成溶剂，例如乙醇、Cremophor EL 和生理盐水按 1:1:18 的比例混合，并每日静脉注射（例如 2 mg/kg）或腹腔注射（例如 5-10 mg/kg），持续 2-3 周。每 2-3 天测量一次肿瘤体积（长 × 宽² × 0.5）和体重。研究结束时，切除肿瘤，称重，并进行组织学处理（例如，H&E 和 TUNEL 染色）以评估细胞死亡，并制备裂解物进行蛋白质印迹分析，以评估 AKT 信号抑制和凋亡标志物诱导。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
KP372-1 是一种小分子，可配制成静脉或腹腔注射给药的制剂。现有检索结果并未详细描述其药代动力学特性。它在 DMSO 中的溶解度可达 100 mM。需要针对特定制剂测定其临床前药代动力学参数。鉴于其是一种氧化还原循环剂，其半衰期可能相对较短。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
由于KP372-1主要用作研究工具，因此其临床前毒性研究有限。在异种移植模型中使用的有效剂量下，未报告明显的脱靶毒性，但对动物体重和行为的密切监测仍是常规操作。作为一种NQO1靶向药物，预计其在NQO1高表达的组织（例如某些肿瘤类型）中的毒性会更高。应遵循研究用化学品的标准安全操作规程。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
KP372-1 是一种多靶点抗癌药物，它能抑制 AKT 并作为 NQO1 氧化还原循环剂发挥作用。其双重机制可有效抑制肿瘤细胞生长并通过 ROS 生成诱导细胞凋亡。该药物已在临床前研究中进行评估，但尚未进入临床试验，也未获得 FDA 批准。目前仅用于研究用途。CAS 编号：1374996-60-7。
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| 分子式 |
C20H8N12O2
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|---|---|
| 分子量 |
448.36
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| 精确质量 |
448.089
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| CAS号 |
1374996-60-7
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| 相关CAS号 |
PDK1/Akt/Flt dual pathway inhibitor;331253-86-2
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| PubChem CID |
49835991
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| tPSA |
172
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
12
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| 可旋转键数目(RBC) |
0
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| 重原子数目 |
34
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| 分子复杂度/Complexity |
699
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C1=CC=C2C(=C1)C3=NC4=NN=NN4N=C3C2=O.C1=CC=C2C(=C1)C3=NN4C(=NN=N4)N=C3C2=O
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| InChi Key |
CWFOAASSUQIXOW-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/2C10H4N6O/c17-9-6-4-2-1-3-5(6)7-8(9)11-10-12-14-15-16(10)13-7;17-9-6-4-2-1-3-5(6)7-8(9)13-16-10(11-7)12-14-15-16/h2*1-4H
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| 化学名 |
10,11,12,13,14,16-hexazatetracyclo[7.7.0.02,7.011,15]hexadeca-1(16),2,4,6,9,12,14-heptaen-8-one;10,12,13,14,15,16-hexazatetracyclo[7.7.0.02,7.011,15]hexadeca-1(16),2,4,6,9,11,13-heptaen-8-one
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 17.86 mg/mL (39.83 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2304 mL | 11.1518 mL | 22.3035 mL | |
| 5 mM | 0.4461 mL | 2.2304 mL | 4.4607 mL | |
| 10 mM | 0.2230 mL | 1.1152 mL | 2.2304 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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