| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
EC50: 19 nM (hM4)[1].
CAS# 2101737-32-8. VU6000918 targets the muscarinic acetylcholine M4 receptor (M4 mAChR). It acts as a positive allosteric modulator (PAM), binding to an allosteric site on the M4 receptor and enhancing the receptor's response to the endogenous agonist acetylcholine. The EC₅0 for hM4 is 19 nM. It is highly selective for M4 over other muscarinic receptor subtypes (M1, M2, M3, M5) and over a broad panel of other GPCRs, ion channels, and kinases. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
根据研究动物体内测得的终末浓度（给药 17j 后 1.5 小时），VU6000918 在低口服剂量 0.03 mg/kg 时即可表现出统计学意义上的显著 AHL 逆转作用（18%），并在 3 mg/kg 剂量下达到最大逆转作用（74%）。这导致体内血浆 EC50 为 74 nM（游离浓度为 0.66 nM）[1]。
在体外，VU6000918 可增强表达重组或天然 M4 受体的细胞中 M4 介导的信号传导。在亚最大乙酰胆碱浓度下，它能提高乙酰胆碱的效力和效能，从而增强 Gαi 介导的腺苷酸环化酶抑制作用并降低 cAMP 生成。在纹状体神经元（高表达 M4）的电生理研究中，VU6000918 可增强乙酰胆碱对神经元放电的抑制作用。该化合物的效力（EC₅0 19 nM）和选择性使其成为体外研究 M4 依赖性功能的有效工具。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
体内实验表明，VU6000918 低剂量口服（0.03 mg/kg）即可显著逆转苯丙胺诱导的活动过度（AHL）（18%），3 mg/kg 剂量可达到最大逆转效果（74%），给药后 1.5 小时测得的血浆 EC₅0 为 74 nM（游离浓度为 0.66 nM）。这表明 VU6000918 是一种有效的体内 M4 PAM，具有潜在的抗精神病样作用。该化合物可穿透血脑屏障，且口服有效。目前已在精神病和认知障碍的临床前模型中对其进行了评估。
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| 酶活实验 |
用于 VU6000918 的标准无细胞结合实验采用稳定表达人 M4 受体的 HEK-293 或 CHO 细胞膜。将膜（10-20 ug 蛋白）与 1-2 nM [3H]N-甲基莨菪碱 ([3H]NMS) 和不同浓度的 VU6000918 (0.01-1000 nM) 在含有 1 mM MgCl2、5 mM EDTA 和 0.1% BSA 的 50 mM Tris-HCl 缓冲液 (pH 7.4) 中于 23℃ 孵育 60-90 分钟。使用 10 uM 阿托品测定非特异性结合。结合的放射性配体通过预先浸泡在 0.3% 聚乙烯亚胺中的 GF/B 滤膜快速过滤分离，然后用冰冷的缓冲液洗涤三次。滤膜结合放射性通过液体闪烁计数法测定。对于变构结合，通常使用放射性标记的PAM（例如[3H]VU6000918），但该PAM目前尚无商业化产品。另一种方法是进行功能性竞争结合实验，使用[3H]NMS和EC₈0浓度的乙酰胆碱，并测量在VU6000918存在下[3H]NMS结合亲和力的增加（或竞争曲线的右移）。
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| 细胞实验 |
对于细胞实验，将稳定表达人M4受体的HEK-293或CHO细胞接种于96孔板（每孔40,000个细胞），并在DMEM/10% FBS培养基中培养48小时。对于cAMP抑制实验（M4受体与Gi蛋白偶联），将细胞在37℃下用0.5 mM IBMX预孵育15分钟，然后在1 uM福斯克林存在下，用不同浓度的VU6000918（0.01-1000 nM）和亚最大浓度的乙酰胆碱（EC20，例如10-50 nM）处理。30分钟后，裂解细胞，并通过HTRF或ELISA定量cAMP水平。增强作用的EC₅0（VU6000918 浓度，可使乙酰胆碱介导的 cAMP 抑制作用达到半数最大增强）由浓度-反应曲线确定（通常 hM4 为 19 nM）。在钙动员实验中，细胞与 Gα15 共转染，以使 M4 信号通路重定向至钙通路。细胞在 HBSS/HEPES 缓冲液中用 Fluo-4 AM (2.5 uM) 孵育 60 分钟，然后用 VU6000918 (0.01-1000 nM) 预孵育 5-10 分钟，最后用 EC20 浓度的乙酰胆碱刺激。测量荧光强度（激发波长 485 nm，发射波长 525 nm）。计算增强百分比。对于电生理学，从表达 M4 的细胞或纹状体中型棘状神经元进行全细胞膜片钳记录；在亚最大浓度的乙酰胆碱存在下施加 VU6000918，并测量 GIRK 通道电流（通过 Gbetagamma）的增加。
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| 动物实验 |
体内研究采用雄性Sprague-Dawley大鼠（250-300 g）或C57BL/6小鼠（20-30 g）。VU6000918配制于10% DMSO/40% PEG300/5% Tween-80/45%生理盐水或0.5%甲基纤维素溶液中，并在测试前30-60分钟口服给药（0.03-10 mg/kg）。对于苯丙胺诱导的运动过度（AHL）模型，小鼠腹腔注射d-苯丙胺（1-3 mg/kg）以诱导运动过度。VU6000918在注射苯丙胺前30分钟口服给药。在开放式场地（40 × 40 × 40 cm）中测量小鼠的运动活性，持续60-90分钟。记录小鼠的总运动距离和刻板行为次数。 AHL逆转百分比的计算公式为：(（安非他明+赋形剂-安非他明+VU6000918）/（安非他明+赋形剂-生理盐水+赋形剂）)×100。对于认知模型（新物体识别），在学习试验前30分钟口服给予VU6000918（0.03-3 mg/kg）。延迟2小时后进行保持试验，并测量区分指数。对于PK/PD相关性研究，在给药后1.5小时（或试验结束时）采集血液和脑组织样本，用于LC-MS/MS测定VU6000918的浓度。据报道，AHL逆转的游离血浆EC₅₀为74 nM（游离浓度为0.66 nM）。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
VU6000918（分子量 389.42，C18H17F2N5OS）是一种小分子，具有良好的口服生物利用度（啮齿动物估计为 40-60%）和脑渗透性（脑/血浆比约为 0.5-1.0）。口服给药后，大鼠血浆半衰期约为 2-4 小时。血浆峰浓度在 0.5-1 小时内出现。该化合物经肝脏 CYP450 酶（可能是 CYP3A4）代谢，并经粪便和尿液排泄。溶解度：DMSO 125 mg/mL（超声溶解）。粉末在 -20℃ 下可稳定保存 3 年。详细的药代动力学参数尚未完全发表。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
临床前毒性数据有限。口服剂量高达 10 mg/kg 时，未见明显不良反应或死亡报告。更高剂量下，由于 M4 PAM 活性，可能出现轻度镇静和运动活性降低。未见肝毒性或肾毒性报告。无遗传毒性、致癌性或生殖毒性数据。VU6000918 仅供研究使用，未经批准用于人体。应遵循标准安全预防措施。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
VU6000918（CAS 2101737-32-8）是一种高效且选择性强的M4毒蕈碱型乙酰胆碱受体正向变构调节剂（EC₅0 19 nM）。它能穿透血脑屏障，口服有效，并在动物模型中显示出抗精神病样疗效。该化合物已被研究作为治疗精神疾病的潜在药物，但尚未进入临床试验，也未获得FDA批准。储存：粉末，-20℃保存。
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| 分子式 |
C18H17F2N5OS
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|---|---|
| 分子量 |
389.42
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| 精确质量 |
389.112
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| CAS号 |
2101737-32-8
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| PubChem CID |
137635043
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| LogP |
3.3
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| tPSA |
112
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
27
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| 分子复杂度/Complexity |
566
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C12SC(C(NC3CN(C4=CC=CC(F)=C4F)C3)=O)=C(N)C1=C(C)C(C)=NN=2
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| InChi Key |
KWYCAGNWNMBWOL-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C18H17F2N5OS/c1-8-9(2)23-24-18-13(8)15(21)16(27-18)17(26)22-10-6-25(7-10)12-5-3-4-11(19)14(12)20/h3-5,10H,6-7,21H2,1-2H3,(H,22,26)
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| 化学名 |
5-amino-N-[1-(2,3-difluorophenyl)azetidin-3-yl]-3,4-dimethylthieno[2,3-c]pyridazine-6-carboxamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 125 mg/mL (320.99 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5679 mL | 12.8396 mL | 25.6792 mL | |
| 5 mM | 0.5136 mL | 2.5679 mL | 5.1358 mL | |
| 10 mM | 0.2568 mL | 1.2840 mL | 2.5679 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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