Acyl coenzyme A synthetase (ACS)

别名: acyl-CoA synthetase; Acyl coenzyme A Synthetase; SCHEMBL29280531 酯酰辅酶A合成酶;乙酰辅酶A合成酶;Acyl-CoA Synthetase 酯酰辅酶A合成酶;酰基辅酶A合成酶;酰基-辅酶 A 合成酶;ACYL-COA SYNTHETASE 酯酰辅酶A合成酶;乙酰辅酶A合成酶
目录号: V71016 纯度: ≥98%
酰基辅酶A合成酶(ACS)即乙酰辅酶A合成酶,广泛应用于生化研究。
Acyl coenzyme A synthetase (ACS) CAS号: 9013-18-7
产品类别: Endogenous Metabolite
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
酰基辅酶A合成酶(ACS)即乙酰辅酶A合成酶,广泛应用于生化研究。酰基辅酶A合成酶可催化辅酶A活化脂肪酸,通过两步硫酯化反应生成酰基辅酶A,从而参与多种合成代谢和分解代谢脂质代谢途径,并参与有氧呼吸中的TCA循环。
酰基辅酶A合成酶(ACS),酶学委员会编号EC 6.2.1.3,是一种广泛存在于生物体内的关键代谢酶,属于腺苷酸形成酶超家族。它的核心功能是催化游离脂肪酸与辅酶A(CoA)的硫酯化反应,通过两步反应将脂肪酸“激活”为相应的酰基辅酶A(acyl-CoA)。这一激活过程是脂肪酸进入后续分解代谢(如β-氧化)和合成代谢(如甘油三酯、磷脂合成)的必需步骤,也是连接糖代谢与脂代谢的重要节点。
生物活性&实验参考方法
靶点
ACS itself is an enzyme rather than a drug, and its substrates serve as its "targets." Based on substrate specificity, ACS acts on fatty acids of varying chain lengths. Long-chain ACS primarily acts on C6 to C26 saturated and unsaturated long-chain fatty acids; the liver enzyme acts on acids from C6 to C20, while the brain enzyme shows activity up to C24. Additionally, ACS utilizes ATP and CoA as co-substrates, and its activity is subject to feedback regulation by cellular energy charge and the product acyl-CoA. In research, ACS is often targeted as a drug target for modulating lipid metabolism.
体外研究 (In Vitro)
在体外,ACS的活性通过其催化脂肪酸、ATP和CoA生成AMP、焦磷酸(PPi)和酰基辅酶A的反应速率来测定。商业化的ACS制剂(如来源于Pseudomonas sp.)的比活性通常≥2 units/mg蛋白。一个活性单位定义为:在pH 8.1、25°C条件下,每分钟催化生成1.0 μmol AMP(或油酰辅酶A)所需的酶量。该酶对多种脂肪酸均有活性,例如对庚酸(heptanoate)的相对活性约为辛酸(octanoate)的2.37倍。
体内研究 (In Vivo)
在体内,ACS的活性对于维持脂质代谢稳态至关重要。研究表明,ACS蛋白参与调节和促进哺乳动物细胞对长链脂肪酸的摄取。通过将脂肪酸活化为酰基辅酶A,ACS不仅为β-氧化提供底物,还为甘油三酯、磷脂和胆固醇酯的合成提供活性中间体。此外,ACS在脂肪细胞中与脂肪酸转运蛋白相互作用,介导长链脂肪酸的高效跨膜转运。不同组织来源的ACS对底物的偏好性差异反映了其在各组织中的特异性生理功能。
酶活实验
ACS的体外活性检测经典方法是连续分光光度法或同位素标记法。以分光光度法为例:反应体系包含50-100 mM Tris-HCl缓冲液(pH 8.1)、5-10 mM ATP、0.5 mM CoA、10 mM MgCl₂、0.1-1 mM脂肪酸底物(如油酸),以及适量ACS酶液。由于ACS反应直接产物AMP和PPi难以检测,常通过偶联丙酮酸激酶(PK)和乳酸脱氢酶(LDH)系统,将生成的AMP或PPi转化为NADH的消耗,在340 nm处监测吸光度的下降。反应在25-37°C下进行,通过初始线性速率计算酶活性。
细胞实验
在细胞水平研究ACS功能时,通常采用脂肪酸摄取实验或脂质合成检测。以脂肪酸摄取为例:将贴壁细胞(如肝细胞或脂肪细胞)接种于24孔板,培养至融合。换用无血清培养基饥饿处理2-4小时以降低内源性脂肪酸水平。随后加入荧光标记或放射性标记(如³H或¹⁴C)的脂肪酸(如棕榈酸),同时设置ACS抑制剂组(如Triacsin C)和溶剂对照组。37°C孵育0.5-2小时后,用预冷的含脂肪酸结合蛋白(如BSA)的缓冲液终止反应并洗涤细胞以去除表面吸附的游离脂肪酸。裂解细胞,通过闪烁计数或荧光检测定量细胞摄取量,间接反映细胞内ACS的活性水平。
动物实验
在动物模型中研究ACS的功能或评估其抑制剂,常用高脂喂养模型或基因敲除小鼠。以抑制剂研究为例:选取C57BL/6J小鼠,通过高脂饲料诱导形成肥胖和脂肪肝模型。模型建立后,随机分为给药组(腹腔注射或灌胃给予ACS抑制剂,如Triacsin C,剂量2-10 mg/kg)和对照组(给予等量溶剂)。每日给药一次,持续2-4周。实验期间监测体重、摄食量和血糖。实验结束后处死动物,采集血液和肝组织。检测血清中的甘油三酯、游离脂肪酸(NEFA)水平,并对肝组织进行油红O染色和脂质含量测定,以评估ACS抑制对脂质代谢的影响。
药代性质 (ADME/PK)
关于ACS酶本身的药代动力学参数,目前公开文献中尚无直接的系统性报道,因为ACS作为蛋白质酶,不直接作为药物使用。然而,对于小分子ACS抑制剂,其PK性质因化合物结构而异。ACS主要定位于细胞质和线粒体外膜,在肝脏、脂肪组织和脑等代谢活跃组织中高表达。在微生物来源的ACS研究中,其米氏常数(Km)分别为:对ATP约为0.5 mM,对辛酸约为0.15 mM。由于ACS是内源性酶,其“体内半衰期”主要受蛋白质周转速率调控,而非传统的药物代谢动力学。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
关于Acyl coenzyme A synthetase(9013-18-7)的毒理学数据,目前公开文献中未见详细的系统性毒性研究报告。根据供应商提供的产品安全信息,该产品为生物化学试剂,明确仅供科研使用,不适用于人体治疗、诊断或兽医用途。在常规生化实验操作中,应遵循标准的安全防护措施(如佩戴手套、护目镜和实验服),避免直接吸入或接触皮肤。ACS作为内源性酶,在生理水平下不表现出毒性。
参考文献
[1]. Physiological role of Acyl coenzyme A synthetase homologs in lipid metabolism in Neurospora crassa. Eukaryot Cell. 2013 Sep;12(9):1244-57.
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
精确质量
1802.613
CAS号
9013-18-7
PubChem CID
168009927
外观&性状
White to off-white solid powder
tPSA
302
氢键供体(HBD)数目
7
氢键受体(HBA)数目
7
可旋转键数目(RBC)
7
重原子数目
124
分子复杂度/Complexity
1180
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
NYXALROAXMFXEX-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/5C15H16ClNO.2C14H14ClNO/c3*1-8-5-9-6-13-10(12(9)7-14(8)16)3-2-4-11(13)15(17)18;2*1-8-5-9(16)6-13-10-3-2-4-11(15(17)18)14(10)7-12(8)13;2*15-9-5-4-8-6-13-10(12(8)7-9)2-1-3-11(13)14(16)17/h3*5,7,11H,2-4,6H2,1H3,(H2,17,18);2*5-6,11H,2-4,7H2,1H3,(H2,17,18);2*4-5,7,11H,1-3,6H2,(H2,16,17)
化学名
6-chloro-7-methyl-2,3,4,9-tetrahydro-1H-fluorene-1-carboxamide;6-chloro-8-methyl-2,3,4,9-tetrahydro-1H-fluorene-1-carboxamide;6-chloro-2,3,4,9-tetrahydro-1H-fluorene-1-carboxamide
别名
acyl-CoA synthetase; Acyl coenzyme A Synthetase; SCHEMBL29280531
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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