| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
CLOCK[1]
The primary target of CLK8 is the CLOCK protein. It binds to and interferes with CLOCK activity, specifically disrupting the protein-protein interaction between CLOCK and BMAL1. CLK8 does not affect the interaction of CLOCK with other mutants like CLOCK-F80A or K220A, confirming its selectivity for the native binding interface with BMAL1. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在U2OS和NIH 3T3细胞中，CLK8（10-40 μM；4-6天）以剂量依赖的方式增加Bmal1-dLuc信号的幅度，且不引起周期性变化[1]。在HEK293T细胞中，CLK8（10-40 μM）减弱BMAL1-CLOCK的连接，但对CLOCK-F80A、K220A和BMAL1之间的相互作用没有影响[1]。在U2OS细胞中，CLK8（20 μM；2天）降低CLOCK的核定位[1]。
体外实验表明，CLK8 通过调节昼夜节律的振幅发挥其活性。在 U2OS 和 NIH 3T3 细胞中，用浓度为 10 至 40 uM 的 CLK8 处理 4 至 6 天，可剂量依赖性地增强 Bmal1-dLuc 报告基因信号的振幅，而不会改变振荡周期。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在小鼠肝脏全细胞裂解液中，CLK8（25 mg/kg；单次腹腔注射）可降低 CLOCK 水平，而对 BMAL1 和 CRY1 水平无影响[1]。在 5 和 25 mg/kg 剂量下，CLK8（5-1000 mg/kg；腹腔注射）未引起任何死亡或临床症状（呼吸困难、反射减弱、运动减少、竖毛、驼背和角膜混浊）[1]。
体内实验表明，CLK8 能有效降低小鼠体内 CLOCK 蛋白水平。单次腹腔注射 25 mg/kg 的 CLK8 可降低小鼠肝脏全细胞裂解液中的 CLOCK 蛋白水平。这种降低具有特异性，因为其他昼夜节律蛋白（如 BMAL1 和 CRY1）的水平保持不变。 |
| 酶活实验 |
这些文献中并未描述标准的非细胞CLK8检测方法，因为其作用机制涉及破坏蛋白质-蛋白质相互作用。然而，为了研究其结合，可以进行表面等离子共振（SPR）检测。将重组CLOCK和BMAL1蛋白固定在芯片上，然后通入不同浓度的CLK8，以测量其结合亲和力和动力学。
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| 细胞实验 |
为了测量 CLK8 对生物钟的影响，我们使用稳定表达 Bmal1-dLuc 报告基因的 U2OS 或 NIH 3T3 细胞。首先用 100 nM 地塞米松处理细胞 2 小时使其同步化。然后，将培养基更换为含有不同浓度 CLK8（10-40 uM）的新鲜培养基。在 37℃ 下，使用发光仪连续记录 4-6 天的发光强度，以测量其对生物钟振幅和周期的影响。
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| 动物实验 |
动物/疾病模型：雄性C57BL/6J小鼠（8周龄，18-24 g）[1]
剂量：25 mg/kg 给药途径：单次腹腔注射 实验结果：在小鼠肝脏全细胞裂解液中检测到CLOCK水平降低，而BMAL1和CRY1水平未发生改变。细胞核内CLOCK丰度降低。胞质和细胞核内BMAL1和CRY1丰度未发生改变。Cry1转录水平降低。 CLK8 的体内实验方案包括将该化合物注射到 C57BL/6J 小鼠体内。将 25 mg/kg 的 CLK8 溶于溶剂（例如，5% DMSO、45% PEG300 和 50% 水）中，并通过腹腔注射给药。在指定时间（例如，6-12 小时）后，处死小鼠并收集肝组织。然后通过蛋白质印迹法分析肝组织裂解液中 CLOCK 蛋白的水平。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
CLK8的具体药代动力学数据尚不详细。然而，一项毒性研究表明其耐受性良好。单次腹腔注射25 mg/kg即可降低肝脏中CLOCK蛋白的水平，这表明该化合物可通过此给药途径获得全身生物利用度，但未提供诸如t1/2或Cmax等详细参数。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
对小鼠进行了毒性评估。CLK8 通过腹腔注射给药，剂量范围为 5 至 1000 mg/kg。在 5 和 25 mg/kg 剂量下，未观察到死亡或毒性临床症状。监测的临床症状包括呼吸困难、反射减弱、运动活性降低、竖毛、弓背姿势和角膜混浊。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
CLK8 是一种独特的药理学工具，因为它靶向的是 CLOCK 和 BMAL1 之间的蛋白质-蛋白质相互作用，而非酶活性位点。这种作用机制能够在不改变周期长度的情况下调节昼夜节律的振幅，这可能有利于治疗与昼夜节律减弱相关的疾病，例如某些睡眠障碍或代谢综合征。
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| 分子式 |
C29H26N2O6
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|---|---|
| 分子量 |
498.526547908783
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| 精确质量 |
498.179
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| CAS号 |
898920-65-5
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| PubChem CID |
4869040
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
4.4
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| tPSA |
117
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
37
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| 分子复杂度/Complexity |
910
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C(N)(=O)C1=CC=CC=C1NC(COC1=C2C(C3=CC=CC=C3)=CC(=O)OC2=C2CCC(C)(C)OC2=C1)=O
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| InChi Key |
SVELPNHVEDZZRQ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C29H26N2O6/c1-29(2)13-12-19-22(37-29)15-23(35-16-24(32)31-21-11-7-6-10-18(21)28(30)34)26-20(14-25(33)36-27(19)26)17-8-4-3-5-9-17/h3-11,14-15H,12-13,16H2,1-2H3,(H2,30,34)(H,31,32)
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| 化学名 |
2-[[2-[(8,8-dimethyl-2-oxo-4-phenyl-9,10-dihydropyrano[2,3-h]chromen-5-yl)oxy]acetyl]amino]benzamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 50 mg/mL (100.29 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0059 mL | 10.0295 mL | 20.0590 mL | |
| 5 mM | 0.4012 mL | 2.0059 mL | 4.0118 mL | |
| 10 mM | 0.2006 mL | 1.0029 mL | 2.0059 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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