| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
TRFS-green targets the selenoprotein thioredoxin reductase (TrxR), an important enzyme in cellular redox regulation. The probe itself is a substrate for TrxR, which reduces its disulfide bond. This reduction triggers a specific chemical reaction (intramolecular cyclization) that results in the unmasking of a naphthalimide fluorophore, leading to a strong fluorescent signal. This makes it a highly specific tool for detecting TrxR activity.
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| 体外研究 (In Vitro) |
TrxR介导的二硫键断裂和随后的分子内环化反应释放出被包裹的萘酰亚胺荧光团，导致TRFS-green呈现绿色荧光开关特性[1]。当用377 nm光激发时，TRFS-green在约480 nm处会发出微弱的信号。通过以剂量依赖的方式用TrxR抑制剂预处理活细胞，可以阻断活细胞中TRFS-green的荧光信号，从而有助于建立基于活细胞的TrxR抑制剂筛选方法[1]。细胞中的两种主要硫醇GSH和Cys，以及内源性还原剂如维生素C和NADPH，对TRFS-green没有影响[1]。评估粗细胞提取物中的TrxR活性[1]：使用荧光计（发射波长540 nm，激发波长440 nm）评估细胞裂解液与TRFS-green孵育推荐时间（约1-2小时）后的荧光强度。此外，还可以观察到一定时间内荧光强度的增加（发射波长540 nm，激发波长440 nm）。通过显微镜的绿色荧光通道，可以观察到用10 μM TRFS-green处理2-4小时的细胞[1]。注意：建议在拍照前用PBS或新鲜培养基清洗细胞，以去除残留的TRFS-green，从而获得清晰的荧光图像。第一个用于TrxR的绿色荧光探针称为TRFS-green。然而，TRFS-green 与酶的反应很慢，即使在还原剂三（2-羧乙基）膦（TCEP）的情况下，也需要两个多小时才能产生最大的荧光信号[2]。
体外实验表明，TRFS-green 对 TrxR 具有高度选择性，优于其他相关酶以及细胞内丰富的还原剂，例如谷胱甘肽 (GSH)、半胱氨酸 (Cys)、NADPH 和维生素 C。该探针在 373 nm 附近具有最大吸收峰，激活后发出绿色荧光，发射信号位于 480 nm 附近。其荧光强度增加倍数适中（约 30 倍），但响应速度相对较慢，通常需要 2 小时或更长时间才能达到最大信号强度。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在活细胞中，TRFS-green 的活性可通过成像实时观察活细胞内 TrxR 的活性。它可用于活细胞成像，以可视化 TrxR 的活性位置和强度。例如，如果细胞预先用 TrxR 抑制剂处理，TRFS-green 的荧光信号会以剂量依赖的方式降低，从而验证其特异性。这使得研究人员能够在细胞层面监测 TrxR 活性对各种药物或基因操作的反应。
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| 酶活实验 |
TRFS-green 可用于无细胞生化分析，以评估裂解液或蛋白提取物中的 TrxR 活性。将探针与样品孵育后，使用荧光微孔板读数仪或分光光度计测量荧光强度（激发波长约 377 nm，发射波长约 480 nm）随时间的变化。荧光强度增加速率与样品中的 TrxR 活性成正比，因此可以高通量地定量酶活性或筛选潜在的 TrxR 抑制剂。
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| 细胞实验 |
对于基于细胞的实验，将细胞接种于适合荧光成像的培养皿或多孔板中。向细胞培养基中加入TRFS-green（通常浓度为1-10 uM），并孵育一段时间（例如2小时或更长时间）。孵育后，用PBS洗涤细胞以去除过量的探针，然后使用荧光显微镜或配备合适滤光片组的酶标仪（例如，激发波长~377 nm，发射波长~480 nm）进行成像。观察到的绿色荧光强度与细胞中活性TrxR的水平相关。
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| 动物实验 |
TRFS-Green 通常不用于整体动物研究。然而，它可用于对从动物身上采集的组织样本进行离体检测。例如，从疾病动物模型中，可以采集脑、肝或肿瘤等组织，进行匀浆处理，然后将裂解液用于如上所述的无细胞活性检测。这使得研究人员能够测量组织中的 TrxR 酶活性，并将其与疾病状态或治疗效果相关联。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
TRFS-green 是一种化学探针而非药物，因此不具备经典的药代动力学参数。在细胞培养中，其摄取和激活具有时间依赖性，通常在 2 小时或更长时间后达到最大信号强度。该探针可透过细胞膜，并在培养基中稳定。应将其以粉末形式储存于 -20℃，避光保存。使用时，可将其溶解于 DMSO 等有机溶剂中配制成储备液，然后在实验中用水性缓冲液稀释。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
TRFS-green 是一种研究用化学品，不适用于治疗用途。其具体的毒理学数据尚不充分。然而，它被设计成一种低毒性的荧光探针，用于活细胞成像。操作荧光染料和化学试剂时，应遵守标准的实验室安全预防措施，包括佩戴手套、实验服和护目镜。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
TRFS-green并非药物，而是一种高度特异性的荧光探针，专用于科研。它用于研究硫氧还蛋白还原酶（TrxR）的生物学特性，TrxR是细胞抗氧化防御系统中的关键酶。TRFS-green是了解TrxR在癌症、神经退行性疾病以及其他氧化应激相关疾病中作用的有力工具。其对TrxR的选择性使其成为研究该酶的理想选择，优于其他特异性较低的氧化还原探针。
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| 分子式 |
C20H20N2O4S2
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|---|---|
| 分子量 |
416.513802528381
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| 精确质量 |
416.086
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| CAS号 |
1513848-14-0
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| PubChem CID |
73670302
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
3.5
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| tPSA |
126
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
28
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| 分子复杂度/Complexity |
625
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
S1CC(CS1)OC(NC1=CC=C2C(N(C(C3C=CC=C1C2=3)=O)CCCC)=O)=O
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| InChi Key |
MUAYCZWBPDUZKR-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H20N2O4S2/c1-2-3-9-22-18(23)14-6-4-5-13-16(8-7-15(17(13)14)19(22)24)21-20(25)26-12-10-27-28-11-12/h4-8,12H,2-3,9-11H2,1H3,(H,21,25)
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| 化学名 |
dithiolan-4-yl N-(2-butyl-1,3-dioxobenzo[de]isoquinolin-6-yl)carbamate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 25 mg/mL (60.02 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4009 mL | 12.0045 mL | 24.0090 mL | |
| 5 mM | 0.4802 mL | 2.4009 mL | 4.8018 mL | |
| 10 mM | 0.2401 mL | 1.2005 mL | 2.4009 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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