16α-Hydroxyestrone (16αOHE) 中文名称: 16alpha-羟基雌酚酮

别名: 16alpha-羟基雌酚酮;16α-羟基雌酮;16a-羟基雌甾酮;16α-羟基雌酚酮标准品

目录号: V72346 纯度: ≥98%

COA 产品数据产品说明书 SDS

16α-羟基雌酮 (16αOHE) 是雌二醇的主要代谢物。

16α-Hydroxyestrone (16αOHE) CAS号: 566-76-7
产品类别: Endogenous Metabolite

产品仅用于科学研究，不针对患者销售

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Nature 2025, 643(8070):192-200.

Nature 2024 Dec 18.

Nature 2021, 597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022: 8, eabm9427.

Nat Neurosci 2024, 27:1468-1474.

Nat Comput Sci. 2026, 6:704-717

Cell Biomaterials 2026

Nat Comm 2026, 17(1):3410

Science Adv 2025, 11(33):eadr5199.

Nat Metab 2024, 6: 1108-1127.

Cell Stem Cell 2024, 31:106-126.e13.

Nature 597, 119–125 (2021)

Cell Stem Cell 2020,26(6):845-861.e12.

Science Trans Med 2023,15(701):eadd7872.

STTT 2023,8(1):91.

Cell Reports 2023,42(4):112313

Science Trans Med 2023, 15: eadd7872.

Cancer Cell 2021,39(4):529-547.e7.

Cancer Discov 2022,12(4):1106-1127.

Immunity 2023,56(3):620-634.e11.

Immunity 2024,57:2651-2668.e12.

J Am Chem Soc 2022,144:21831-21836.

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Science Adv 2022:8,eabm9427.

Nature 2021,597(7874):119-125.

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PNAS Nexus 2022,1(3):pgac063.

ACS Nano 2023,17(10):9110-9125.

Biomaterial 2023 Sep16:302:122333.

产品描述
生物活性&实验参考方法
化学信息
溶解度数据
计算器

产品描述

16α-羟基雌酮（16αOHE）是雌二醇的主要代谢产物。16α-羟基雌酮（16αOHE）可用于研究代谢性疾病。
16alpha-羟基雌酮（16alphaOHE；CAS：566-76-7）是雌酮（人体内的主要雌激素）的内源性代谢产物。它是由雌酮经细胞色素P450酶（尤其是CYP3A4）16alpha-羟基化生成的。16alpha-羟基雌酮的分子式为C18H22O3，分子量为286.37。它是雌二醇和雌酮的三种主要代谢产物之一，另外两种是2-羟基雌酮和4-羟基雌酮。

生物活性&实验参考方法

靶点	Human Endogenous Metabolite 16alpha-Hydroxyestrone targets the estrogen receptor (ERalpha and ERbeta), similar to other estrogens. It binds to estrogen receptors with lower affinity than estradiol but with greater potency than 2-hydroxyestrone. 16alpha-Hydroxyestrone has been reported to exhibit estrogenic activity and can covalently bind to estrogen receptors via its reactive keto group. It may also influence other hormone-sensitive pathways.
体外研究 (In Vitro)	雌激素的活性代谢产物 16α-羟基雌酮和 E3 水平升高与较高的骨矿物质密度有关 [1]。体外实验表明，16α-羟基雌酮具有雌激素活性，能够刺激雌激素依赖性乳腺癌细胞系（如MCF-7）的增殖。软琼脂培养实验表明，该化合物可诱导细胞发生非锚定依赖性生长，提示其可能具有遗传毒性或增殖作用。此外，该化合物还能在无细胞体系和培养细胞中与DNA形成共价加合物，引发了人们对其在雌激素诱导的致癌过程中潜在作用的担忧。
体内研究 (In Vivo)	在体内，16α-羟基雌酮是雌酮和雌二醇的主要尿代谢产物。一些流行病学研究表明，16α-羟基雌酮与2-羟基雌酮的比值（16α/2-OH雌酮比值）升高与乳腺癌风险增加相关。该化合物已被提出作为雌激素代谢和乳腺癌风险的潜在生物标志物，但不同研究的结果并不一致。
酶活实验	16α-羟基雌酮可用于非细胞酶活性测定。在酶活性研究中，将该化合物溶解于DMSO或乙醇中配制成储备液。然后将其用作CYP450酶活性测定中的底物或标准品，以研究雌酮的16α-羟基化。在雌激素受体结合测定中，将该化合物稀释于测定缓冲液（例如，50 mM Tris-HCl，pH 7.4，含0.1% BSA）中，并使用[3H]雌二醇作为放射性配体，检测其与雌激素受体的竞争性结合。
细胞实验	在体外细胞实验中，雌激素依赖性MCF-7细胞培养于不含酚红的RPMI-1640培养基中，并加入经活性炭处理的胎牛血清（FBS）。细胞用浓度为0.1 nM至1 uM的16α-羟基雌酮处理24-72小时。细胞增殖通过MTT法或细胞计数进行检测。雌激素反应基因（例如pS2、孕激素受体）的表达通过qPCR进行检测。DNA加合物的形成可通过32P标记法进行评估。
动物实验	在体内动物实验中，通常通过皮下注射（例如，1-100 μg/kg/天）或使用渗透泵持续给药的方式，向卵巢切除的雌性大鼠施用16α-羟基雌酮。子宫重量增加被用作雌激素活性的指标。采集血液和尿液样本，用于液相色谱-质谱联用（LC-MS）分析雌激素代谢物。在致癌性研究中，可采集乳腺组织进行组织学分析。
药代性质 (ADME/PK)	16α-羟基雌酮在血浆中的半衰期很短（约30-60分钟），这是由于其快速结合（葡萄糖醛酸化、硫酸化）并进一步代谢为雌三醇所致。该化合物主要以结合物的形式经尿液排出。尿液中16α-羟基雌酮与2-羟基雌酮的代谢比率受CYP酶（CYP3A4、CYP1A1）基因多态性以及膳食因素（例如十字花科蔬菜中的吲哚-3-甲醇）的影响。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)	16α-羟基雌酮是一种内源性雌激素代谢产物，在生理浓度下不被认为具有急性毒性。然而，流行病学证据表明，较高的16α/2-羟基雌酮比值可能与乳腺癌风险增加相关。体外实验表明，该化合物可与DNA形成共价加合物，这引发了人们对其潜在遗传毒性的担忧。在研究中，应遵守处理雌激素类化合物的标准预防措施。
参考文献	[1]. Armamento-Villareal R. Estrogen metabolism modulates bone density in men. Calcif Tissue Int. 2007;80(4):227-232.
其他信息	16α-羟基雌酮是雌酮的16α-羟基衍生物，也是一种次要的雌激素代谢产物。它存在于小鼠、人血清、雌激素和人尿液中。16α-羟基雌酮是一种16α-羟基类固醇、一种仲α-羟基酮、一种3-羟基类固醇和一种17-氧代类固醇。其功能与雌酮相关。已有关于人体内存在16α-羟基雌酮的报道，并提供了相关数据。16α-羟基雌酮是雌酮在肝脏分解代谢过程中形成的代谢产物。它的生成是通过细胞色素P450 (CYP)家族酶（包括CYP3A4和3A5）对雌酮16位碳原子进行羟基化而实现的，并且具有潜在的致癌活性。与母体化合物相比，16α-羟基雌酮 (16α-OHE1) 具有更强的雌激素活性，可增加雌激素受体 (ER) 反应基因的表达，从而导致易感肿瘤细胞增殖增加。两种雌激素代谢物——弱雌激素 2-羟基雌酮 (2-OHE1)（2-羟基化途径的代谢物）和 16α-OHE1（16-羟基化途径的代谢物）——之间的比值可用于评估某些癌症的风险；较高的 2-OHE1:16α-OHE1 比值与较低的癌症风险相关。另见：16-羟基雌酮（注：已移至此处）。 16α-羟基雌酮并非药物，而是一种内源性雌激素代谢产物和研究化合物。它目前尚未获得任何治疗批准。在临床研究中，它被用作生物标志物，用于评估雌激素代谢模式和乳腺癌风险。该化合物还用于雌激素致癌作用、激素依赖性癌症以及内分泌干扰物筛查的研究。16α-羟基雌酮可作为液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）分析标准品，用于临床诊断和代谢组学研究。

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性

化学信息 & 存储运输条件

分子式	C18H22O3
分子量	286.37
精确质量	286.156
CAS号	566-76-7
PubChem CID	115116
外观&性状	White to off-white solid powder
密度	1.3±0.1 g/cm3
沸点	493.2±45.0 °C at 760 mmHg
熔点	209-211ºC
闪点	266.2±25.2 °C
蒸汽压	0.0±1.3 mmHg at 25°C
折射率	1.612
LogP	2.32
tPSA	57.53
氢键供体(HBD)数目	2
氢键受体(HBA)数目	3
可旋转键数目(RBC)	0
重原子数目	21
分子复杂度/Complexity	448
定义原子立体中心数目	5
SMILES	C[C@]12CC[C@H]3[C@H]([C@@H]1C[C@H](C2=O)O)CCC4=C3C=CC(=C4)O
InChi Key	WPOCIZJTELRQMF-QFXBJFAPSA-N
InChi Code	InChI=1S/C18H22O3/c1-18-7-6-13-12-5-3-11(19)8-10(12)2-4-14(13)15(18)9-16(20)17(18)21/h3,5,8,13-16,19-20H,2,4,6-7,9H2,1H3/t13-,14-,15+,16-,18+/m1/s1
化学名	(8R,9S,13S,14S,16R)-3,16-dihydroxy-13-methyl-7,8,9,11,12,14,15,16-octahydro-6H-cyclopenta[a]phenanthren-17-one
HS Tariff Code	2934.99.9001
存储方式	Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month
运输条件	Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

溶解度数据

溶解度 (体外实验)	DMSO: ≥ 250 mg/mL (873.00 mM)
溶解度 (体内实验)	注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。注射用配方 (IP/IV/IM/SC等) 注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline) 生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。注射用配方 2:* DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More 注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。注射用配方 5:* 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline) 注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline) 注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline) 注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil) 注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 口服配方口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More 口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 口服配方 6: 做成粉末与食物混合注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

溶解度 (体外实验)

DMSO: ≥ 250 mg/mL (873.00 mM)

溶解度 (体内实验)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)

注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

口服配方

口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

制备储备液		1 mg	5 mg	10 mg
	1 mM	3.4920 mL	17.4599 mL	34.9199 mL
	5 mM	0.6984 mL	3.4920 mL	6.9840 mL
	10 mM	0.3492 mL	1.7460 mL	3.4920 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器

质量

浓度

体积

分子量*

计算重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度

参见示例

使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？

在分子量（MW）框中输入350.26
在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。

浓度 (起始)

体积 (起始)

浓度 (终)

体积 (终)

计算重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：

在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中

分子式

分子量

g/mol

计算重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4 c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：

要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。

分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：

分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。

配液体积

质量

配液浓度

计算重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
单击“计算”按钮
答案显示在体积框中

动物体内实验配方计算器（澄清溶液）

第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）

给药剂量 mg/kg

动物平均体重 g

每只动物给药体积 μL

动物数量

第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。

% DMSO

% Tween 80

% ddH₂O

计算重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH₂O，混匀澄清。

注意： (1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。