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Alanine dehydrogenase

别名: 丙氨酸脱氢酶;L-丙氨酸脱氢酶;丙氨酸脱氢酶,重组
目录号: V72590 纯度: ≥98%
COA 产品数据 产品说明书 SDS
丙氨酸脱氢酶是一种催化L-丙氨酸可逆转化为丙酮酸的微生物酶。
Alanine dehydrogenase CAS号: 9029-06-5
产品类别: Endogenous Metabolite
产品仅用于科学研究，不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
5mg
10mg
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产品描述
丙氨酸脱氢酶是一种微生物酶，可催化 L-丙氨酸可逆转化为丙酮酸。
丙氨酸脱氢酶（CAS：9029-06-5）是一种A-立体选择性氧化还原酶，催化L-丙氨酸可逆脱氨生成丙酮酸和铵，同时将NAD+还原为NADH。该酶在细菌系统的氨基酸代谢、能量产生和氮平衡中发挥着关键作用。它广泛应用于生物化学研究、酶活性测定和L-丙氨酸浓度测定。
生物活性&实验参考方法
靶点
Alanine Dehydrogenase targets the oxidative deamination of L-alanine and the reductive amination of pyruvate. Its physiological substrates are L-alanine and NAD+ in the deamination direction, and pyruvate, ammonium, and NADH in the amination direction. The enzyme functions as a key node linking carbon and nitrogen metabolism in microorganisms, particularly in Bacillus species, where it contributes to sporulation and energy homeostasis.
体外研究 (In Vitro)
体外实验表明，丙氨酸脱氢酶在pH 10.0-10.5时脱氨反应活性最高，在pH 8.8-9.0时氨化反应活性最高。该酶对NAD+作为辅因子具有高度特异性，不接受NADP+。氨化反应中底物的表观Km值约为：NH4+ 4×10-2 M，丙酮酸 5×10-4 M，NADH 6×10-5 M。脱氨反应中底物的表观Km值约为：L-丙氨酸 3.1×10-3 M，NAD+ 2×10-4 M。
体内研究 (In Vivo)
在体内，丙氨酸脱氢酶参与芽孢形成过程中丙酮酸的生成，并通过三羧酸循环为芽孢杆菌属提供能量。该酶使微生物能够在各种生长条件下利用丙氨酸作为碳源和氮源。它还参与牛磺酸/亚牛磺酸代谢和二氧化碳固定途径。目前尚无该酶作为治疗药物的体内药理活性数据。
酶活实验
丙氨酸脱氢酶活性的典型体外酶活性测定方法是通过分光光度法监测NADH的生成（脱氨方向）或消耗（氨化方向）。脱氨反应：将3.00 mL反应体系（包含47 mM碳酸氢钠、17 mM L-丙氨酸、0.17 mM NAD+和酶）与0.1 M甘氨酸-KCl缓冲液（pH 10.0，25℃）混合。在340 nm处测量吸光度增加值（ε=6.22 mM-1 cm-1）。一个酶活性单位是指在pH 10.0和25℃下，每分钟将1.0 umol L-丙氨酸转化为丙酮酸和NH3。
细胞实验
作为一种酶产品，丙氨酸脱氢酶通常不用于常规的体外细胞检测。相反，它常被用作无细胞体系和生化应用的研究工具。对于涉及丙氨酸代谢的研究，可将表达该酶的细菌细胞培养在以L-丙氨酸为唯一碳源和氮源的最小培养基中，然后使用上述分光光度法测定细胞裂解液中的酶活性。
动物实验
由于丙氨酸脱氢酶是一种用作研究试剂的细菌酶，因此动物模型不适用于其体内研究。然而，已有研究利用芽孢杆菌属细菌探讨了该酶在孢子形成过程中的生理作用。对于毒理学或药代动力学研究，标准的动物实验方案包括向啮齿动物静脉或腹腔注射纯化的酶，并在不同时间点采集血液样本以评估酶的活性和稳定性。
药代性质 (ADME/PK)
作为一种纯化的细菌酶制剂，丙氨酸脱氢酶不适用于全身给药，因此缺乏经典的药代动力学参数。在研究应用中，该酶通常在体外使用，且在最佳条件之外稳定性极差。该酶在-20℃的50%甘油缓冲溶液（10 mM磷酸钾，pH 7.7）中可稳定保存长达2年。脱氨反应的最佳pH值为10.0-10.5，氨化反应的最佳pH值为8.8-9.0。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
丙氨酸脱氢酶被认为是一种低毒性的研究试剂。其危害主要与其配方有关：该产品通常以50%甘油溶液的形式提供，并含有10 mM磷酸钾缓冲液（pH 7.7）。安全分类为呼吸道致敏1级（Resp. Sens. 1）。建议使用标准实验室个人防护装备（护目镜、手套）和多用途组合式呼吸器滤芯。该酶可被二价金属离子（汞离子效果最佳）和对氯汞苯甲酸灭活，而L-或D-半胱氨酸可逆转这种灭活作用。
参考文献
[1]. Dave UC, et al. Alanine dehydrogenase and its applications - A review. Crit Rev Biotechnol. 2019 Aug;39(5):648-664.
其他信息
这种酶并非药物，而是一种用于科研的生化试剂。丙氨酸脱氢酶（EC 1.4.1.1）以纯化酶制剂的形式市售，主要来源于枯草芽孢杆菌或重组大肠杆菌表达系统。它尚未获得任何药物批准，也未进行过任何临床试验用于人体治疗。该酶属于氧化还原酶，仅用于体外研究，包括酶动力学研究、丙氨酸定量分析和代谢途径研究。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
CAS号
9029-06-5
外观&性状
White to off-white solid powder
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O: 100 mg/mL
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器
计算 重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？
  • 在分子量（MW）框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。
计算 重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：
  • 在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
  • 在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中
g/mol
计算 重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：
  • 分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
  • 摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。
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计算 重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。
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计算 重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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电话: 020-31522723 传真: 463611831 邮箱: sales@invivochem.cn
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