| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
PF-07208254 targets branched-chain ketoacid dehydrogenase kinase (BDK, BCKDK), an enzyme that phosphorylates and inactivates the branched-chain alpha-keto acid dehydrogenase complex (BCKDH). BCKDH is the rate-limiting enzyme in BCAA catabolism. BDK is a serine/threonine kinase that negatively regulates BCAA oxidation. By allosterically inhibiting BDK with high potency (IC₅0 = 110 nM in biochemical assays), PF-07208254 prevents the phosphorylation of BCKDH, maintaining it in its active (dephosphorylated) state, thereby promoting BCAA breakdown and utilization. This mechanism reduces circulating BCAAs and improves metabolic health.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，PF-07208254 是一种强效的 BDK 抑制剂，生化酶活性测定中 IC₅0 为 110 nM，Ki 为 54 nM。在人骨骼肌细胞中，PF-07208254 对 BDK 活性的抑制作用显著，IC₅0 为 540 nM，显示出细胞活性。在培养的原代人肌管细胞中，用 PF-07208254（0.1-10 uM）处理可增加支链氨基酸 (BCAA) 的氧化并减少 BCAA 的积累。该化合物的效力是基准 BDK 抑制剂 BT2（IC₅0 为 1,100 nM）的 10 倍。它对其他蛋白激酶没有明显的脱靶活性。此外，PF-07208254 还能改善脂质代谢，并在基于细胞的代谢测定中提高胰岛素敏感性。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内实验中，PF-07208254 已证实能显著改善小鼠模型的心血管代谢参数。在饮食诱导的肥胖小鼠中，口服 PF-07208254（10-50 mg/kg）可减少脂质蓄积，增强胰岛素敏感性，并改善心脏功能。该化合物可增加外周组织中支链氨基酸（BCAA）的氧化，降低血浆 BCAA 水平，并提高代谢灵活性（即在不同能量来源之间转换的能力）。在心力衰竭模型中，PF-07208254 可改善心脏功能，表现为超声心动图测量结果显示射血分数增加，左心室舒张末期容积减少。该化合物还能降低心肌肥厚和纤维化的标志物。PF-07208254 具有良好的口服生物利用度，并在啮齿动物中表现出良好的药代动力学特性。
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| 酶活实验 |
对于非细胞检测（BDK酶抑制），将重组人BDK（10 nM）与PF-07208254（0.1-1000 nM）在激酶测定缓冲液（50 mM HEPES pH 7.5、10 mM MgCl2、1 mM DTT、0.01% Triton X-100）中于25℃孵育30分钟。加入ATP（100 uM）和生物素标记的BCKDH肽底物（1 uM）启动反应。在30℃孵育60分钟后，用EDTA终止反应。使用时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）测定或用抗磷酸化BCKDH抗体进行Western blot分析来定量底物的磷酸化。计算出IC₅0 (110 nM) 和 Ki (54 nM)。或者，也可以使用 32P-ATP 进行放射性激酶活性测定。为了进行选择性筛选，将 PF-07208254 以 1 uM 的浓度针对 50 多种蛋白激酶进行测试，以评估其脱靶活性。
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| 细胞实验 |
对于基于细胞的检测，将人原代肌管或骨骼肌细胞（例如，由人成肌细胞分化而来）接种于6孔板中（1×10⁶个细胞/孔），培养基为含10% FBS的DMEM。肌管分化后，用PF-07208254（0.1-10 uM）处理细胞24-48小时。通过添加¹3C标记的亮氨酸（100 uM）并使用IRMS定量¹3CO2的生成来测定BCAA氧化。细胞内BCAA水平通过LC-MS/MS测定。使用抗BDK抗体和BCKDH肽作为底物，通过免疫沉淀激酶分析法测定细胞裂解液中的BDK活性；磷酸化通过抗磷酸化BCKDH的Western blot检测。胰岛素信号通路通过Western blot测定AKT和AMPK的磷酸化水平来评估。采用 MTT 法评估细胞活力。
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| 动物实验 |
体内动物实验采用饮食诱导肥胖（DIO）C57BL/6J小鼠或瘦素缺陷型ob/ob小鼠（8-12周龄）。PF-07208254配制于0.5%甲基纤维素或20% PEG300/80%水中，每日口服一次，剂量为10-50 mg/kg，持续4-8周。每日监测体重和食物摄入量。分别于第4周和第6周进行口服葡萄糖耐量试验（OGTT）和胰岛素耐量试验（ITT）。采集血样，用于测定血浆支链氨基酸（BCAA）水平（LC-MS/MS）、葡萄糖、胰岛素（ELISA）、甘油三酯和胆固醇。进行超声心动图检查以评估心脏功能（射血分数、短轴缩短率、左心室质量）。研究结束时，采集组织样本（骨骼肌、肝脏、心脏、脂肪组织），用于测量支链氨基酸（BCAA）氧化（使用13C标记的亮氨酸进行体外实验）、基因表达（通过qPCR检测BCAA分解代谢酶）和组织学（使用H&E染色检测脂质积累，使用Picrosirius红染色检测纤维化）。在心力衰竭模型（例如，横向主动脉缩窄，TAC）中，PF-07208254的给药剂量为10-30 mg/kg，持续4周。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
PF-07208254 的分子量为 236.67，分子式为 C7H2ClFO2S2。该化合物为固体粉末，熔点为 210-215℃。它可溶于 DMSO（≥10 mg/mL），微溶于乙醇，几乎不溶于水。推荐用于体内制剂的配制方法为：10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween 80 + 45% 生理盐水。该化合物粉末应在 -20℃ 下保存长达 3 年，溶液应在 -80℃ 下保存长达 6 个月，或在 -20℃ 下保存长达 1 个月。在推荐的储存条件下，该化合物稳定，并应避光保存。该化合物是一种变构 BDK 抑制剂，其效力是现有工具化合物 BT2 的 10 倍。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
PF-07208254 是一种仅供研究使用的工具化合物。尚未发表正式的毒性研究。在为期 8 周的临床前动物研究中，剂量高达 50 mg/kg/天，该化合物耐受性良好，未报告明显的毒性。较高剂量下常见的不良反应可能包括胃肠道不适或轻度体重减轻。尚未报告遗传毒性、致癌性或生殖毒性研究。应遵循处理有机化学品的标准实验室安全预防措施。该化合物未获准用于人体。建议在通风橱内使用适当的个人防护装备（手套、实验服、护目镜）处理 PF-07208254。避免吸入、摄入和皮肤接触。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
PF-07208254 是一种研究化合物，并非已获批准的药物。它尚未进行过人体治疗的临床试验。目前，它正处于治疗心血管代谢疾病（包括心力衰竭和 2 型糖尿病）的临床前开发阶段。该化合物是一种变构 BDK 抑制剂，其效力比现有工具化合物 BT2 高 10 倍。它能增强支链氨基酸 (BCAA) 的氧化，并改善小鼠模型的心脏功能和代谢灵活性。PF-07208254 用作研究 BCAA 分解代谢途径在代谢和心血管疾病中作用的工具化合物。它不适用于人体治疗。仅供研究使用。有关详细的体内和体外数据，请参阅文献：Roth Flach RJ 等。
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| 分子式 |
C7H2CLFO2S2
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|---|---|
| 分子量 |
236.670981884003
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| 精确质量 |
235.916
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| CAS号 |
2573122-40-2
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| PubChem CID |
155435321
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
3.6
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| tPSA |
93.8
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
1
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| 重原子数目 |
13
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| 分子复杂度/Complexity |
241
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C1=C(SC2=C1SC(=C2Cl)C(=O)O)F
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| InChi Key |
UXMBSHHPPVOPJU-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C7H2ClFO2S2/c8-4-5-2(1-3(9)13-5)12-6(4)7(10)11/h1H,(H,10,11)
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| 化学名 |
6-chloro-2-fluorothieno[3,2-b]thiophene-5-carboxylic acid
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 4.2253 mL | 21.1265 mL | 42.2529 mL | |
| 5 mM | 0.8451 mL | 4.2253 mL | 8.4506 mL | |
| 10 mM | 0.4225 mL | 2.1126 mL | 4.2253 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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