| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Mitochondrial electron transport chain (ETC); soluble biguanide
Mitochondrial Electron Transport Chain (ETC) / OXPHOS. IM176OUT05 is an inhibitor of mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS). It reduces the activity of the ETC with an IC50 of 3.2 uM, leading to a decrease in ATP production via mitochondrial respiration. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
IM176OUT05（0.1-10 μM；24 小时）的 IC50 为 3.2 μM，可通过降低耗氧率 (OCR) 来抑制线粒体电子传递链 (ETC) 的活性[1]。在小鼠和人诱导多能干细胞 (iPSC) 中，IM176OUT05（10 μM；6 天）可增强干细胞多能性的获得和维持[1]。IM176OUT05（10 和 100 nM）可刺激与糖酵解和 ETC 复合物酶相关的基因表达，从而促进向糖酵解代谢的转变[1]。
体外实验表明，IM176OUT05 能以 3.2 uM 的 IC50 值抑制线粒体电子传递链 (ETC) 的活性。这种抑制作用会诱导代谢向糖酵解转变，从而改变细胞能量代谢。这种特定的代谢状态能够激活干细胞的代谢程序，有利于维持干细胞的多能性和干性。体外实验表明，IM176OUT05 可通过激活毛囊中的干细胞来促进毛发再生。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
IM176OUT05（200 μL，1%；每日一次涂抹于脱毛区域）可刺激小鼠毛囊周期并增加毛囊数量，从而促进毛发再生[1]。
\n\nIM176OUT05 (IM)促进小鼠毛发再生[1] \n初步研究发现，IM 能够促进小鼠毛发再生，且无毒性或其他副作用（补充图 S6）。我们通过去除 7 周龄 C57BL/6 小鼠的休止期毛发来同步其毛发周期1，并将不同浓度的 IM 每日局部涂抹于小鼠背部皮肤（补充图 S6）。第 9 天，在 1% IM 处理区域观察到显著变化，黑色素沉着和毛发生长明显。在对照组以及分别用0%、0.1%或0.5% IM处理的区域，虽然在第11天出现了色素沉着，但并未观察到毛发再生。接下来，我们比较了IM和米诺地尔（一种已获批准的脱发治疗药物）在雄性和雌性小鼠中促进毛发再生的能力。IM治疗对毛发再生具有显著的促进作用，尤其是在雌性小鼠中（图3）。到第8天，与对照组或米诺地尔组相比，IM治疗组小鼠的皮肤颜色明显加深。到第10天，IM治疗显著促进了毛发再生（图3），并且在另一组独立的雌性小鼠中也观察到了类似的结果（补充图S7）。在雄性小鼠中也观察到了类似的现象，但IM在雄性小鼠中的作用与米诺地尔相当（补充图S8）。脱毛后，少数小鼠出现皮疹和疤痕（补充图S8b，D0）；然而，在体内实验中，所有动物均未观察到IM治疗引起的皮肤问题等不良反应。\n \n\nIM176OUT05 (IM)促进小鼠毛囊再生周期[1] \n根据Chase1,30的分类方法，对组织进行组织形态计量学分析，结果表明IM刺激了毛囊周期的进程（图4a）。第20天，对照组小鼠的大多数毛囊处于生长期III期，而IM治疗组小鼠的大多数毛囊处于生长期后期，纵切面主要为生长期V期和VI期（图4b）。此外，在第7天横切面中，IM处理组小鼠的毛囊数量明显高于对照组小鼠（图4c），且在第20天，IM处理组或米诺地尔处理组小鼠的毛囊数量均高于对照组小鼠（图4d）。此外，在第7天，与对照组或米诺地尔处理组小鼠相比，IM处理组小鼠毛囊隆突区的角蛋白15（K15，一种毛囊干细胞标志物）表达显著增强（图5a）。在第7天，IM处理组小鼠皮肤中介导毛囊再生的β-catenin表达也增加32。此时，IM处理组小鼠皮肤中已出现Ki67阳性增殖细胞，表明IM促进了毛囊周期和增殖祖细胞的进一步扩增（图5a）。通过FACS分析定量K15+/β-catenin+细胞群，结果显示，在对照组、IM处理组和米诺地尔处理组小鼠的皮肤中，这些细胞群分别占单细胞的3.2%、11.7%和6.0%（图5b）。与对照组相比，IM处理组小鼠的K15+/β-catenin+细胞群数量增加了3.7倍（图5b）。到第20天，所有组别的小鼠中均强烈检测到K15和β-catenin（图5c），且所有组别中K15+/β-catenin+细胞的比例均超过24%（图5d）。Shh是毛囊发育的另一个重要因子33，在IM处理组和米诺地尔处理组的小鼠中均清晰可见（图5c）。第7天，所有组别小鼠中Ki67+/Shh+细胞的比例均低于5%（图5b），但到第20天，对照组、IM处理组和米诺地尔处理组小鼠皮肤单细胞中该比例分别显著增加13.8%、36.7%和34%（图5d）。在第 20 天，IM 治疗的小鼠中 Ki67+/Shh+ 细胞群比对照小鼠增加了 2.7 倍（图 5d）。 在体内，IM176OUT05 已在临床前模型中用于促进毛发再生和增强干细胞特性。该化合物的高溶解度使其能够有效地配制成注射剂或外用制剂。它通过抑制氧化磷酸化（OXPHOS），降低分化细胞对线粒体呼吸的代谢依赖性，并促进与干细胞相关的糖酵解状态，从而增强组织再生过程。 |
| 酶活实验 |
IM176OUT05 (IM) 渗透实验[1]
将SK-OV-3、MDA-MB-435、786-O、MDA-MB-231和MCF-7细胞以每孔50万个细胞的密度接种于12孔板中。用10 μM的双胍类药物处理细胞30分钟。用冰冷的PBS洗涤各孔细胞，并使用液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)测定双胍类药物的含量，数据使用MassHunter B 01.03软件进行分析。对于AMP活化蛋白激酶(AMPK)活化实验，将MCF-7细胞以每孔50万个细胞的密度接种于六孔板中。用浓度范围为3 μM至10 mM的双胍类药物处理细胞，并孵育12小时。将细胞用 1% Triton X-100 细胞裂解缓冲液处理，并在 12,000 rpm 下离心 20 分钟后收集上清液。将蛋白质样品（每份 25 μg）加入 p-AMPK ELISA 板中，并在 450 nm 处测量样品的吸光度。 对于无细胞检测，通常使用分离的线粒体来评估IM176OUT05对电子传递链的影响。线粒体从组织（例如肝脏或脑组织）中分离出来，并在反应缓冲液中孵育。加入不同浓度（0.1-100 uM）的IM176OUT05。通过添加相应的底物（例如NADH或琥珀酸）并使用克拉克电极监测耗氧量，或在550 nm处分光光度法测量细胞色素c的还原，来测定复合物I和/或复合物II的活性。 |
| 细胞实验 |
耗氧率 (OCR)/细胞外酸化率 (ECAR) 测定[1]
将 A549 细胞用系列稀释的 IM176OUT05 (IM) 处理 24 小时，每个处理设置三个复孔，并在进行 OCR 测定前洗涤细胞。在重编程实验中，将 OSKM 转导的 MEF 细胞以每孔 3 × 10³ 个细胞的密度接种于聚赖氨酸包被的 96 孔 XF 板中，每个处理设置三个复孔，接种时间为重编程后 4 天。第二天（第 5 天），将培养基更换为含或不含待测化学物质的 mESC 培养基。第 7 天，使用 Seahorse XFe96 通量分析仪，按照制造商的说明测定 OCR/ECAR。探针盒在无 CO2 条件下校准 1 小时，然后进行基础 OCR/ECAR 测定。在每个指定时间点，依次加入以下靶向电子传递链的化合物：1.5 μM 寡霉素（ATP 合酶复合物 V 抑制剂）、5 μM FCCP（解偶联剂）和 0.5 μM 鱼藤酮（复合物 I 抑制剂）+ 抗霉素 A（复合物 III 抑制剂）。该值已根据细胞数量进行标准化。 在细胞实验中，将干细胞或成纤维细胞接种于培养皿中，并用 IM176OUT05（1-20 uM）处理 24-48 小时。使用 Seahorse XF 分析仪测量耗氧率 (OCR) 以确认线粒体呼吸的抑制。测量细胞外酸化率 (ECAR) 以确认代谢途径向糖酵解的转变。通过 qPCR 和 Western blot 检测多能性标记物（例如 OCT4、SOX2、NANOG）以评估干性诱导情况。毛囊器官培养物也可用于处理，并通过免疫荧光观察干细胞活化情况。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 7周龄C57BL/6小鼠[1]
剂量： 200 μL，1% 给药途径： 涂抹于脱毛部位；200 μL，1%，每日一次 实验结果： 显著促进毛发再生，尤其是在雌性小鼠中。 毛发再生模型[1] 使用动物剃毛器和蜡去除7周龄C57BL/6小鼠背部处于休止期的毛发。第二天，用无菌棉签将200 μL安慰剂对照、1%的IM176OUT05 (IM)、1%的米诺地尔或1%的二甲双胍涂抹于脱毛部位。每天拍摄每只动物的图像，并使用 ImageJ 软件量化同一区域（1.6 × 3 cm）背部颜色深浅的强度，从而评估色素沉着水平。分别于第 0、7、14 和 20 天处死小鼠，并获取皮肤组织。一半组织用于 RNA 提取，另一半组织用 4% 多聚甲醛固定过夜，用于组织化学染色。[1] 耳孔穿孔实验 在耳廓组织修复实验中，使用耳孔穿孔器在每只耳朵上穿孔三个直径为 2 mm 的孔。每天用无菌棉签涂抹指定浓度的 IM176OUT05 (IM)。使用数字卡尺测量孔的面积。 在体内毛发再生研究中，将IM176OUT05配制成合适的载体（例如PBS或外用凝胶），并通过皮下注射或局部涂抹的方式给药于处于毛发周期休止期（退行期）的小鼠剃毛背部。通过拍摄照片和测量毛发覆盖率来监测和量化毛发再生情况。在干性维持研究中，可在小鼠体内重编程过程中给予该化合物，以生成诱导多能干细胞（iPSCs），并测量重编程效率。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
IM176OUT05 是一种高溶解度的双胍类药物，分子量为 255.75 g/mol，分子式为 C11H18ClN5。它可溶于 DMSO 和水性缓冲液。与其他双胍类药物（如二甲双胍）相比，其高溶解度是一项显著优势，允许在制剂中配制更高的浓度。所提供的摘录中未包含详细的药代动力学参数（t1/2、Cmax）。该化合物以固体形式储存于 -20℃。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
搜索结果中并未完整公布IM176OUT05的详细毒理学数据。作为一种线粒体抑制剂，在高全身浓度下存在乳酸性酸中毒的潜在风险，这是双胍类药物已知的一类效应。然而，IM176OUT05正在被研究用于局部或特定用途。应遵循研究用化学品的标准安全操作规程。本品不可食用。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
针对毛囊再生的脱发治疗策略已得到广泛研究，干细胞及其微环境的基础研究也已开展。然而，我们对干细胞代谢和生物能量学在毛发再生中的具体调控机制的理解仍然不足。本文报道了一种新合成的小分子化合物IM176OUT05（IM），它通过激活干细胞代谢来促进毛发再生。IM在诱导多能干细胞生成过程中促进干性诱导和维持。IM处理轻微抑制线粒体氧化磷酸化，同时增强糖酵解，从而加速重编程早期阶段的干性诱导。更重要的是，局部应用IM促进毛囊周期进入生长期，从而加速毛囊再生并增加小鼠的毛囊数量。此外，在IM处理的小鼠中，具有糖酵解代谢表型的干细胞群出现得略早。IM处理还能激活毛囊再生早期阶段参与毛发再生过程的干细胞和微环境信号通路。总之，这些结果表明，新型小分子IM通过重塑干细胞的代谢结构来促进组织再生，特别是毛发再生。[1]
IM176OUT05是由IMI（国际医疗创新公司）开发的一种新型双胍类药物。其主要创新之处在于与前代药物苯乙双胍（因乳酸性酸中毒风险而撤市）相比，具有更高的溶解度。IM176OUT05通过调节氧化磷酸化（OXPHOS）发挥作用，是一种用于研究细胞代谢、干细胞命运和再生之间联系的宝贵化学探针。该药物尚未获得美国食品药品监督管理局（FDA）批准。 |
| 分子式 |
C11H18CLN5
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|---|---|
| 分子量 |
255.75
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| 精确质量 |
255.125
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| 元素分析 |
C, 51.66; H, 7.09; Cl, 13.86; N, 27.38
|
| CAS号 |
1643659-96-4
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| 相关CAS号 |
1544871-16-0; 1643659-96-4 (HCl)
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| PubChem CID |
137796975
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| tPSA |
103
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
1
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
17
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| 分子复杂度/Complexity |
268
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C1C=CC(CCNC(NC(N)=N)=N)=C(C)C=1.Cl
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| InChi Key |
HUMHPPQJBIWIPM-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C11H17N5.ClH/c1-8-4-2-3-5-9(8)6-7-15-11(14)16-10(12)13;/h2-5H,6-7H2,1H3,(H6,12,13,14,15,16);1H
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| 化学名 |
1-(diaminomethylidene)-2-[2-(2-methylphenyl)ethyl]guanidine;hydrochloride
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| 别名 |
IM176OUT05; 1643659-96-4; IM-176OUT05
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 125 mg/mL (488.76 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.9101 mL | 19.5503 mL | 39.1007 mL | |
| 5 mM | 0.7820 mL | 3.9101 mL | 7.8201 mL | |
| 10 mM | 0.3910 mL | 1.9550 mL | 3.9101 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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