Carbonic anhydrase (carbonic anhydrase; EC 4.2.1.1)

别名: 碳酸酐酶;碳酸酐酶(牛红血球);碳酸酐酶 来源于牛红细胞;碳酸脱水酶(牛红血球);CARBONIC ANHYDRASE ISOZYME II 来源于牛红细胞;CARBONIC ANHYDRASE I 来源于人类红细胞;CARBONIC ANHYDRASE ISOZYMEII 人;碳酸酐酶>3000U/MG;CARBONIC ANHYDRASE 来源于牛红细胞;
目录号: V73747 纯度: ≥98%
碳酸酐酶是原核生物和真核生物中普遍存在的含锌金属酶。
Carbonic anhydrase (carbonic anhydrase; EC 4.2.1.1) CAS号: 9001-03-0
产品类别: Carbonic Anhydrase
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
碳酸酐酶是原核生物和真核生物中普遍存在的含锌金属酶。碳酸酐酶催化二氧化碳可逆转化为碳酸氢根离子和质子。碳酸酐酶可用于癌症、青光眼、肥胖症和癫痫的研究。酶单位定义:酶单位采用威尔伯-安德森电位法测定,该方法测定饱和二氧化碳溶液在0℃下将0.02 M Tris-HCl缓冲液的pH值从8.3降至6.3所需的时间(以秒为单位)。无酶反应的时间记录为T0;酶活性单位为 2(T0-T) ÷ T。
碳酸酐酶(碳酸酐酶;EC 4.2.1.1)(CAS#: 9001-03-0)是一种含锌金属酶,可催化二氧化碳可逆转化为碳酸氢根离子和质子。该酶在多种生理过程中发挥着关键作用,包括 pH 值调节、二氧化碳运输和离子交换。碳酸酐酶存在于许多组织和生物体中,具有多种同工酶,它们的组织分布和功能各不相同。该酶被用于癌症、青光眼、肥胖症和癫痫的研究。它通常来源于牛红细胞,为白色至类白色固体,活性最高可达 4360 U/mg 固体。
生物活性&实验参考方法
靶点
The primary targets of carbonic anhydrase are its substrates, carbon dioxide (CO2) and water (H2O), which it converts to bicarbonate (HCO3-) and protons (H+). The enzyme also exhibits esterase activity, which can be measured using substrates such as p- and o-nitrophenylacetate. Carbonic anhydrase is inhibited by a variety of compounds, including sulfonamides, which bind to the zinc ion in the active site. The enzyme's activity is essential for maintaining acid-base balance in tissues and for facilitating CO2 transport in the blood.
体外研究 (In Vitro)
它可用于羧基转移和还原反应、血液中二氧化碳的测定以及从酸度测试试剂中去除二氧化碳。溶液配制方法:将冻干粉末溶解于冰水中(0.1 mg/mL),并置于冰浴中保存。使用前,用冰水稀释至 0.01 mg/mL。体外碳酸酐酶活性通常采用 Wilbur 和 Anderson 的电位法测定,该方法测定饱和 CO₂ 溶液在 0°C 下将缓冲液的 pH 值从 8.3 降至 6.3 所需的时间。一个酶活性单位由该方法定义。该酶还具有酯酶活性,可使用对硝基苯乙酸酯等显色底物进行测定。碳酸酐酶制剂的比活性可能有所不同,某些产品的活性可高达 4360 U/mg 固体。
体内研究 (In Vivo)
在体内,碳酸酐酶在维持酸碱平衡、促进二氧化碳运输以及调节各种组织中的离子交换方面发挥着关键作用。它参与肾脏酸化、胃酸分泌和骨吸收。碳酸酐酶抑制剂在临床上用于治疗青光眼、癫痫和其他疾病。该酶的活性也与癌症、肥胖症和其他疾病有关。
酶活实验
体外碳酸酐酶活性测定通常采用Wilbur和Anderson的电位法。该方法是将酶加入到冷的(0-4℃)缓冲溶液中,并测量饱和CO₂溶液将pH值从8.3降至6.3所需的时间。酶活性根据pH值的变化速率计算。另一种方法是使用显色底物(例如对硝基苯乙酸酯)测定酯酶活性,通过分光光度法在400 nm处监测对硝基苯酚的释放。
细胞实验
碳酸酐酶的细胞活性测定通常包括测量细胞裂解液或组织匀浆中的酶活性。细胞在合适的缓冲液中裂解,裂解液与二氧化碳饱和缓冲液或显色底物孵育。通过测量碳酸氢盐的生成或底物的水解来量化酶活性。也可以使用检测pH值或二氧化碳浓度变化的荧光探针来评估活细胞中的碳酸酐酶活性。
动物实验
碳酸酐酶的体内动物研究通常采用啮齿动物模型,以研究该酶在生理和疾病中的作用。例如,在青光眼动物模型中测试碳酸酐酶抑制剂,以评估其降低眼内压的疗效。该酶在肾功能中的作用可以通过基因敲除小鼠或使用特异性抑制剂进行研究。采集组织样本以测量酶活性并评估药物干预的效果。
药代性质 (ADME/PK)
作为一种酶,碳酸酐酶不具备传统的药代动力学特性,例如吸收、分布、代谢和排泄(ADME)。然而,该酶的稳定性和活性会受到温度、pH值以及抑制剂或辅因子的影响。该酶通常储存在4°C的缓冲溶液中。出于研究目的,该酶以冻干粉末或缓冲溶液的形式提供。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
碳酸酐酶通常被认为作为研究试剂无毒。该酶本身是一种天然存在的蛋白质,在实验室环境中不会造成显著的毒性问题。处理该酶制剂时应遵循标准的实验室安全操作规程,包括使用个人防护装备。该酶通常作为常规实验室试剂进行操作。
参考文献

[1]. In Situ Photoregulation of Carbonic Anhydrase Activity Using Azobenzenesulfonamides. Biochemistry. 2019 Jan 8;58(1):48-53.

[2]. Pharmacophores Modeling in Terms of Prediction of Theoretical Physicochemical Properties and Verification by EXPERIMENTAL correlations of Carbacylamidophosphates (CAPh) and Sulfanylamidophosphates (SAPh) Tested as New Carbonic Anhydrase Inhibitors. Mini Rev Med Chem. 2019;19(12):1015-1027.

其他信息
碳酸酐酶(EC 4.2.1.1)是一种含锌的金属酶,催化二氧化碳与碳酸氢根和质子的可逆转化。它在包括pH调节、CO2运输和离子交换等广泛生理过程中发挥关键作用。该酶用于癌症、青光眼、肥胖和癫痫的研究。通常从牛红细胞中提取,呈白色至类白色固体。该酶已用于热力学稳定性分析,并用于生成T细胞系以研究自身免疫性胰腺炎。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子量
0
CAS号
9001-03-0
外观&性状
White to off-white solid powder
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O: 1.96 mg/mL
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们