| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
β-Glucosidase[1]
beta-Glucosidase (irreversible covalent inhibitor) |
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| 体外研究 (In Vitro) |
环菲利醇氮丙啶是一种强效的β-葡萄糖苷酶抑制剂。它是一种基于机制的失活剂，其氮丙啶环开环后与保留β-葡萄糖苷酶的催化亲核试剂形成稳定的共价键。这种不可逆抑制作用使得在复杂的生物样品中对β-葡萄糖苷酶进行基于活性的分析成为可能。该化合物是环菲利醇的类似物，其中环菲利醇的环氧化物被氮丙啶取代，从而增强了其与活性位点亲核试剂的反应活性。
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| 体内研究 (In Vivo) |
目前尚无环菲利醇氮丙啶作为治疗药物的具体体内数据报道。作为一种活性探针，它具有在溶酶体贮积症动物模型中对β-葡萄糖苷酶活性进行体内成像的潜力。与β-葡萄糖苷酶的共价结合使其能够标记并检测组织中的活性酶。体内研究将包括静脉或腹腔注射探针，随后收集组织并进行荧光成像或Western blot分析以检测标记的酶。
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| 酶活实验 |
将重组人β-葡萄糖苷酶（例如GBA1、GBA2）或组织匀浆中的溶酶体β-葡萄糖苷酶与环己醇氮丙啶（0.1-1000 nM）在柠檬酸-磷酸盐缓冲液（pH 5.5-7.0）中于37℃孵育10-60分钟。不可逆抑制作用呈时间和浓度依赖性。使用荧光底物（例如4-甲基伞形酮-β-D-吡喃葡萄糖苷（4-MU-Glc））测定剩余酶活性。加入甘氨酸-NaOH缓冲液（pH 10.5）终止反应，并在激发波长365 nm、发射波长445 nm处测定荧光强度。根据反应进程曲线确定失活速率常数（kinact）和Ki值。如果探针被荧光标记，则可以通过 SDS-PAGE 和荧光扫描来确认共价结合。
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| 细胞实验 |
对于基于活性的蛋白质组学分析 (ABPP)，将细胞（例如，人成纤维细胞、HeLa 细胞或戈谢病患者细胞）培养于含 10% FBS 的 DMEM 培养基中。用浓度为 0.1-10 uM 的环己醇氮丙啶偶联荧光染料（例如 Cy5 或 BODIPY）处理细胞 1-4 小时。洗涤细胞，裂解细胞，并通过 SDS-PAGE 分离蛋白质。标记的 β-葡萄糖苷酶通过凝胶内荧光扫描进行可视化。或者，在进行 SDS-PAGE 之前，将细胞裂解液与探针预孵育。对于竞争性实验，先用浓度为 0.1-100 uM 的未标记环己醇氮丙啶预处理细胞 1 小时，然后进行探针标记。荧光强度的降低表明与 β-葡萄糖苷酶的特异性结合。细胞活力通过 MTT 或台盼蓝排除法进行评估。
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| 动物实验 |
目前尚无已发表的环菲利醇氮丙啶的体内动物研究。对于基于活性的探针研究，将该化合物（用荧光染料或生物素标记）配制于生理盐水或PBS缓冲液中，并以0.1-10 mg/kg的剂量通过尾静脉注射或腹腔注射给药于小鼠。循环1-24小时后，处死小鼠，并收集组织（脑、肝、脾、肾、肺）。将组织匀浆后，通过凝胶内荧光扫描或使用链霉亲和素-HRP（如果已生物素化）的Western blot检测标记蛋白。对于竞争性研究，可在给予标记探针之前给予未标记的环菲利醇氮丙啶以评估特异性。也可进行全器官或组织切片的荧光成像。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
环菲利醇氮丙啶的具体药代动力学数据尚不明确。由于其分子量小、亲水性强（分子量 175.18，LogP -2.3），预计其口服生物利用度低，且由于肾脏排泄迅速，血浆半衰期短。由于其分子较小，可能分布于包括脑在内的组织中。氮丙啶环具有反应活性，可能受到生物硫醇（如谷胱甘肽、半胱氨酸）的亲核攻击，从而导致快速代谢和清除。体内研究中，静脉或腹腔注射优于口服给药。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
环菲利醇氮丙啶目前尚无具体的毒性数据。氮丙啶环具有亲电性，可能与细胞亲核试剂（蛋白质、DNA）发生非特异性反应，从而导致细胞毒性或基因毒性。然而，作为一种基于机制的抑制剂，其设计目的是共价修饰β-葡萄糖苷酶的活性位点，因此其毒性特征可能已在体外和体内得到表征。在基于细胞的研究中，在探针浓度（0.1-10 μM）下未见细胞毒性报道。由于其具有活性亲电基团，因此在研究使用时，应采取标准防护措施（戴手套、穿实验服、在通风橱内操作）。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
环菲利醇氮丙啶（CAS：136861-97-7）是环菲利醇类似物，也是一种强效的不可逆β-葡萄糖苷酶抑制剂。它可作为活性探针（ABP）用于检测β-葡萄糖苷酶，包括溶酶体葡糖脑苷脂酶（GBA1）、非溶酶体葡糖脑苷脂酶（GBA2）以及其他1类和3类糖苷酶。该化合物是研究糖苷酶生物学、酶机制以及开发戈谢病诊断方法的重要研究工具。分子式：C7H13NO4，分子量：175.18。外观：浅棕色至棕色固体。溶解性：溶于DMSO和水。仅供研究使用。参考文献：Li KY等。探索功能性环菲利醇类似物作为人源保留型β-葡萄糖苷酶抑制剂。Org Biomol Chem. 2014;12(39):7786-91。尚未获准用于临床。
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| 分子式 |
C7H13NO4
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|---|---|
| 分子量 |
175.182422399521
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| 精确质量 |
175.084
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| CAS号 |
136861-97-7
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| PubChem CID |
89599365
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| 外观&性状 |
Light brown to brown solid-liquid Mixture
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| LogP |
-2.3
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| tPSA |
103
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| 氢键供体(HBD)数目 |
5
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
1
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| 重原子数目 |
12
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| 分子复杂度/Complexity |
188
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| 定义原子立体中心数目 |
6
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| SMILES |
O[C@@H]1[C@H]([C@@H]([C@@H](CO)[C@@H]2[C@H]1N2)O)O
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| InChi Key |
GPIFFOGPRPKRHS-DRYVTRLFSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C7H13NO4/c9-1-2-3-4(8-3)6(11)7(12)5(2)10/h2-12H,1H2/t2-,3+,4+,5+,6-,7-/m0/s1
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| 化学名 |
(1R,2S,3S,4R,5R,6R)-5-(hydroxymethyl)-7-azabicyclo[4.1.0]heptane-2,3,4-triol
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 5.7084 mL | 28.5421 mL | 57.0841 mL | |
| 5 mM | 1.1417 mL | 5.7084 mL | 11.4168 mL | |
| 10 mM | 0.5708 mL | 2.8542 mL | 5.7084 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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