MPO-IN-3

目录号: V73825 纯度: ≥98%
MPO-IN-3 是一种有效的髓过氧化物酶抑制剂(WO2013068875A1,实施例 191)。
MPO-IN-3 CAS号: 1435469-45-6
产品类别: Glutathione Peroxidase
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
10mg
50mg
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产品描述
MPO-IN-3 是一种强效的髓过氧化物酶抑制剂(WO2013068875A1,实施例 191)。髓过氧化物酶 (MPO) 是一种含血红素的酶,属于过氧化物酶超家族。
MPO-IN-3 是一种强效的髓过氧化物酶 (MPO) 抑制剂。MPO 是一种含血红素的酶,在氧化应激和炎症中发挥关键作用。MPO-IN-3 在专利 WO2013068875A1 中作为实施例 191 公开。它被用作研究工具,用于研究 MPO 在包括心血管疾病和炎症性疾病在内的各种疾病中的作用。
生物活性&实验参考方法
靶点
Myeloperoxidase (MPO)
体外研究 (In Vitro)
MPO-IN-3 是一种强效的髓过氧化物酶抑制剂,如专利 WO2013068875A1(实施例 191)所述。髓过氧化物酶是一种含血红素的酶,属于过氧化物酶超家族,可催化过氧化氢 (H2O2) 和氯离子生成次氯酸 (HOCl)。MPO 抑制是降低炎症性疾病中氧化应激和组织损伤的一种治疗策略。目前尚无公开的 MPO-IN-3 的 IC50 值,但据报道它是一种“强效”抑制剂。该化合物是一种 2-硫代嘧啶衍生物。
体内研究 (In Vivo)
目前尚无MPO-IN-3的具体体内数据;然而,作为一种强效的MPO抑制剂,它在心血管疾病、急性炎症和慢性炎症的动物模型中具有潜在的体内疗效。专利WO2013068875A1描述了MPO-IN-3的合成方法,该合成方法属于一系列拟用于治疗的MPO抑制剂,这表明该专利中可能包含体内数据,但并未公开详细说明。体内研究将包括给啮齿动物给药、测量血浆或组织中的MPO活性以及评估炎症和氧化应激终点指标。
酶活实验
本研究使用重组人髓过氧化物酶 (MPO) 或从人中性粒细胞中分离的 MPO。酶活性测定采用显色或荧光底物来测量 MPO 的过氧化物酶活性。典型的测定方法使用 Amplex Red(10-乙酰基-3,7-二羟基吩恶嗪)作为底物,并加入过氧化氢 (H2O2)。反应在室温或 37℃ 下于磷酸盐缓冲液 (PBS,pH 7.4) 中孵育 10-30 分钟。产物(试卤灵)的活性通过荧光(激发波长 530-560 nm,发射波长 585-590 nm)或吸光度(570 nm)进行测定。此外,也可使用 TMB(四甲基联苯胺)或 ABTS(2,2'-联氮基-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸))法进行测定。在加入底物之前,MPO-IN-3 与酶预孵育 5-10 分钟。IC50 值由剂量反应曲线确定。测试浓度范围通常为 0.1 nM 至 100 uM。专利实施例 191 可能描述了 MPO-IN-3 作为 MPO 抑制剂的合成和初步表征。详细方案请参见专利 WO2013068875A1。
细胞实验
对于细胞髓过氧化物酶 (MPO) 抑制研究,可使用从全血中分离的人中性粒细胞或分化为中性粒细胞样细胞的 HL-60 细胞。将细胞培养于含 10% 胎牛血清 (FBS) 的 RPMI-1640 培养基中,并用 1.25% 二甲基亚砜 (DMSO) 诱导分化 5-7 天。用 MPO-IN-3 (0.1-1000 nM) 处理细胞 1-4 小时,然后用佛波醇酯 (PMA,100 nM) 或调理素化的酵母聚糖刺激,以激活 MPO 的释放和活性。使用上述 Amplex Red/H2O2 法测定上清液中的 MPO 活性。通过台盼蓝排除法或 MTT 法评估细胞活力。髓过氧化物酶蛋白水平可通过 ELISA 法定量。细胞内活性氧 (ROS) 的产生可使用 DCFH-DA 荧光探针进行测定。还可以评估MPO抑制对中性粒细胞胞外陷阱(NET)形成的影响。目前尚无MPO-IN-3的特定细胞学数据公开;这些是MPO抑制剂的通用方案。
动物实验
目前尚无已发表的MPO-IN-3体内动物研究。基于MPO抑制剂的典型研究方案,可在啮齿动物炎症模型中开展体内疗效研究。例如,在酵母聚糖诱导的中性粒细胞性腹膜炎模型中:小鼠经口或腹腔注射MPO-IN-3(0.1-10 mg/kg)。1-2小时后,腹腔注射酵母聚糖(0.5-1 mg)以诱导中性粒细胞募集。4-6小时后,收集腹腔灌洗液。使用Amplex Red/H2O2法测定灌洗液中的MPO活性。在心血管模型(例如,心肌缺血再灌注损伤)中:小鼠接受左前降支冠状动脉的暂时结扎,随后进行再灌注。MPO-IN-3可在缺血前或再灌注时给药。梗死面积通过TTC染色进行测量,心肌组织中的MPO活性也需测定。炎症标志物(IL-6、TNF-α、MPO)和氧化应激标志物(8-异前列烷、蛋白质羰基化)在血浆和组织中进行检测。这些方案为通用方案;目前尚无针对MPO-IN-3的特定研究公开发表。
药代性质 (ADME/PK)
MPO-IN-3 的具体药代动力学数据尚不明确。根据其分子特性(分子量 371.88,根据结构估算的 LogP 值约为 2-3),其口服生物利用度可能中等。该化合物含有硫代酰胺/硫代嘧啶基团,可能被含黄素单加氧酶 (FMO) 或 CYP 酶代谢。血浆半衰期、Cmax、AUC、清除率、分布容积和蛋白结合率等数据尚未公开报道。溶解度:DMSO 100 mg/mL (268.90 mM)。体内研究中,MPO 抑制剂的典型制剂为 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% 生理盐水或 10% DMSO + 90% 玉米油。储存:4℃,氮气保护,防潮。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
MPO-IN-3 的具体毒性数据尚不清楚。作为一种 MPO 抑制剂,其主要预期靶向效应是调节氧化应激和炎症,这也是其预期作用机制。MPO 参与宿主抵御病原体的防御;因此,MPO 抑制可能会增加感染易感性,尤其是在长期使用的情况下。对其他过氧化物酶(例如,甲状腺过氧化物酶、乳过氧化物酶)的非靶向抑制可能会影响甲状腺激素合成或其他生理过程。在专利 WO2013068875A1 中,MPO-IN-3 被选为示例化合物之一,这表明它可能通过了初步毒性筛选(例如,hERG 和 CYP 抑制、遗传毒性),被认为是一种“强效”抑制剂。然而,目前尚无公开的具体毒性数据。仅供研究使用;操作时请采取标准实验室防护措施(手套、实验服、护目镜)。
参考文献

[1]. 2-thiopyrimidinones. WO2013068875A1.

其他信息
MPO-IN-3(CAS:1435469-45-6)是一种强效髓过氧化物酶(MPO)抑制剂,公开于专利WO2013068875A1(2-硫代嘧啶)的实施例191中。髓过氧化物酶是一种含血红素的酶,可催化次氯酸(HOCl)和其他活性氧化剂的生成,从而导致炎症性疾病中的氧化应激和组织损伤。MPO-IN-3是一种研究MPO生物学以及评估MPO抑制剂在心血管疾病(例如动脉粥样硬化、心力衰竭)、炎症性疾病(例如慢性阻塞性肺病、哮喘、关节炎)和神经退行性疾病中的治疗潜力的研究工具。分子式:C16H22ClN3O3S,分子量:371.88,纯度:最高达99.73%。溶解度:DMSO 100 mg/mL (268.90 mM)。储存:4℃,氮气保护,防潮。未获准用于临床。参考文献:Philip Albert Carpino 等,《2-硫代嘧啶酮》,WO2013068875A1。仅供研究使用。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C16H22CLN3O3S
分子量
371.88
精确质量
373.122
CAS号
1435469-45-6
PubChem CID
89557813
外观&性状
White to off-white solid powder
tPSA
109
氢键供体(HBD)数目
3
氢键受体(HBA)数目
5
可旋转键数目(RBC)
7
重原子数目
24
分子复杂度/Complexity
470
定义原子立体中心数目
0
SMILES
O(C1C=C(OC)C=CC=1C1=CC(=O)NC(=S)N1CCCCN)C.Cl
InChi Key
LFHGRTIMOGIDTB-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C16H23N3O3S.ClH/c1-21-11-5-6-12(14(9-11)22-2)13-10-15(20)18-16(23)19(13)8-4-3-7-17;/h5-6,9,13H,3-4,7-8,10,17H2,1-2H3,(H,18,20,23);1H
化学名
1-(4-aminobutyl)-6-(2,4-dimethoxyphenyl)-2-sulfanylidene-1,3-diazinan-4-one;hydrochloride
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO: 100 mg/mL (268.90 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.6890 mL 13.4452 mL 26.8904 mL
5 mM 0.5378 mL 2.6890 mL 5.3781 mL
10 mM 0.2689 mL 1.3445 mL 2.6890 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们