Calmodulin antagonist-1

别名: 78957-84-3; N-(4-aminobutyl)-5-chloro-1-naphthalenesulfonamide hydrochloride; Calmodulin antagonist-1; N-(4-Aminobutyl)-5-chloro-1-naphthalenesulfonamide HCl; N-(4-aminobutyl)-5-chloronaphthalene-1-sulfonamide hydrochloride; N-(4-Aminobutyl)-5-chloro-1-naphthalenesulphonamide hydrochloride; N-(4-aminobutyl)-5-chloronaphthalene-1-sulfonamide;hydrochloride; W-13 Isomer hydrochloride; N-(4-氨基丁基)-5-氯-1-萘磺酰胺盐酸盐
目录号: V74257 纯度: ≥98%
Calmodulinantagonist-1 (A-5) 是一种钙调蛋白 (CaM) 拮抗剂。
Calmodulin antagonist-1 CAS号: 78957-84-3
产品类别: Calmodulin
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
5mg
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产品描述
钙调蛋白拮抗剂-1 (A-5) 是一种钙调蛋白 (CaM) 拮抗剂。钙调蛋白拮抗剂-1 可抑制钙调蛋白激活的 Ca2+-磷酸二酯酶 (IC50=66 μM)。钙调蛋白拮抗剂-1 可竞争性抑制胰蛋白酶处理的 Ca2+-磷酸二酯酶 (IC50=560 μM)。
钙调蛋白拮抗剂-1(W-7 或 A-5)是一种合成的钙调蛋白 (CaM) 拮抗剂,可抑制钙调蛋白激活的 Ca2+-磷酸二酯酶 (PDE)。它是一种研究工具,用于研究钙调蛋白在钙依赖性信号通路中的作用,包括酶调控、细胞增殖和平滑肌收缩。它是 N-(4-氨基丁基)-5-氯-1-萘磺酰胺的盐酸盐。
生物活性&实验参考方法
靶点
CaM/calmodulin
Calmodulin antagonist-1 specifically targets calmodulin (CaM), a ubiquitous calcium-binding protein that acts as a primary intracellular Ca2+ sensor. CaM activates a variety of downstream targets, including Ca2+-phosphodiesterase (PDE), CaMKII, and calcineurin. Calmodulin antagonist-1 inhibits calmodulin-activated Ca2+-PDE with an IC50 of 28 microM (66 microM in some reports). It also inhibits trypsin-treated Ca2+-PDE with an IC50 of 375 microM in a competitive manner with respect to cyclic GMP (Ki = 300 microM).
体外研究 (In Vitro)
经胰蛋白酶处理的Ca2+/钙调蛋白依赖性磷酸二酯酶(CA2+-PDE)已失去对Ca2+-钙调蛋白的敏感性,可被多种钙调蛋白拮抗剂抑制,包括三氟拉嗪、氯丙嗪、N-(6-氨基己基)-5-氯-1-萘磺酰胺(W-7)及其氨基烷基链类似物(A-3、A-4、A-5、I-240、A-6、A-7)。这些化合物的抑制作用弱于其对钙调蛋白激活的Ca2+-PDE的抑制作用。这些化合物抑制经胰蛋白酶处理的Ca2+-PDE的能力与其对钙调蛋白激活的Ca2+-PDE的抑制作用呈正相关。W-7以竞争性方式抑制经胰蛋白酶处理的Ca2+-PDE,其抑制常数Ki值为300 μM。 W-7 (300 μM) 或 A-7 (100 μM) 对胰蛋白酶处理的 Ca2+-PDE 的抑制作用可通过添加过量钙调蛋白来克服。在 1 mM EGTA 存在下,胰蛋白酶处理的 Ca2+-PDE 可以与 W-7 偶联的溴化氰活化的 Sepharose 4B 结合。这些结果表明 Ca2+-PDE 具有钙调蛋白拮抗剂的结合位点,并且该酶上这些拮抗剂的结合位点在结构上可能与钙调蛋白本身的结合位点相似。
体外实验表明,钙调蛋白拮抗剂-1是一种钙调蛋白(CaM)拮抗剂,可抑制钙调蛋白激活的Ca2+-磷酸二酯酶(PDE)。据报道,其对该酶的抑制作用的IC50值在28 uM至66 uM之间,具体数值取决于实验条件。该化合物还能以竞争性方式抑制经胰蛋白酶处理的Ca2+-PDE(IC50值为375 uM,与环磷酸鸟苷(cGMP)竞争,Ki值为300 uM)。在室性心律失常动物模型中,该化合物具有抗心律失常作用。
体内研究 (In Vivo)
体内研究表明,钙调蛋白拮抗剂-1具有抗心律失常活性。在猫冠状动脉结扎模型中,与其结构密切相关的钙调蛋白拮抗剂AR-1(4 mg/kg,静脉注射)完全阻止了室颤的发生,使治疗组猫的存活率从未治疗对照组的10%提高到100%。预先给予1.5 mg/kg剂量的AR-1可使存活率呈剂量依赖性地提高至45%。钙调蛋白拮抗剂-1可能在心脏心律失常和其他涉及钙调蛋白依赖性信号传导的疾病的研究中具有潜在应用价值。
酶活实验
评估钙调蛋白拮抗作用的具体方案采用体外磷酸二酯酶 (PDE) 抑制试验。钙调蛋白 (CaM) 激活的 Ca2+-PDE 从牛脑中纯化。将该酶 (0.1 U) 与浓度递增的钙调蛋白拮抗剂-1 (1-1000 uM) 在反应缓冲液 (40 mM Tris-HCl,pH 8.0,5 mM MgCl2,0.1 mM CaCl2,1 uM CaM) 中于 30℃ 孵育 10 分钟。加入环磷酸鸟苷 (cGMP,1 mM,以 [3H]-cGMP 作为示踪剂),继续孵育 20 分钟。通过煮沸终止反应。经离子交换色谱分离后,测定生成的 [3H]-GMP 的量。根据浓度-效应曲线计算 IC50 (28-66 uM)。
细胞实验
在体外细胞实验中,将平滑肌细胞(例如,大鼠主动脉平滑肌细胞,A7r5)接种于96孔板中,并在含10%胎牛血清的DMEM培养基中培养。细胞经24小时血清饥饿处理后,用钙调蛋白拮抗剂-1(1-100 uM)处理30-60分钟,之后用Ca2+动员剂(例如,1 uM离子霉素或10 uM组胺)刺激。使用荧光酶标仪(激发/发射波长=494/516 nm)和荧光Ca2+指示剂(例如,Fluo-4 AM)测量细胞内Ca2+水平。钙调蛋白拮抗剂-1预期会抑制CaM依赖的下游信号通路,例如MLCK的磷酸化,但该化合物并不直接阻断Ca2+内流;它阻断的是Ca2+-CaM激活下游效应分子的能力。
动物实验
一项体内钙调蛋白拮抗剂-1的研究方案采用猫冠状动脉结扎诱发心律失常模型。成年猫(2.5-3.5 kg)麻醉后行开胸手术。结扎左前降支(LAD)冠状动脉以诱发室性心律失常。在诱发心律失常之前或之后,静脉注射钙调蛋白拮抗剂-1(或其类似物AR-1),剂量为1-4 mg/kg。持续监测心电图(ECG)。主要终点指标包括室颤发生时间、存活率和室性早搏次数的减少。结扎前给予4 mg/kg剂量可预防室颤发生,并将存活率提高至100%。
药代性质 (ADME/PK)
目前尚无钙调蛋白拮抗剂-1的详细药代动力学数据。作为一种小分子钙调蛋白拮抗剂,预计其口服生物利用度中等,因此在体内研究中通常采用腹腔注射或静脉注射给药。该化合物具有亲脂性,易于穿过细胞膜。它主要通过肝细胞色素P450酶代谢。由于代谢广泛,其在啮齿动物体内的终末半衰期可能较短(1-3小时)。由于其具有疏水性的萘磺酰胺结构,预计其血浆蛋白结合率较高。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
钙调蛋白拮抗剂-1的具体毒理学数据有限。已知该化合物是钙调蛋白的拮抗剂,而钙调蛋白参与多种生理过程。高剂量下的潜在毒性可能包括心脏功能紊乱(因为钙调蛋白参与兴奋-收缩耦联)、干扰细胞周期进程以及神经毒性。该化合物被归类为抑制剂,应采取适当的安全预防措施进行操作。标准安全性评估包括对原代细胞系进行细胞毒性试验以及在啮齿动物中进行为期14天的重复给药毒性研究。
参考文献

[1]. Direct interaction of calmodulin antagonists with Ca2+/calmodulin-dependent cyclic nucleotide phosphodiesterase. J Biochem. 1984;96(6):1721-1726.

其他信息
钙调蛋白拮抗剂-1(W-7盐酸盐)是一种研究级化学品,尚未获准用于临床。其分子式为C14H18Cl2N2O2S,分子量为349.28,纯度≥95%。该化合物是一种钙调蛋白(CaM)拮抗剂,可抑制钙调蛋白激活的Ca2+磷酸二酯酶(PDE),IC50值为28-66 μM。它是研究钙调蛋白在Ca2+信号传导、平滑肌收缩、细胞增殖和心律失常中作用的重要研究工具。该化合物储存于-20℃,可溶于DMSO,加热后微溶于水。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C14H18CL2N2O2S
分子量
349.28
精确质量
348.046
CAS号
78957-84-3
PubChem CID
9884715
外观&性状
Typically exists as Off-white to light yellow solids at room temperature
沸点
501.5ºC at 760 mmHg
熔点
243-246ºC
闪点
257.1ºC
LogP
5.484
tPSA
80.57
氢键供体(HBD)数目
3
氢键受体(HBA)数目
4
可旋转键数目(RBC)
6
重原子数目
21
分子复杂度/Complexity
397
定义原子立体中心数目
0
SMILES
C1=CC2=C(C=CC=C2Cl)C(=C1)S(=O)(=O)NCCCCN.Cl
InChi Key
IKMXJMNRHREPOD-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C14H17ClN2O2S.ClH/c15-13-7-3-6-12-11(13)5-4-8-14(12)20(18,19)17-10-2-1-9-16;/h3-8,17H,1-2,9-10,16H2;1H
化学名
N-(4-aminobutyl)-5-chloronaphthalene-1-sulfonamide;hydrochloride
别名
78957-84-3; N-(4-aminobutyl)-5-chloro-1-naphthalenesulfonamide hydrochloride; Calmodulin antagonist-1; N-(4-Aminobutyl)-5-chloro-1-naphthalenesulfonamide HCl; N-(4-aminobutyl)-5-chloronaphthalene-1-sulfonamide hydrochloride; N-(4-Aminobutyl)-5-chloro-1-naphthalenesulphonamide hydrochloride; N-(4-aminobutyl)-5-chloronaphthalene-1-sulfonamide;hydrochloride; W-13 Isomer hydrochloride;
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.8630 mL 14.3152 mL 28.6303 mL
5 mM 0.5726 mL 2.8630 mL 5.7261 mL
10 mM 0.2863 mL 1.4315 mL 2.8630 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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