| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 1mg | ||
| 5mg | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
Homeobox A9 (HOXA9)[1]
The primary molecular target of DB818 is the Homeobox A9 (HOXA9) transcription factor. HOXA9 is a DNA-binding protein that regulates gene expression by binding to specific DNA sequences (the HOXA9 cognate sequence) in the promoters of its target genes. DB818 is reported to be a small molecule inhibitor of HOXA9 that binds as a minor groove DNA ligand on the HOXA9 cognate sequence, thereby blocking the interaction between HOXA9 and DNA. This inhibition suppresses the transcriptional activity of HOXA9. Downstream targets of HOXA9 that are inhibited by DB818 include MYB (MYB proto-oncogene), MYC (MYC proto-oncogene), and BCL2 (BCL2 apoptosis regulator). By inhibiting these oncogenes, DB818 induces growth arrest and apoptosis in HOXA9-driven leukemia cells. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，DB818 是一种强效的 HOXA9 抑制剂。在三种不同的人类急性髓系白血病 (AML) 细胞系（可能是 OCI/AML3、HL-60 等）中，DB818 处理可抑制细胞生长并诱导细胞凋亡。它还会导致 HOXA9 转录靶基因（包括 MYB、MYC 和 BCL2）的表达下调，同时上调 FOS（Fos 原癌基因，AP-1 转录因子亚基）的表达。对靶基因的影响与 HOXA9 抑制机制相符。当在这些细胞系中敲低 HOXA9 时，观察到类似的效果，但 MYC 的表达存在一些差异。这表明 DB818 可能对 HOXA9 驱动的信号通路具有一定的特异性，但也可能存在其他脱靶效应。DB818 抑制细胞生长的效力尚未明确说明，但处于低微摩尔范围内。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在感染蠕虫的小鼠中，DB818（12.5 mg/kg，25 mg/kg；皮下注射，每日一次，连续4天）在25 mg/kg剂量下完全清除了寄生虫血症。12.5 mg/kg剂量下，三分之二的小鼠被治愈[1]。在小鼠中，DB818会在感染后约20天诱发复发[1]。
在体内，DB818 在小鼠感染模型中显示出强效活性，尤其针对微小巴贝虫（Babesia microti）。本研究中，将 DB818 皮下注射（sc）给感染微小巴贝虫的小鼠，剂量分别为 12.5 mg/kg 和 25 mg/kg，每日一次，连续 4 天。25 mg/kg 剂量组完全治愈了所有受试小鼠的血寄生虫感染（血液中寄生虫的存在）。12.5 mg/kg 剂量组治愈了 2/3 的小鼠。然而，值得注意的是，部分小鼠在感染后约 20 天出现感染复发。虽然 DB818 最初并非为此目的而开发，但这一发现证明了其体内生物利用度和疗效。目前尚未有关于 DB818 体内抗急性髓系白血病（AML）活性的公开报道，但据推测，其在 HOXA9 驱动的 AML 小鼠异种移植模型中可能具有抗肿瘤活性。 |
| 酶活实验 |
DB818 的典型非细胞结合分析方法是 DNA 结合分析，例如电泳迁移率变动分析 (EMSA) 或基于荧光偏振 (FP) 的 DNA 结合分析。进行 DNA 结合分析时，首先合成含有 HOXA9 共识结合序列（例如 5'-TTAATGG-3'）的双链 DNA 寡核苷酸，并用荧光染料（例如 FAM）进行标记。将不同浓度的重组 HOXA9 蛋白（0-100 nM）与 10 nM 的标记 DNA 探针在结合缓冲液（10 mM Tris-HCl，pH 7.5，50 mM KCl，1 mM DTT，0.05% NP-40，5% 甘油）中于室温孵育 30 分钟。测量荧光偏振，并利用结合曲线确定 Kd 值。在竞争性检测中，DB818 与 HOXA9 蛋白预孵育 15 分钟，随后加入 DNA 探针。测量荧光偏振 (FP) 信号的变化，并计算 IC₅0 值。或者，也可以使用生物素标记的 DNA 探针，并采用化学发光 EMSA 试剂盒。DB818 的典型体外细胞检测方法是使用 HOXA9 高表达的 AML 细胞系，例如 OCI/AML3 或 HL-60。细胞在添加了 10% 胎牛血清 (FBS) 和 1% 青霉素-链霉素的 RPMI-1640 培养基中，于 37℃、5% CO2 培养箱中培养。细胞活力检测中，将细胞以 2 × 10⁴ 个/孔的密度接种于 96 孔板中，并用不同浓度（0.1 - 50 uM）的 DB818 处理 48-72 小时。采用 CellTiter-Glo 发光法或 MTT 法检测细胞活力。半数抑制浓度 (IC₅0) 通过非线性回归计算。细胞凋亡检测中，将细胞用 10 uM DB818 处理 48 小时，用 Annexin V-FITC 和碘化丙啶 (PI) 染色，并通过流式细胞术进行分析。DB818 处理后，采用定量实时 PCR (qRT-PCR) 或蛋白质印迹法检测 HOXA9 靶基因（MYB、MYC、BCL2）的表达。
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| 细胞实验 |
DB818 的典型体内动物研究采用小鼠巴贝虫感染模型。将 1 × 10⁷ 个巴贝虫感染的红细胞腹腔注射（IP）给 6-8 周龄、18-22 克的雌性 BALB/c 小鼠。待感染建立后，每日通过吉姆萨染色血涂片检查监测寄生虫血症（感染红细胞的百分比）。
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| 动物实验 |
当寄生虫血症达到约 5-10% 时（通常在感染后 5-7 天），将小鼠随机分组（每组 n=5）。将 DB818 溶解于合适的溶剂中，例如 20% DMSO 的 PBS 溶液或 0.5% 羧甲基纤维素 (CMC) 溶液，并以 12.5 mg/kg 和 25 mg/kg 的剂量，连续 4 天，每日一次皮下注射 (SC)。对照组仅注射溶剂。每日监测寄生虫血症，持续 30 天。通过寄生虫血症的降低和小鼠的存活率来评估治疗效果。所有动物实验程序必须经机构动物护理和使用委员会 (IACUC) 批准。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
DB818 的药代动力学特性尚未得到充分表征。该化合物是一种小分子，分子量为 360.44 g/mol。据预测，它具有亲脂性（计算的 logP 值约为 2-3），并且可能具有中等至良好的膜渗透性。它在水中的溶解度为 35.71 mg/mL (99.07 mM)，这表明它可能被制成静脉注射剂。在体内研究中，该化合物采用皮下注射给药，表明它可以通过该途径吸收。所用剂量 (12.5-25 mg/kg) 与许多小分子抑制剂的典型剂量相当。目前尚未公开报道具体的药代动力学参数，例如半衰期 (t1/2)、Cmax 或生物利用度。它可能在肝脏代谢，但其清除途径尚未明确。由于该化合物仅供研究使用，因此没有人体药代动力学数据。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
DB818 的毒理学数据有限。在已发表的 DB818 对小鼠微小巴贝虫感染模型的研究中，该化合物在测试剂量（12.5 和 25 mg/kg 皮下注射，连续 4 天）下耐受性良好。未报告明显的体重减轻或其他明显的毒性症状。然而，尚未进行包括急性、亚慢性及遗传毒性研究在内的全面毒理学评估。体外研究表明，该化合物可能对快速分裂的白血病细胞具有中度至高度毒性。处理该化合物时应采取标准安全预防措施，包括在通风橱内操作，并佩戴手套、实验服和护目镜。该化合物仅供研究使用，不得用于人体。
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| 参考文献 |
[1]. Sonoda Y, et al. Effects of HOXA9 Inhibitor DB818 on the Growth of Acute Myeloid Leukaemia Cells. Anticancer Res. 2021 Apr;41(4):1841-1847.
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| 其他信息 |
DB818 并非获批药物，也未进入临床试验阶段。它是一种研究工具，用于研究 HOXA9 转录因子在造血和急性髓系白血病 (AML) 中的作用。其作用机制是抑制 HOXA9 的 DNA 结合活性，从而抑制下游癌基因（如 MYB、MYC 和 BCL2）的表达。该化合物在寄生虫感染模型中显示出良好的体内活性，凸显了其生物利用度。它是一种潜在的先导化合物，可用于开发针对 HOXA9 驱动型癌症的靶向疗法。DB818 尚未注册任何临床试验。仅供研究使用；不得用于人体诊断或治疗。
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| 分子式 |
C19H16N6S
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|---|---|
| 分子量 |
360.435541152954
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| 精确质量 |
360.115
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| CAS号 |
790241-43-9
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| PubChem CID |
449090
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| 外观&性状 |
White to yellow solid powder
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| LogP |
2.5
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| tPSA |
157
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| 氢键供体(HBD)数目 |
5
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
26
|
| 分子复杂度/Complexity |
546
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C1=CC(=CC=C1C2=CC=C(S2)C3=NC4=C(N3)C=C(C=C4)C(=N)N)C(=N)N
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| InChi Key |
MSQVFIHMHRAMOC-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H16N6S/c20-17(21)11-3-1-10(2-4-11)15-7-8-16(26-15)19-24-13-6-5-12(18(22)23)9-14(13)25-19/h1-9H,(H3,20,21)(H3,22,23)(H,24,25)
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| 化学名 |
2-[5-(4-carbamimidoylphenyl)thiophen-2-yl]-3H-benzimidazole-5-carboximidamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7744 mL | 13.8719 mL | 27.7439 mL | |
| 5 mM | 0.5549 mL | 2.7744 mL | 5.5488 mL | |
| 10 mM | 0.2774 mL | 1.3872 mL | 2.7744 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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