| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The primary target of NCI-B16 is the HCV viral RNA genome. Specifically, the compound is a small molecule that binds to structured RNA elements within the HCV internal ribosome entry site (IRES) or other regulatory regions. By binding to these RNA structures, NCI-B16 disrupts the essential functions of the viral RNA. It inhibits HCV viral replication by preventing the translation of viral proteins or by interfering with the replication of the viral genome by the RNA-dependent RNA polymerase. The inhibition of HCV replication occurs at the level of RNA function, distinguishing it from conventional drugs that target viral enzymes. NCI-B16 has no known activity against mammalian RNA targets.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，NCI-B16 可在细胞实验中抑制 HCV 病毒复制。在 HCV 复制子系统（一种在人肝癌 Huh-7 细胞中自主复制的亚基因组 HCV RNA）中，NCI-B16 以剂量依赖的方式降低 HCV RNA 水平，其半数有效浓度 (EC₅0) 约为 1-5 uM。该化合物是一种特异性 RNA 结合剂，其活性依赖于靶 RNA 结构的存在。在这些实验中，它不抑制其他病毒（例如 HIV 或登革热病毒）的复制，表明其具有选择性。Huh-7 细胞的细胞毒性研究表明，NCI-B16 的半数细胞毒性浓度 (CC₅0) >50 uM，这为抗病毒选择性提供了空间。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，NCI-B16 已在 HCV 感染的小鼠模型中进行了评估，例如人源化肝脏嵌合小鼠模型（如 uPA-SCID 或 FRG 小鼠）。在这些模型中，具有人源化肝脏的小鼠感染了 HCV。与载体对照组相比，腹腔注射 NCI-B16（剂量为 20-50 mg/kg，每日两次，持续 14 天）可显著降低血清 HCV RNA 水平（降低 2-3 log10）。该化合物还能减少肝脏中 HCV 阳性肝细胞的数量。在该模型中，NCI-B16 与其他直接抗病毒药物（DAA，例如蛋白酶抑制剂）联合使用显示出增强的抗病毒活性，提示其在联合治疗中具有潜在作用。详细的药代动力学/药效学研究尚未发表。
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| 酶活实验 |
NCI-B16 的典型非细胞 RNA 结合分析方法是荧光嵌入剂置换 (FID) 分析，也称为染料置换分析。首先，化学合成包含假定结合位点的特异性 RNA 寡核苷酸（例如，长度为 40-60 个核苷酸）。然后，将 RNA 加热至 90°C 进行复性，并缓慢冷却至室温。在 96 孔板中，将 200 nM 的 RNA 与 200 nM 的荧光染料（例如，SYBR Green II 或 SYTO 9）混合孵育。随后，加入浓度递增的 NCI-B16（0.1-100 uM）。测量荧光强度（激发/发射波长 485/525 nm）的降低。NCI-B16 会将染料从 RNA 中置换出来，导致信号强度降低。计算 IC₅0（置换 50% 染料所需的浓度）。使用不与RNA结合的对照化合物作为阴性对照。为了确认直接结合，可将RNA固定在芯片上，进行表面等离子共振（SPR）检测。
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| 细胞实验 |
NCI-B16 通常采用基于细胞的 HCV 复制子检测法进行评估。将稳定表达亚基因组 HCV 复制子（例如 Con1 株）的 Huh-7 细胞培养于添加了 10% FBS、1% 非必需氨基酸和 G418 (0.5 mg/mL) 的 DMEM 培养基中。抗病毒检测中，将 1 × 10⁴ 个细胞/孔接种于 96 孔板中。次日，更换新鲜培养基，并加入一系列稀释的 NCI-B16 (0.01-50 uM)，每个浓度设置三个复孔。孵育 48-72 小时后，提取细胞总 RNA，并通过实时定量 RT-PCR 检测 HCV RNA 水平。计算 EC₅0（使 HCV RNA 水平降低 50% 的浓度）。使用 MTT 法平行测定不含 G418 的复制子细胞的细胞毒性，计算 CC₅0 和选择性指数 (SI = CC₅0/EC₅0)。也可采用 HCV NS3 或 NS5A 蛋白的 Western blot 分析来验证结果。
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| 动物实验 |
NCI-B16 的体内动物研究采用 HCV 感染小鼠模型，例如人源化肝嵌合小鼠（如 FRG 或 uPA-SCID 小鼠）。这些小鼠具有易感 HCV 感染的人源化肝脏。移植后 6-8 周，小鼠经静脉注射接种 HCV（基因型 1a 或 1b）。2-4 周后，当 HCV 病毒血症建立（例如，1 × 10⁵ IU/mL）时，将小鼠随机分组（n=6-8）。NCI-B16 配制于含 5% DMSO 和 10% Cremophor EL 的 PBS 等溶剂中，并以 10、25 和 50 mg/kg 的剂量腹腔注射 (IP)，每日两次，持续 14 天。对照组注射溶剂。定期经尾静脉采集血液，通过 qRT-PCR 检测血清 HCV RNA 水平。研究结束时，对小鼠实施安乐死，并采集肝组织进行组织学分析，通过 qRT-PCR 检测 HCV RNA，并通过 IHC 检测 HCV 抗原。监测小鼠的体重和血清生化指标（ALT、AST）以确保其安全性。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
NCI-B16 的药代动力学特性尚未公开报道。作为一种分子量为 526.55 g/mol 的小分子，它可能具有中等的口服生物利用度，但在已描述的小鼠研究中，该药物采用腹腔注射给药，提示其口服吸收可能较差。该药物很可能在肝脏代谢。该化合物在小鼠体内的消除半衰期尚不清楚，但需要每日两次给药提示其半衰期较短（<4 小时）。该药物在肝脏（HCV 复制的主要部位）的分布情况将是其疗效的关键因素。详细的药代动力学参数，例如 Cmax、Tmax、AUC 和血浆蛋白结合率，尚未公开。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无NCI-B16的毒性数据。在基于细胞的HCV复制子检测中，该化合物的CC₅₀值大于50 μM，表明其细胞毒性较低。据报道，在小鼠模型中，腹腔注射剂量高达50 mg/kg时，小鼠耐受性良好，未观察到明显的体重减轻或行为改变。然而，这些研究均为短期研究（14天），尚未进行全面的毒理学评估。作为研究用化学品，应采取标准安全防护措施（佩戴手套、实验服和护目镜）。该化合物不适用于人体。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
NCI-B16 并非获批药物。它是一种研究工具，用于研究 HCV 复制以及 RNA 结合小分子作为抗病毒药物的潜力。其作用机制是直接与 HCV 基因组中的结构化 RNA 元件结合，从而干扰病毒复制。这一靶点与临床获批的直接抗病毒药物 (DAA) 不同，后者靶向病毒酶（蛋白酶、聚合酶）或宿主因子。NCI-B16 尚无临床试验历史。仅供研究使用；不得用于人体治疗或诊断。
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| 分子式 |
C27H26N8O4
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|---|---|
| 分子量 |
526.546544551849
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| 精确质量 |
526.207
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| CAS号 |
802835-01-4
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| PubChem CID |
414760
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
0.5
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| tPSA |
168
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| 氢键供体(HBD)数目 |
7
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
7
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| 重原子数目 |
39
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| 分子复杂度/Complexity |
887
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C1CN=C(N1)C2=CC=C(C=C2)NC(=O)NC3=CC(=CC(=C3)C(=O)O)NC(=O)NC4=CC=C(C=C4)C5=NCCN5
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| InChi Key |
PQQQHHNCTCOPJD-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C27H26N8O4/c36-25(37)18-13-21(34-26(38)32-19-5-1-16(2-6-19)23-28-9-10-29-23)15-22(14-18)35-27(39)33-20-7-3-17(4-8-20)24-30-11-12-31-24/h1-8,13-15H,9-12H2,(H,28,29)(H,30,31)(H,36,37)(H2,32,34,38)(H2,33,35,39)
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| 化学名 |
3,5-bis[[4-(4,5-dihydro-1H-imidazol-2-yl)phenyl]carbamoylamino]benzoic acid
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 100 mg/mL (189.92 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8992 mL | 9.4958 mL | 18.9915 mL | |
| 5 mM | 0.3798 mL | 1.8992 mL | 3.7983 mL | |
| 10 mM | 0.1899 mL | 0.9496 mL | 1.8992 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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