V5 Epitope Tag Peptide TFA (V5 epitope tag peptide)

目录号: V76380 纯度: ≥98%
V5 表位标签肽 (TFA) 是从副粘病毒猴病毒 5 的 P 和 V 蛋白表位中提取的多肽。
V5 Epitope Tag Peptide TFA (V5 epitope tag peptide) 产品类别: Peptides | 多肽
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
V5 表位标签肽 (TFA) 是从副粘病毒猿猴病毒 5 的 P 和 V 蛋白上的表位提取的多肽。
V5 表位标签肽 TFA 是一种短肽(14 个氨基酸),来源于副黏病毒属猿猴病毒 5 型 (SV5) 的 P 蛋白和 V 蛋白。其序列通常为 GKPIPNPLLGLDST。三氟乙酸 (TFA) 盐可提高其溶解度和操作性。该肽可用作表位标签,用于多种表达系统中重组蛋白的检测、纯化和定位。
生物活性&实验参考方法
靶点
The V5 tag itself has no biological target; it serves as an affinity handle. It is recognized by the commercially available anti‑V5 antibody (e.g., clone SV5‑Pk1). The antibody binds to the peptide with high affinity (typically Kd in the low nanomolar range), allowing immunoprecipitation, Western blotting, immunofluorescence, and fluorescence‑activated cell sorting (FACS) of tagged proteins.
体外研究 (In Vitro)
游离的V5肽(50-500 ng/mL)能够与抗V5抗体亲和柱上的V5标签蛋白竞争性洗脱,无需苛刻的洗脱条件(例如低pH或高盐)即可置换结合的蛋白。这使得洗脱的蛋白能够以其天然活性形式回收。体外实验表明,该游离肽对细胞活力或代谢没有内在影响。
体内研究 (In Vivo)
在动物实验中,V5肽本身并不用作治疗药物。相反,可以使用表达V5标签目标蛋白的转基因小鼠或其他模式生物,通过免疫组织化学或组织裂解液的蛋白质印迹法,利用抗V5抗体追踪组织中该蛋白的表达。单独的V5肽会被肾脏迅速清除,不会在组织中蓄积。
酶活实验
V5表位标签肽通常通过其伯胺基团固定在固相载体(例如,CNBr活化的琼脂糖或磁珠)上。固定化的肽用于从血清或杂交瘤上清液中亲和纯化抗V5抗体。或者,游离肽可用于ELISA形式的竞争性检测:将递增浓度的游离V5肽(0.1-100 ug/mL)加入包被有V5肽的孔中,随后加入固定浓度的抗V5抗体。使用HRP标记的二抗检测抗体结合的减少情况。
细胞实验
V5标签肽的细胞活性只有在与目标蛋白偶联后才具有意义。在定位研究中,将编码V5标签蛋白的质粒用脂质体转染试剂转染到细胞(例如HEK-293、HeLa或CHO细胞)中。24-48小时后,用4%多聚甲醛固定细胞,用0.1% Triton X-100透化细胞,然后用小鼠抗V5一抗(1:1000稀释)染色,再用Alexa Fluor-488标记的抗小鼠二抗染色。最后,用荧光显微镜对细胞进行成像。
动物实验
该肽段本身不用于动物实验。然而,可以通过注射表达V5标签蛋白的肿瘤细胞来建立异种移植模型。待肿瘤生长后,处死小鼠,切除肿瘤,裂解肿瘤细胞,并使用抗V5抗体进行Western blotting分析,以确认标签蛋白的表达。这是验证导入基因产物在体内表达的常用对照实验。
药代性质 (ADME/PK)
由于其氨基酸组成(含有多个极性残基)和三氟乙酸(TFA)反离子,V5肽具有水溶性。在血液中,游离肽会被蛋白酶迅速降解(半衰期<5分钟),并主要通过肾脏滤过排出体外。该肽不能穿过血脑屏障。TFA盐不会改变该肽的药代动力学特征。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
V5标签肽在研究中使用的低浓度下无毒。如果TFA反离子浓度过高(例如>1 mg/mL)并通过静脉注射给药,可能会因螯合钙离子而导致低血压,但实际应用中绝不会使用如此高的浓度。该肽在标准研究试验中未观察到遗传毒性、免疫原性或器官毒性。
其他信息
V5表位标签是几种常用的表位标签之一(其他标签包括HA、Myc、FLAG和His标签)。它最早于20世纪90年代被描述,现已成为分子生物学中的标准工具。V5表位可被特征明确的单克隆抗体识别,该肽段以三氟乙酸盐的形式存在,以提高其在水性缓冲液中的溶解度和稳定性。目前,它尚未获准用于人类治疗。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C64H108N16O20.C2HF3O2
外观&性状
Typically exists as solid at room temperature
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O :~100 mg/mL (~65.12 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们