TNF-α (31-45), human TFA

目录号: V76405 纯度: ≥98%
TNF-α (31-45),人 TFA 是人肿瘤坏死因子-α 的多肽片段。
TNF-α (31-45), human TFA 产品类别: TNF Receptor
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
10mg
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产品描述
TNF-α (31-45),人TFA,是人肿瘤坏死因子-α的多肽片段。TNF-α是一种炎症细胞因子,可诱导坏死或凋亡。
人TNF-alpha (31-45) TFA是一种源自人肿瘤坏死因子-alpha (TNF-alpha) 蛋白的15个氨基酸肽片段(残基31至45),以三氟乙酸盐(TFA)的形式提供。它是核因子kappaB (NF-kappaB) 通路的强效激活剂[33L9-L10]。TNF-alpha是一种关键的促炎细胞因子,参与全身炎症反应,属于一类刺激急性期反应的细胞因子。该肽片段可作为研究TNF-alpha信号通路(特别是其在NF-kappaB激活中的作用)的研究工具。NF-kappaB是炎症、细胞存活和肿瘤发生的重要通路。
生物活性&实验参考方法
靶点
This peptide fragment specifically targets the TNF receptor (TNFR) signaling pathway, which ultimately leads to the activation of the NF-kappaB transcription factor. The parent molecule, TNF-alpha, is a pro-inflammatory cytokine that binds to its receptors (TNFR1 and TNFR2). This binding recruits adapter proteins and triggers a signaling cascade that leads to the activation of NF-kappaB. TNF-alpha (31-45), human TFA acts as an activator of this pathway, and the TNF receptor and NF-kB are its primary targets within the Apoptosis and NF-kB pathways [33L5-L6].
体外研究 (In Vitro)
体外实验表明,人源TNF-α(31-45)是NF-κB通路的一种强效激活剂。在细胞层面,TNF-α已被证实能够促进顺铂耐药,这种作用是通过激活NF-κB通路介导的。浓度为5 uM时,处理1小时即可产生这种作用,且不会改变RPS3的表达水平,提示其作用机制具有特异性[33L13-L15]。这种活性使其成为研究癌细胞中炎症、NF-κB激活和耐药性之间联系的重要工具。
体内研究 (In Vivo)
通常情况下,该特定肽片段的体内活性数据并未见报道。作为TNF-α细胞因子的片段,它通常不作为直接治疗药物用于动物研究。然而,全长TNF-α具有显著的体内效应,包括通过与TNFR2相互作用激活NF-κB通路,从而促进肿瘤生长、侵袭和转移[33L11-L12]。该肽片段可作为研究工具,用于在体外从分子水平研究这些过程的机制。
酶活实验
人TNF-α (31-45) 的活性特征在于其与靶受体的结合能力。一种研究此特性的标准无细胞检测方法是酶联免疫吸附试验 (ELISA)。将重组TNF受体 (TNFR2) 蛋白包被于96孔板上。用蛋白溶液(例如BSA)封闭孔板以防止非特异性结合。向孔中加入递增浓度的TNF-α (31-45) 肽段,使其结合。然后使用针对该TNF-α表位的特异性一抗检测结合的肽段,随后使用HRP标记的二抗。使用显色底物显色,并在酶标仪上读取信号以确定结合亲和力。
细胞实验
对于体外细胞实验,可以使用对TNF-α有反应的培养细胞(例如HeLa细胞、HEK-293细胞或癌细胞系)。将细胞接种于96孔板中,使其贴壁。然后用不同浓度(例如0.1-100 uM)的TNF-α (31-45)肽处理细胞1-24小时。处理后,裂解细胞,并检测NF-κB的激活水平。这可以通过荧光素酶报告基因检测(如果细胞已转染NF-κB反应性荧光素酶构建体)来实现,或者更常用的方法是制备核提取物,并使用基于NF-κB ELISA的转录因子检测试剂盒检测p65与其DNA共有序列的结合。
动物实验
人源TNF-α (31-45)肽段不适用于动物实验中的治疗用途,其体内应用主要为作为抗原。常用的动物实验方案是制备抗TNF-α抗体。将100-200微克肽段乳化于弗氏完全佐剂(CFA)中,皮下注射至兔或小鼠体内。2-4周后,使用相同剂量的肽段乳化于弗氏不完全佐剂(IFA)中进行加强免疫。2-3次加强免疫后,采集血液样本,并通过ELISA检测血清中的抗体滴度。该多克隆抗体可用于多种免疫学技术检测人源TNF-α。
药代性质 (ADME/PK)
TNF-α (31-45) 和人 TFA 的药代动力学性质尚未明确,因为它是一种研究性肽,而非治疗候选药物。作为一种小肽,如果进入血液循环,它会被迅速降解和清除。TFA 盐是肽纯化(HPLC)过程中常用的抗衡离子。已知 TFA 盐的存在会影响肽的净重、外观和溶解度。TFA 盐会增加产品的总质量,在配制溶液时必须考虑这一点。该化合物通常溶于水,TFA 盐有助于提高其在储存过程中的溶解度和稳定性。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
目前尚无关于人源TNF-α (31-45) TFA的具体毒性数据。作为一种人源细胞因子的短肽片段,它通常被认为毒性较低,适用于实验室用途。然而,与所有研究用化学品一样,应遵循标准安全操作规程,包括佩戴手套和实验服,以防止皮肤接触或意外吸入。该肽应在通风良好的区域操作。它仅供研究使用,不得用于诊断、治疗或临床应用。游离碱形式通常储存在-20℃以保持长期稳定性[33L7-L8]。
参考文献

[1]. Idriss HT, Naismith JH. TNF alpha and the TNF receptor superfamily: structure-function relationship(s). Microsc Res Tech. 2000 Aug 1;50(3):184-95.

[2]. RPS3 Promotes the Metastasis and Cisplatin Resistance of Adenoid Cystic Carcinoma. Front Oncol. 2022 Jun 30:12:804439.

[3]. The Role of Tumor Necrosis Factor Alpha (TNF-α) in Autoimmune Disease and Current TNF-α Inhibitors in Therapeutics. Int J Mol Sci. 2021 Mar 8;22(5):2719.

其他信息
人TNF-α (31-45) TFA是人肿瘤坏死因子-α (TNF-α) 蛋白的肽片段,其序列为RRANALLANGVELRD [33L5]。它以TFA盐的形式提供,这是合成肽在研究中常用的盐形式。该肽是研究TNF-α在激活NF-κB通路中作用的重要工具,NF-κB通路是参与炎症、免疫、细胞存活和肿瘤发生的关键信号通路。该肽仅供研究使用,并非治疗药物,不可用于临床,也未获得任何监管机构的批准。通常以粉末形式储存于-80℃以确保长期稳定性[33L7]。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C71H123F3N26O24
分子量
1781.89
相关CAS号
TNF-α (31-45), human;144796-71-4
外观&性状
Solid powder
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.5612 mL 2.8060 mL 5.6120 mL
5 mM 0.1122 mL 0.5612 mL 1.1224 mL
10 mM 0.0561 mL 0.2806 mL 0.5612 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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