SV40 T-Ag-derived NLS peptide TFA

目录号: V76462 纯度: ≥98%
SV40 T-Ag 衍生的 NLS 肽 TFA 是一种核定位信号肽,用该肽标记的 DNA 可以有效地转移到细胞核中。
SV40 T-Ag-derived NLS peptide TFA 产品类别: Peptides | 多肽
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
10mg
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  • SV40 T-Ag-derived NLS peptide
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产品描述
SV40 T-Ag 衍生的 NLS 肽 TFA 是一种核定位信号肽,用该肽标记的 DNA 可以有效地转移到细胞核中。
SV40 T-Ag衍生的NLS肽TFA是一种合成肽,对应于猿猴病毒40大T抗原的核定位信号(NLS)。它作为一种核定位信号肽,在标记该肽后,能够有效地将DNA、蛋白质和其他大分子等货物分子转运至细胞核内。该肽的序列为PKKKRKVEDPYC,TFA盐用于提高其溶解度和稳定性。
生物活性&实验参考方法
靶点
Nuclear import machinery, specifically importin alpha/beta heterodimer (karyopherin). The SV40 NLS peptide binds to importin alpha, which then recruits importin beta to form a ternary complex that docks at the nuclear pore complex, facilitating active transport of the cargo into the nucleus. It targets the classical nuclear import pathway.
体外研究 (In Vitro)
SV40 T-Ag衍生的NLS肽(TFA)能够高效地将标记有该肽的DNA和蛋白质转运至活细胞核内。它已成功与多种载体分子(包括质粒DNA、荧光蛋白和纳米颗粒)偶联,实现了高效的核递送。该肽在与载体分子共价连接后仍保持其生物活性。
体内研究 (In Vivo)
体内研究表明,与SV40 NLS肽段偶联的DNA或蛋白质载体能够有效地转运至动物模型的细胞核内。该肽段已被用于增强体内非病毒基因递送,提高治疗基因的转染效率并减少脱靶效应。它为研究活体生物的核转运提供了一种有价值的工具。
酶活实验
输入蛋白结合实验:将重组输入蛋白α固定在Ni-NTA或GST亲和层析板上。加入浓度递增的SV40 NLS肽段TFA(0-1000 nM),并使用抗NLS抗体通过ELISA或荧光偏振法检测结合情况。输入蛋白α结合的IC50值可通过标记的NLS探针的置换来确定。非特异性结合则使用随机序列的NLS肽段进行测定。
细胞实验
核输入实验:将贴壁细胞(例如 HeLa 或 NIH/3T3)培养于 6 孔板的盖玻片上。向培养基中加入荧光标记的 SV40 NLS 肽段 TFA(0.1-10 uM),并在 37℃ 下孵育 1-4 小时。或者,将该肽段与荧光标记的蛋白质载体偶联。固定细胞后,用 DAPI 进行复染以观察细胞核。通过共聚焦显微镜和图像分析对核定位进行定量分析。
动物实验
体内核递送模型:将SV40 NLS肽偶联的载体(例如DNA纳米颗粒或荧光探针)经静脉或肿瘤内注射到小鼠体内。注射后4-24小时采集组织切片(肝脏、脾脏、肿瘤),并进行组织学处理。通过免疫组织化学或共聚焦显微镜评估载体的核定位。对于基因递送,则检测报告基因(例如荧光素酶)的表达。
药代性质 (ADME/PK)
目前尚无SV40 NLS肽TFA作为独立化合物的药代动力学数据。作为一种肽(分子量1604.79,TFA盐),其口服生物利用度有限,通常通过注射给药或用于细胞培养的局部用药。与游离碱相比,TFA盐可提高其溶解度和稳定性。该肽应储存于-20℃,密封保存,并避光防潮。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
SV40 NLS肽TFA的毒性数据有限。该肽仅供研究使用,不可用于人体治疗。在细胞培养中,该肽在有效浓度(0.1-10 μM)下通常无毒。在动物研究中,典型剂量(10-50 mg/kg)下未报告急性毒性或显著不良反应。应遵循标准安全预防措施。
参考文献

[1]. Protamine-fragment peptides fused to an SV40 nuclear localization signal deliver oligonucleotides that produce antisense effects in prostate and bladder carcinoma cells. Bioconjug Chem. 2002 Mar-Apr;13(2):177-87.

其他信息
SV40 T-Ag衍生的NLS肽TFA是一种用于细胞生物学的研究工具,用于研究核输入机制和增强基因递送。该肽尚未进入临床试验或获得监管部门批准用于人体治疗,仅供研究使用。序列:PKKKRKVEDPYC。产品应以粉末形式储存于-20℃的密封干燥环境中。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C68H112F3N19O20S
分子量
1604.79
相关CAS号
SV40 T-Ag-derived NLS peptide;105425-98-7
外观&性状
White to off-white solid powder
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.6231 mL 3.1157 mL 6.2313 mL
5 mM 0.1246 mL 0.6231 mL 1.2463 mL
10 mM 0.0623 mL 0.3116 mL 0.6231 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们