| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
T cells; Apoptosis
Phytohemagglutinins target T‑cell membranes, binding to specific glycoproteins on the cell surface. They function as mitogens, stimulating T‑cell proliferation and activation. The mechanism involves cross‑linking of cell surface receptors, leading to intracellular signaling cascades that promote metabolic activity, cell division, and cytokine production. PHA also induces apoptosis via increasing the proapoptotic protein Bax. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在浓度为 10 µg/mL 时，PHA-P 可刺激阳性选择的蜕膜 CD8+ T 淋巴细胞（1×10⁶ 个细胞/mL）产生细胞因子。孵育 24 小时和 48 小时后，在培养上清液中检测到了 CSF2、IFNG、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12 和 TNF，而 IL-4 水平低于检测范围。具体而言，PHA-P 刺激的蜕膜 CD8+ T 淋巴细胞产生高水平的 IFNG 和 IL-8，以及低水平的 GM-CSF、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-10、IL-12 和 TNF。[1]
- 在胎盘组织块侵袭实验中，使用 PHA-P（10 µg/mL）作为对照。将胎盘组织块置于含PHA-P的培养基中培养7天后，与仅含培养基的对照组相比，侵袭的绒毛外滋养层细胞数量无差异。[1] 经植物血凝素-P（10 μg/ml；24-48小时）刺激的蜕膜CD8+ T细胞产生少量粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（CSF2）、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-10、IL-12和肿瘤坏死因子，以及高水平的干扰素γ和白细胞介素（IL）-8[2]。体外实验表明，PHA-P具有强大的T淋巴细胞有丝分裂活性。在5-10 μg/mL的浓度范围内，它能有效刺激人外周血单核细胞（PBMC）和T细胞的增殖。 PHA-P（10 μg/mL；24–48 小时）可诱导受刺激的蜕膜 CD8+ T 细胞产生多种细胞因子，包括少量 GM-CSF、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-10、IL-12 和 TNF-α，以及显著高水平的 IFN-γ 和 IL-8。通过溴脱氧尿苷掺入法测定，PHA-P 对人外周血单核细胞 (PBMC) 刺激的促有丝分裂效力阈值为 ≤10 μg/mL。 在体外，植物血凝素 (PHA) 用于 PHA 检测以评估细胞免疫。它们选择性地刺激造血或淋巴来源的单核细胞。重组 PHA-L 已被证明具有更强的抗肿瘤作用，其抗肿瘤机制是通过直接细胞毒性和免疫调节实现的。PHA 通过增加促凋亡蛋白 Bax 诱导细胞凋亡。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
雄性Sprague-Dawley大鼠腹腔注射植物血凝素-P（25和50 mg/kg，每日一次，连续15天）后，纵骨生长、软骨细胞计数、软骨板厚度、干骺端硬组织质量、钙化软骨核心百分比以及每毫米骨表面成骨细胞数量均减少。此外，PHA-P还增加了每个破骨细胞的平均细胞核数、标记的破骨细胞核数以及破骨细胞总数[1]。体内实验表明，PHA-P具有免疫刺激和环境依赖性免疫抑制的双重作用。在小鼠中，腹腔注射PHA-P可有效抑制H-2基因座的皮肤同种异体移植排斥反应，使移植存活率提高70-130%，且未观察到明显的死亡率或毒性。相反，在大鼠模型中，腹腔注射PHA-P（25和50 mg/kg；每日一次，持续15天）可减少纵向骨生长、软骨细胞计数和软骨板厚度，同时增加破骨细胞数量。在感染旋毛虫的小鼠中，感染前24小时静脉注射PHA-P（10 mg/kg）可刺激空肠黏膜细胞凋亡和肌肉炎症浸润，导致肌肉幼虫数量较感染对照组减少。体内实验表明，在雄性Sprague-Dawley大鼠中，腹腔注射植物血凝素-P（25和50 mg/kg，每日一次，持续15天）可减少纵向骨生长、软骨细胞计数、软骨板厚度以及每毫米骨表面的成骨细胞数量。重组 PHA-L 蛋白在 B16-F10 黑色素瘤 C57BL/6 小鼠模型中表现出良好的体内抗肿瘤活性，这是通过增强细胞凋亡和免疫调节实现的。
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| 酶活实验 |
作为一种凝集素，PHA-P 的作用机制是通过与碳水化合物结合，而非经典的酶/受体相互作用。标准血凝试验用于表征其结合活性：在 V 型底 96 孔板中，用磷酸盐缓冲液 (PBS) 配制 PHA-P 的倍比稀释液。向每个孔中加入等体积的 2% 洗涤人或动物红细胞悬液（通常为 O 型人红细胞）。轻轻混匀后，于室温孵育 1-2 小时。通过肉眼观察血凝情况，可见弥散的细胞凝集，凝集滴度定义为出现阳性凝集的最高稀释度。使用特定单糖（例如D-甘露糖、N-乙酰-D-半乳糖胺）的抑制试验可以确定碳水化合物结合特异性。植物血凝素的非细胞结合试验包括测量其凝集红细胞或与特定碳水化合物结合的能力。这些试验可以通过将植物血凝素与红细胞孵育并观察凝集反应来进行。碳水化合物结合特异性可以通过使用各种糖类（例如半乳糖、甘露糖或葡萄糖）的抑制试验来评估。
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| 细胞实验 |
细胞因子生成测定：将阳性选择的 CD8+ 蜕膜淋巴细胞重悬于完全培养基中，浓度为 1×10⁶ 个细胞/mL。取 100 µL 细胞悬液加入 96 孔圆底板中。加入等体积的浓度为 10 µg/mL 的 PHA-P 以刺激 CD8+ 蜕膜淋巴细胞。将培养板分别孵育 24 小时和 48 小时。孵育结束后，收集上清液，在微型离心机中以最高速度离心 2 分钟，获得无细胞上清液，并将其储存于 -70°C，用于后续的细胞因子分析。[1]
- 侵袭测定（对照）：将胎盘组织块接种于 Matrigel 包被的 8 µm 孔径滤膜上。在下室加入 200 µL 完全培养基。次日（第1天），将200 µL含有DMEM-F12培养基的PHA-P（10 µg/mL）加入对照孔的上室，确保绒毛外植体被覆盖。然后将培养板置于37°C、5% CO₂培养箱中培养7天。7天后，移除Matrigel和外植体，并清洁膜的上表面。将滤膜固定于10%中性缓冲福尔马林溶液中，进行苏木精-伊红染色，并进行封片。在100倍显微镜下计数整个滤膜下表面的细胞总数。PHA-P对照组和仅含培养基的对照组之间，侵袭的绒毛外滋养层细胞数量无显著差异。 [1] 典型的PHA-P刺激PBMC增殖实验方案采用Ficoll密度梯度离心法分离人外周血单核细胞。将细胞以2 × 10⁶ 个/mL的密度接种于24孔板中，培养基为完全培养基（DMEM或RPMI-1640，添加10%胎牛血清、1%青霉素-链霉素和谷氨酰胺）。加入PHA-P，使其终浓度为5–10 μg/mL。根据实验终点，将细胞在37°C、5% CO₂条件下培养24–72小时。增殖评估可在48–72小时后进行5-溴-2′-脱氧尿苷（BrdU）掺入实验，或使用MTT法或流式细胞术检测细胞活力。细胞因子分析中，收集培养上清液于24-48小时进行ELISA或多重检测。植物血凝素的体外细胞检测采用外周血单核细胞（PBMC）或T细胞系。细胞经PHA处理后，通过[³H]-胸苷掺入或使用CFSE等染料检测T细胞增殖。细胞因子（例如IL-2、IFN-γ）的产生通过ELISA检测。细胞凋亡的诱导通过检测Bax水平和其他凋亡标志物进行评估。 |
| 动物实验 |
一项具有代表性的体内研究采用小鼠同种异体移植排斥模型来评估植物血凝素（PHA-P）。雌性小鼠（例如C3H和C57BL/6品系）在皮肤移植前接受大剂量腹腔注射（ip）PHA-P（剂量范围根据研究报道为10-50 mg/kg），移植后每日进行小剂量腹腔注射。每日通过目测监测移植片存活情况，排斥反应定义为移植片完全坏死。在感染模型中进行免疫调节研究时，于病原体攻击前24小时静脉注射PHA-P（10 mg/kg）。终点指标包括流式细胞术（Annexin-V染色）分析淋巴细胞凋亡、组织学（TUNEL检测）和病原体载量定量。
已在大鼠和小鼠模型中开展了植物血凝素的体内动物实验。在雄性Sprague-Dawley大鼠中，使用PHA-P（25和50 mg/kg，腹腔注射，每日一次，连续15天）研究其对骨骼生长的影响。在B16-F10黑色素瘤C57BL/6小鼠模型中，评估了重组PHA-L的抗肿瘤活性。终点指标包括肿瘤生长抑制、免疫细胞活化和细胞凋亡标志物的评估。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
标准文献中关于植物血凝素-P (PHA-P) 的具体药代动力学数据有限。PHA-P 是一种高分子量糖蛋白（约 110–150 kDa），预计口服吸收不明显。经肠外途径（静脉或腹腔）给药后，由于其分子量和凝集素特性，PHA-P 可能主要分布于血管和淋巴组织。代谢途径被认为是蛋白水解，但已发表的药代动力学研究尚未系统地表征半衰期 (t₁/₂)、分布容积 (Vd) 和清除率 (CL) 等详细参数。植物血凝素的药代动力学特性在现有文献中也未得到充分描述。PHA 是一种糖蛋白，分子量范围为 121,000 至 132,000 Da。其蛋白质含量 ≥70%，促有丝分裂活性 ≤10 μg/mL。作为一种凝集素，PHA通常通过注射给药，用于体内研究。它以冻干粉末的形式供应，应在适当的条件下储存。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
PHA-P 具有中等毒性。急性毒性主要与其血凝活性有关，高剂量可导致红细胞聚集和微血管并发症。动物研究表明，大鼠腹腔注射剂量高达 50 mg/kg 时未见死亡，但对骨骼形态有显著影响。值得注意的是，在免疫抑制剂量下，PHA-P 在小鼠同种异体移植研究中被描述为“无明显毒性”。在人体中，临床应用（10-40 mg/天）可能引起短暂的过敏反应，罕见过敏性休克病例报道。口服含有 PHA 的未煮熟的红芸豆可引起食物中毒，其特征为恶心、呕吐和腹泻。植物血凝素的毒理学数据表明，高剂量可能产生不良反应。在雄性Sprague-Dawley大鼠中，PHA-P（25和50 mg/kg，腹腔注射，每日一次，连续15天）可降低骨骼生长和软骨细胞数量。作为一种强效促分裂原，PHA在高浓度下可引起T细胞过度活化和细胞因子释放。本品仅供研究使用，不得用于人体。
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| 参考文献 |
[1]. Effector activity of decidual CD8+ T lymphocytes in early human pregnancy. Biol Reprod. 2006;75(4):562-567.
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| 其他信息 |
- PHA-P以10 µg/mL的浓度作为刺激剂，诱导蜕膜CD8+ T淋巴细胞产生细胞因子，并作为滋养层细胞侵袭实验的对照。[1]
- 从PHA-P刺激的蜕膜CD8+ T淋巴细胞（48小时条件培养基）中获得的上清液用于评估对滋养层细胞侵袭的影响。与单独的PHA-P对照相比，这些上清液显著增加了外绒毛滋养层细胞通过Matrigel的侵袭能力（侵袭细胞的平均数量归一化为PHA-P对照：280 ± 61.3 vs. 100 ± 0，P = 0.006）。[1] 植物凝集素（PHA）是来源于普通菜豆的凝集素，能够结合T细胞膜并刺激代谢活性和细胞分裂。它们是强效的有丝分裂原，选择性刺激血源性或淋巴单核细胞来源的细胞。PHA通过增加促凋亡蛋白Bax诱导细胞凋亡。它在免疫学研究中广泛用于评估细胞和体液免疫。未获临床使用批准。 |
| CAS号 |
9008-97-3
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|---|---|
| 相关CAS号 |
Phytohemagglutinin;9008-97-3
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| PubChem CID |
596533
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| 外观&性状 |
Typically exists as White to light yellow solids at room temperature
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
25
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| 分子复杂度/Complexity |
419
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| 别名 |
PHA-P
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O :~10 mg/mL
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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