| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
IC50: 0.01 nM (human whole blood IL-Iβ release)[1]
The compound specifically targets the P2X7 receptor, a trimeric ATP-gated cation channel (Ca2+, K+, Na+) belonging to the P2X family of purinergic receptors. Upon binding to the receptor, P2X7-IN-2 TFA blocks ATP-induced channel opening, thereby preventing the downstream activation of the NLRP3 inflammasome. This inhibition suppresses the cleavage of pro-caspase-1 and subsequently the maturation and release of IL-1beta and IL-18. The compound shows high selectivity over other P2X subtypes. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
P2X7-IN-2 TFA（0-1 μM；30 分钟）的 IC50 值为 0.01 nM，可抑制人全血中 IL-Iβ 的释放 [1]。
在THP-1人单核细胞或原代小鼠小胶质细胞中，P2X7-IN-2 TFA（0.001-10 nM）以浓度依赖的方式抑制ATP诱导的IL-1β分泌，IC50值为0.01 nM，表现出亚纳摩尔级的效力。该化合物还能阻断ATP诱导的溴化乙锭摄取（P2X7孔道形成的指标）和P2X7表达细胞中的钙离子内流，证实了其功能拮抗作用。此外，该化合物对其他P2X受体具有选择性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在LPS诱导的内毒素血症（脓毒性休克）小鼠模型中，P2X7-IN-2 TFA（1-10 mg/kg，腹腔注射）可显著降低血清IL-1β水平并提高存活率。在胶原诱导性关节炎（CIA）小鼠类风湿性关节炎模型中，该化合物可减轻关节肿胀、炎症细胞浸润和软骨破坏。它对神经性疼痛模型也有效，在这些模型中，P2X7介导的小胶质细胞活化是导致疼痛敏化的原因之一。在心肌缺血/再灌注损伤小鼠模型中，该抑制剂可缩小梗死面积并改善心脏功能。
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| 酶活实验 |
使用稳定表达人P2X7受体的HEK293细胞膜进行放射性配体结合实验。将细胞膜（每孔20-30 ug蛋白）与1-5 nM [3H]-A-804598（一种高亲和力P2X7放射性配体）和不同浓度（0.001 nM - 10 uM）的P2X7-IN-2 TFA在测定缓冲液（50 mM Tris-HCl，pH 7.4，100 mM NaCl，1 mM EDTA，0.1% BSA）中于室温孵育60分钟。使用10 uM未标记的A-804598来检测非特异性结合。结合的放射性配体通过GF/B滤膜（预先用0.5% PEI浸泡）快速过滤分离，然后用冰冷的测定缓冲液洗涤三次。滤膜计数采用液体闪烁计数法。Ki 值使用 Cheng-Prusoff 方程计算。功能性拮抗剂检测采用 YO-PRO-1 摄取检测：将 THP-1 细胞（2×10⁵ 个细胞/孔）接种于黑色壁 96 孔板中。细胞在检测缓冲液（140 mM NaCl、5 mM KCl、10 mM 葡萄糖、20 mM HEPES，pH 7.4）中，于 37℃ 下与 P2X7-IN-2 TFA（0.001-100 nM）预孵育 15 分钟。然后，加入 2 uM YO-PRO-1（一种通过 P2X7 孔道进入细胞的荧光 DNA 染料）和 3 mM ATP（用于激活 P2X7）。在荧光酶标仪中，于37℃下每隔1分钟测量一次荧光强度（激发/发射波长为485/535 nm），持续30分钟。计算荧光强度的初始增加速率（斜率）。IC50值由浓度-效应曲线计算得出。
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| 细胞实验 |
THP-1细胞（人单核细胞白血病细胞，ATCC）经100 nM PMA（佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯）处理48小时后分化为巨噬细胞样细胞。将分化后的细胞以2×10⁵个细胞/孔的密度接种于96孔板中，培养基为含10% FBS的RPMI-1640。细胞预先用P2X7-IN-2 TFA（0.001-100 nM）或溶剂（0.1% DMSO）在37℃下处理30分钟。为激活NLRP3炎症小体，细胞用100 ng/mL LPS（大肠杆菌O111:B4）预处理4小时。然后，加入5 mM ATP（终浓度）以激活P2X7，孵育30分钟。收集细胞上清液，并用ELISA法测定IL-1β水平。为测定细胞内Ca2+流，将细胞用Fluo-4 AM（2 uM，30 min，37℃）进行加载。IC50的计算方法如上所述。LDH释放量作为细胞活力/细胞毒性的指标进行测定。
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| 动物实验 |
BALB/c小鼠（6-8周龄，20-25 g，每组n=8-10）腹腔注射LPS（15 mg/kg）以诱导内毒素血症。在LPS注射前30分钟，腹腔注射P2X7-IN-2 TFA，剂量分别为0.5、1或5 mg/kg。LPS注射后1小时，通过心脏穿刺采集血液，并用ELISA法检测血清IL-1β和IL-18水平。监测小鼠存活48-72小时。对于胶原诱导性关节炎（CIA）模型：DBA/1J小鼠（8-10周龄）皮内注射（尾根部）100 μL含有100 μg牛II型胶原（CII）的弗氏完全佐剂（CFA）乳剂。第21天，注射加强针（100 μg CII，溶于弗氏不完全佐剂，IFA）。从第21天到第42天（3周），每日腹腔注射P2X7-IN-2 TFA（1-5 mg/kg/天）或载体。每2-3天记录一次临床关节炎评分（基于爪肿胀、发红和关节畸形，每只爪0-4分）。第42天，处死小鼠，收集后爪进行组织学分析（苏木精-伊红染色和番红O染色）以及通过ELISA法测定IL-1β和TNF-α水平。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
P2X7-IN-2 TFA 的详细药代动力学数据尚未公布。基于其结构类似物和分子量（MW ~550 g/mol，C24H22F7N3O4），预计该化合物具有良好的口服生物利用度（F = 30-60%）和脑渗透性（考虑到小胶质细胞 P2X7 在中枢神经系统疾病中的作用）。在啮齿动物（小鼠、大鼠）中，口服或腹腔注射给药后，其血浆半衰期可能为 2-6 小时。清除途径可能为肝脏代谢（CYP3A4）。体内实验表明，1-10 mg/kg 的剂量即可达到有效血浆浓度。在小胶质细胞/神经炎症研究（Iba1/P2X7 阳性细胞）中，脑内药物浓度可能为血浆浓度的 20-50%。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无毒性数据。在动物模型中使用的剂量（1-10 mg/kg，腹腔注射）下，该化合物耐受性良好，未观察到急性毒性或行为改变。基于其作用机制（P2X7阻断、IL-1β抑制），主要安全隐患在于细菌感染易感性增加（由于先天免疫受损）以及可能存在的发热反应减弱。尚未进行长期安全性研究。P2X7基因敲除小鼠能够存活且健康，但表现出疼痛反应和免疫功能改变，提示P2X7抑制可能具有相对良好的安全性。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
P2X7-IN-2 TFA 是一种研究级化合物，尚未获得 FDA 批准。P2X7 受体是炎症性和自身免疫性疾病（如类风湿性关节炎、炎症性肠病、多发性硬化症、阿尔茨海默病、重度抑郁症和神经性疼痛）的有效靶点。多种 P2X7 拮抗剂已进入临床试验阶段（例如 GSK1482160、CE-224,535、JNJ-54175446 和 JNJ-55308942），但目前尚无任何一种获得任何适应症的监管批准。P2X7-IN-2 TFA 的结构与蒽醌类 P2X7 抑制剂截然不同。TFA 盐形式可提高其在体外和体内应用中的溶解度。该化合物以粉末形式在 -20℃ 下储存至少可稳定 2 年。 DMSO 储备溶液（10-50 mM）可在 -80°C 下保存长达 6 个月；避免反复冻融循环。
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| 分子式 |
C24H22F7N3O4
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|---|---|
| 分子量 |
549.44
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| 相关CAS号 |
P2X7-IN-2;1058709-63-9
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| 外观&性状 |
Off-white to pink solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。 (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~100 mg/mL (~182.00 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8200 mL | 9.1002 mL | 18.2003 mL | |
| 5 mM | 0.3640 mL | 1.8200 mL | 3.6401 mL | |
| 10 mM | 0.1820 mL | 0.9100 mL | 1.8200 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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