| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
OVA G4 peptide TFA targets the H-2Kb MHC class I molecule on antigen-presenting cells. After being loaded onto H-2Kb, the peptide-MHC complex is recognized by the T cell receptor (TCR) on ovalbumin-specific CD8+ T cells (OT-I T cells). This recognition triggers T cell activation, proliferation, and effector functions, including cytokine production and cytotoxic activity. The G4 variant may alter TCR recognition affinity compared to the native SIINFEKL sequence, making it useful for studying TCR-peptide-MHC interactions. This peptide is a fundamental tool for studying T cell biology, vaccine development, and immune responses.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明,母肽SIINFEKL是OT-I T细胞的强效激活剂。在0.01-10 nM的浓度范围内,SIINFEKL可诱导T细胞增殖、IFN-γ产生和颗粒酶B表达。G4肽变体(SIIGFEKL)可能具有相似但可能改变的免疫原性。在T细胞激活实验中,将该肽(1-100 nM)与OT-I CD8+ T细胞和表达H-2Kb的抗原呈递细胞(APC)或负载该肽的T2-Kb细胞孵育。通过CD69上调、增殖(CFSE稀释法)或细胞因子释放(IFN-γ ELISA)来检测激活情况。该肽的活性对于免疫学检测至关重要。SIINFEKL可用于测试新型疫苗佐剂和评估稳定的水凝胶制剂。
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| 体内研究 (In Vivo) |
OVA G4肽TFA的体内活性尚未得到详细阐述,但其母肽SIINFEKL已广泛应用于小鼠免疫模型。在C57BL/6小鼠中,静脉或皮下注射SIINFEKL肽(10-100 ug)联合佐剂(例如CpG、poly I:C或弗氏完全佐剂CFA)可诱导强烈的抗原特异性CD8+ T细胞应答。此外,也可将肽脉冲树突状细胞过继转移至小鼠体内以启动T细胞应答。G4变体也可用于研究体内抗原呈递和T细胞活化。它还可用于测试疫苗佐剂或递送系统(例如水凝胶)的稳定性。
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| 酶活实验 |
OVA肽不用于无细胞酶活性测定。对于受体结合测定,基于T2-Kb细胞的测定方法用于测量肽-MHC结合亲和力。T2-Kb细胞(表达H-2Kb)缺乏TAP转运蛋白,因此需要外源性肽加载。将T2-Kb细胞与不同浓度的OVA G4肽TFA(0.1 nM至100 uM)和1 ug/mL人β2-微球蛋白在37℃的无血清培养基中孵育4小时。洗涤细胞后,用针对肽加载的H-2Kb构象的特异性抗体(例如,25-D1.16单克隆抗体)进行染色,然后进行流式细胞术分析。绘制平均荧光强度(MFI)与肽浓度的关系图,并确定EC50值。该检测比较了 G4 变体与天然 SIINFEKL 肽的结合亲和力。
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| 细胞实验 |
在T细胞活化实验中,CD8+ T细胞从OT-I转基因小鼠(表达针对SIINFEKL/H-2Kb的TCR)中分离。使用磁珠富集OT-I小鼠脾细胞中的CD8+ T细胞。在增殖实验中,CD8+ T细胞用CFSE(5 uM,10分钟,37℃)标记,并与经2000 rad照射的C57BL/6小鼠脾细胞(作为抗原呈递细胞)以1:1的比例在96孔板中共培养。加入OVA G4肽TFA(0.001-100 nM),细胞培养72小时。使用流式细胞术通过CFSE稀释法检测增殖情况。为检测细胞因子生成,收集24-48小时的上清液,并用ELISA法分析IFN-γ、IL-2和TNF-α的含量。为进行细胞毒性试验,用肽(10 nM)激活OT-I T细胞5天。然后将激活的T细胞与用肽(10 nM)脉冲处理的51Cr标记的EL4靶细胞以不同的效应细胞与靶细胞比例进行共培养。4小时后测量51Cr的释放量以确定特异性裂解。
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| 动物实验 |
C57BL/6小鼠(6-8周龄,雌性)用于体内免疫研究。将OVA G4肽TFA(每只小鼠10-100 μg)乳化于弗氏完全佐剂(CFA)中,或与其他佐剂(例如50 μg CpG ODN)混合,皮下或腹腔注射至小鼠体内。对照组仅注射佐剂或SIINFEKL肽。免疫后7-14天,收集脾脏。在体外,用肽(10 μg/mL)和GolgiPlug(布雷菲德菌素A)刺激脾细胞5-6小时。进行IFN-γ和TNF-α的细胞内细胞因子染色,随后进行流式细胞术分析。或者,可以进行体内细胞毒性试验:将靶脾细胞用高浓度(2.5 μM)或低浓度(0.25 μM)CFSE标记,用肽(10 μM)脉冲处理,然后过继转移到免疫小鼠体内。16小时后,通过流式细胞术分析脾脏中高浓度CFSE标记细胞与低浓度CFSE标记细胞的比例,以计算特异性杀伤率。对于疫苗佐剂研究,单独注射肽或肽+佐剂,并通过测量注射部位抗原的持久性来评估佐剂形成稳定水凝胶或药物储存库的能力。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
TFA盐形式的分子式为C40H59N8O13(源自肽组分)。冻干粉末应储存在-20℃,防潮,在此温度下可稳定保存长达3年。溶液储存时,应置于密封防潮小瓶中,于-80℃保存6个月,或于-20℃保存1个月。该化合物可溶于DMSO(通常浓度为20-30 mg/mL)和水(5-10 mg/mL)。TFA反离子约占总质量的10-20%。为防止降解,应避免反复冻融和长时间储存在溶液中。培养基中的工作溶液应在24-48小时内使用。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
本产品仅供研究使用,不可用于人体治疗。目前尚无该肽的具体毒性数据。在T细胞活化试验所用浓度(0.1-100 nM)下,该肽无毒。TFA反离子在高浓度(培养物中>0.1%)下可能具有细胞毒性,但在标准试验中可安全稀释。应遵循标准实验室安全操作规程。该肽的免疫原性可能因小鼠品系而异(C57BL/6小鼠为H-2b型,对SIINFEKL有反应;BALB/c小鼠为H-2d型,通常无反应)。意外接触可能导致已致敏个体产生免疫反应。避免吸入粉末。该化合物并非FDA批准的药物。
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| 参考文献 |
[1]. François P, et al. Phenotypic model for early T-cell activation displaying sensitivity, specificity, and antagonism. Proc Natl Acad Sci U S A. 2013 Mar 5;110(10):E888-97.
[2]. Kamalov M,et al. Ovalbumin Epitope SIINFEKL Self-Assembles into a Supramolecular Hydrogel. Sci Rep. 2019 Feb 25;9(1):2696. |
| 其他信息 |
OVA (257-264) SIINFEKL 肽是免疫学中研究最为广泛的 MHC I 类限制性表位之一。它已成为研究 CD8+ T 细胞应答、抗原交叉呈递和疫苗开发的金标准工具。G4 变体 (SIIGFEKL) 包含一个甘氨酸插入或取代,可改变 MHC 结合和 TCR 识别动力学,使其可用于研究 T 细胞活化的结构要求。该肽用于测试新型疫苗佐剂、评估基于纳米颗粒的疫苗递送系统以及研究 T 细胞耐受性、耗竭和记忆形成。TFA 盐是标准研究形式。本产品并非临床药物。请勿包含供应商信息。
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| 分子式 |
C45H72F3N9O14
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| 相关CAS号 |
OVA G4 peptide;148274-82-2
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O :~6.67 mg/mL (~6.54 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。