| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
N-terminally acetylated Endomorphin-1 targets the micro-opioid receptor (MOR), a G protein-coupled receptor (GPCR) that is the primary target of endogenous endorphins and clinically used opioid analgesics (e.g., morphine). Endomorphin-1 (Tyr-Pro-Trp-Phe-NH2) is one of the most selective endogenous MOR agonists known. Acetylation of the N-terminal amino group (the tyrosine residue) is a common post-translational modification that can dramatically affect receptor binding and activation. The N-terminal Tyr is critical for opioid receptor recognition and signaling. Acetylation may reduce or abolish binding affinity, convert the peptide from an agonist to an antagonist, or affect its selectivity profile. This modified peptide is used to investigate the contribution of the free N-terminal amine to MOR engagement.
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| 体外研究 (In Vitro) |
与母体内啡肽-1相比，N端乙酰化的内啡肽-1的体外活性预计会显著降低。内啡肽-1是一种高亲和力u阿片受体（MOR）激动剂，对MOR的Ki值约为0.4-3 nM，对δ阿片受体（DOR）和κ阿片受体（KOR）的Ki值大于40-1000 nM，表现出高选择性（>100倍）。在功能性检测（例如[3⁵S]GTPγS结合）中，内啡肽-1刺激G蛋白活化，EC50值约为2-10 nM。已知N端酪氨酸的乙酰化会使内啡肽-1与u阿片受体的结合亲和力降低50-1000倍，具体降低幅度取决于修饰类型。乙酰化类似物可能作为弱的部分激动剂或拮抗剂发挥作用。该化合物可用于评估 Tyr1 的游离 NH3+ 基团是否对高亲和力结合至关重要。
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| 体内研究 (In Vivo) |
采用无细胞[3⁵S]GTPγS结合试验来测定微阿片受体的激活。制备表达人微阿片受体（CHOhMOR）的CHO细胞膜。试验缓冲液包含50 mM Tris-HCl（pH 7.4）、5 mM MgCl2、100 mM NaCl、1 mM DTT和0.1% BSA。将膜（10-20 ug/孔）与0.1 nM [3⁵S]GTPγS、10 uM GDP和不同浓度的N端乙酰化内啡肽-1（0.01-1000 nM）在25℃下孵育60分钟。用10 uM未标记的GTPγS测定非特异性结合。反应通过快速过滤GF/B滤膜终止，随后用冰冷的洗涤缓冲液洗涤三次。滤膜干燥后计数。计算刺激[3⁵S]GTPγS结合的EC50值。以母体内啡肽-1作为阳性对照。乙酰化类似物应使浓度-反应曲线右移或最大反应降低（部分激动作用）。测定化合物的pEC50值（若观察到拮抗作用，则测定pIC50值）。
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| 酶活实验 |
对于受体结合研究，使用相同的膜进行竞争性结合实验。将膜（10-20 ug/孔）与 0.5-1 nM [3H]-DAMGO（一种选择性 MOR 激动剂）和不同浓度的未标记 N 端乙酰化的内啡肽-1（0.1 nM-10 uM）在结合缓冲液中于 25℃ 孵育 60-90 分钟。使用 10 uM 纳洛酮测定非特异性结合。通过快速过滤分离结合的放射性配体，并使用 Cheng-Prusoff 方程计算 Ki 值。预计乙酰化类似物的 Ki 值在微摩尔范围内（而母体化合物的 Ki 值为 0.4-3 nM）。可以通过测量对标准 MOR 激动剂（例如 DAMGO 或内啡肽-1）诱导的 [3⁵S]GTPγS 结合的抑制作用来评估功能性拮抗作用。这种修饰肽是构效关系研究的有用工具。
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| 细胞实验 |
细胞实验中，使用稳定表达微阿片受体的CHO或HEK293细胞。对于cAMP抑制实验（MOR激活的功能性指标），将细胞接种于96孔板中，并用0.5 mM IBMX（磷酸二酯酶抑制剂）预孵育10分钟。随后，用N端乙酰化的内啡肽-1（0.1-10,000 nM）处理细胞10分钟，再用福斯克林（1-5 uM）处理15-30分钟。使用竞争性ELISA或HTRF检测试剂盒测定福斯克林刺激的cAMP水平，并计算抑制cAMP积累的EC50值。在拮抗剂测定中，细胞先与乙酰化类似物（0.1-10 uM）预孵育10分钟，然后用亚最大浓度的DAMGO（例如10 nM）和福斯克林刺激。测定该类似物阻断DAMGO诱导的cAMP抑制的能力，并计算拮抗作用的IC50值。在钙动员测定中（如果细胞也共表达嵌合G蛋白），细胞用Fluo-4 AM标记，然后按上述方法加入类似物。然而，对于MOR而言，主要检测指标是cAMP抑制，而非钙离子浓度。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
冻干粉末应储存在密封容器中，置于-20℃（最长3年），并防潮。溶液储存方面，DMSO储备液（1-10 mM）应在-80℃下保存最长6个月，在-20℃下保存最长1个月。该化合物可溶于DMSO（10-20 mg/mL）。体外实验中，工作液需用实验缓冲液（含0.1% BSA以防止非特异性结合）稀释。本产品未明确标明TFA盐形式（许多肽的标准形式），但该化合物可能以TFA盐或乙酸盐的形式提供。C端酰胺基团存在（非游离酸）。本产品仅供研究使用。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
本产品仅供研究使用，不可用于人体治疗。目前尚无该修饰肽的具体毒性数据。内啡肽-1类似物在细胞培养中浓度高达10 μM时通常耐受性良好。三氟乙酸（TFA）反离子（如有）在高浓度（>0.1%）下可能具有细胞毒性，但在阿片受体测定中使用的稀释度下（最终TFA浓度<<0.01%），这并非问题。应遵循标准实验室安全操作规程（佩戴手套、实验服和护目镜）。避免吸入粉末。该化合物并非FDA批准的药物，仅供研究用途。
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| 其他信息 |
内啡肽-1 (Tyr-Pro-Trp-Phe-NH2) 和内啡肽-2 (Tyr-Pro-Phe-Phe-NH2) 是 1997 年发现的内源性阿片肽。它们是对微阿片受体选择性最高的内源性激动剂。N 端酪氨酸残基对阿片受体结合至关重要，游离的 NH3+ 基团与 MOR 第三跨膜结构域中的 Asp147 形成关键的静电相互作用。该基团的乙酰化会降低或消除结合，使其成为内啡肽信号传导研究中有用的阴性对照。该化合物也称为 Ac-Tyr-Pro-Trp-Phe-NH2。本产品并非药物，仅供研究使用。不得包含供应商信息。
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| 分子式 |
C36H40N6O6
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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