| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Norleual TFA targets the c-Met receptor tyrosine kinase, also known as the hepatocyte growth factor receptor (HGFR). It acts as a potent antagonist, blocking the binding of its natural ligand, HGF, to the extracellular domain of c-Met. This interaction prevents receptor dimerization and autophosphorylation of key tyrosine residues (primarily Y1230, Y1234, Y1235 in the activation loop), which are essential for the full activation of its intrinsic kinase activity. Consequently, the compound disrupts the recruitment and phosphorylation of downstream adaptor proteins, including Gab1 and Grb2. In addition to its primary target, Norleual TFA also acts as an antagonist at the AT4 receptor, which is known to be identical to the insulin-regulated aminopeptidase (IRAP), contributing to its multi-faceted biological activities.
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| 体外研究 (In Vitro) |
正三氟乙酸（20 和 50 pM）显著降低了依赖于 HGF 的 Gab1 和 c-Met 的磷酸化水平。在 HEK293 细胞中，20 pM 的正三氟乙酸显著减弱了 HGF 启动的 Gab1 和 c-Met 之间的相互作用。正三氟乙酸显著降低了依赖于 HGF 的 c-Met 激活及其下游信号通路 [1]。在 MDCK 细胞中，皮摩尔浓度的正三氟乙酸（1 pM-1 μM；4 天）抑制了多种细胞类型中依赖于 HGF 的信号通路、增殖、迁移和侵袭 [1]。
体外实验表明，Norleual TFA（20 和 50 pM）能显著降低 HGF 依赖的 Gab1 和 c-Met 磷酸化水平。在 HEK293 细胞中，该化合物能有效抑制 HGF 诱导的 Gab1 与 c-Met 之间的相互作用，从而阻断信号转导所需的关键信号复合物的形成。此外，在 MDCK 细胞中，Norleual TFA（1 pM 至 1 uM，作用 4 天）能有效抑制 HGF 依赖的信号传导、细胞增殖、细胞迁移和侵袭。这表明该化合物能够在皮摩尔浓度下抑制多种癌细胞行为特征，凸显了其作为 c-Met 和 HGF 通路研究化学探针的卓越效力。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在 B16-F10 小鼠的肺部，正常 TFA（50 μg/kg；腹腔注射；每天一次，持续两周；C57BL/6 小鼠）可阻止黑色素瘤细胞定植[1]。
利用B16-F10黑色素瘤肺部定植模型进行的体内研究证实了Norleual TFA的治疗潜力。C57BL/6小鼠接受腹腔注射Norleual TFA治疗，剂量为50 ug/kg，每日一次，持续两周。结果显示，治疗组小鼠肺部黑色素瘤细胞的定植显著减少。这种抗转移作用直接源于其强大的抗血管生成活性，因为血管生成是转移性肿瘤形成和生长的关键过程。Norleual TFA通过抑制c-Met信号通路及其对血管生成的下游效应，有效降低了癌细胞在远处器官形成转移灶的能力。 |
| 酶活实验 |
可进行无细胞结合和功能分析以评估Norleual TFA的亲和力和活性。一种常用的方法是c-Met激酶抑制分析。将纯化的活性重组c-Met激酶（1-5 ng）与不同浓度的Norleual TFA（0.1 pM至100 nM）在激酶缓冲液（50 mM HEPES，pH 7.5，10 mM MgCl2，2 mM MnCl2，1 mM DTT，0.01% Brij-35）中于室温孵育30分钟。加入肽底物（例如，源自c-Met结合位点的生物素化肽，100 uM）和ATP（1-10 uM）启动反应。在30℃下孵育1小时后，用EDTA终止反应。然后，使用特异性抗磷酸酪氨酸抗体和化学发光检测系统（例如 HTRF 或 AlphaScreen），在 96 孔链霉亲和素包被板上检测磷酸化产物。该装置可用于计算诺鲁胺作为直接 c-Met 抑制剂的 IC50 值。
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| 细胞实验 |
检测 c-Met 抑制的标准细胞实验包括处理 HGF 反应性细胞系，例如 MDCK 或 A549 肺癌细胞。将细胞接种于 6 孔板中，并在无血清培养基中过夜培养。然后，用不同浓度的正三氟乙酸 (Norleual TFA，1 pM - 1 uM) 预孵育 1 小时。随后，用重组 HGF (50 ng/mL) 刺激细胞 10-15 分钟。刺激后，裂解细胞并校正蛋白浓度。使用针对磷酸化 c-Met (Y1234/1235) 和总 c-Met 的特异性抗体，通过蛋白质印迹法评估 c-Met 活性。使用针对磷酸化 Gab1、Akt 和 ERK1/2 的特异性抗体评估下游信号通路。最后，使用化学发光检测系统显色。该方案也用于评估 c-Met/HGF 相互作用及其下游信号通路。其他功能性检测，例如抑制HGF诱导的细胞分散，可在MDCK细胞中进行。将细胞接种于24孔板中，使其形成克隆。然后用Norleual和HGF处理细胞，并通过显微镜观察和定量分析紧密克隆分解成分散的单个细胞的情况。
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| 动物实验 |
B16-F10小鼠黑色素瘤模型是研究转移的经典系统。在体内研究中，将2×10⁵个B16-F10黑色素瘤细胞经尾静脉注射到6-8周龄的C57BL/6小鼠体内（第0天）。从第1天开始，小鼠每天腹腔注射一次Norleual TFA（50 μg/kg）或溶剂对照，持续14天。每2-3天监测一次体重，作为毒性的一般指标。第14天，处死小鼠，取出肺脏，用PBS缓冲液清洗并称重。在解剖显微镜下计数肺表面转移结节。组织病理学分析方面，肺脏可固定于Bouin氏液或福尔马林中，石蜡包埋，切片进行H&E染色，以确认转移细胞的存在。该模型提供了抗转移疗效的定量读数。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
诺利尔TFA（分子量：888.97 g/mol）冻干粉应储存于-20℃，避光防潮，可稳定保存长达3年。体内给药时，工作液需每日新鲜配制。常用配方为DMSO：Tween 80：生理盐水=10:5:85的混合物。典型的给药溶液配制方法为：首先用DMSO配制浓缩储备液（例如1 mg/mL），然后用Tween 80和生理盐水稀释至所需最终浓度（例如50 μg/kg）。该化合物在水中的溶解度也大于50 mg/mL。作为一种肽类似物，诺利尔在体内的血浆半衰期极短（可能小于5分钟），这使其成为急性机制研究的理想选择，但慢性疗效研究需要每日重复给药。TFA盐形式用于提高水溶性和化学稳定性。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
本产品仅供研究使用，不可用于人体。目前尚无针对TFA盐形式的特定毒性数据。然而，与所有高效信号转导抑制剂一样，应谨慎操作。主要潜在危害与TFA反离子有关，高浓度（>0.1%）时可能对细胞产生毒性。在50 μg/kg的测试剂量下进行的动物研究中，文献报道未发现明显的毒性迹象或体重显著变化。处理该化合物时，必须遵守一般实验室安全防护措施，包括佩戴手套、实验服和护目镜。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
正三氟乙酸 (Norleual TFA) 是一种极具价值的研究工具，可用于研究 c-Met/HGF 信号通路在癌症生物学中的作用。c-Met 通路在多种癌症中经常发生异常调控，导致肿瘤生长、血管生成和转移。该化合物能够以皮摩尔级的效力有效阻断该通路，使其成为靶点验证和表型筛选的有效探针。目前，该化合物尚未获得美国食品药品监督管理局 (FDA) 的临床批准。正三氟乙酸是 UAMC1110 的衍生物，UAMC1110 是一种已知的高效选择性 FAP 抑制剂，这凸显了其化学骨架的多功能性。三氟乙酸盐是一种常用的合成抗衡离子，用于改善小分子抑制剂和肽的理化性质，以用于研究应用。
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| 分子式 |
C43H59F3N8O9
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|---|---|
| 分子量 |
888.97
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| 相关CAS号 |
Norleual;334994-34-2
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O :≥ 50 mg/mL (~56.24 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.1249 mL | 5.6245 mL | 11.2490 mL | |
| 5 mM | 0.2250 mL | 1.1249 mL | 2.2498 mL | |
| 10 mM | 0.1125 mL | 0.5624 mL | 1.1249 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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