Nicotinic acid mononucleotide triethylamine

目录号: V76697 纯度: ≥98%
在NAD+的生物合成中,烟酸单核苷酸三乙胺由烟酸(NA)通过烟酸磷酸核糖基转移酶形成。
Nicotinic acid mononucleotide triethylamine 产品类别: Others 13
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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  • 烟酸单核苷酸
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产品描述
在 NAD+ 的生物合成过程中,烟酸磷酸核糖转移酶催化烟酸 (NA) 生成烟酸单核苷酸三乙胺。烟酸单核苷酸三乙胺是烟酰胺单核苷酸/烟酸单核苷酸腺苷酰转移酶的底物。
烟酸单核苷酸三乙胺是烟酸(尼克酸)经普雷斯-汉德勒途径合成烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NAD+) 的关键核苷酸中间体。本研究级产品以三乙胺 (TEA) 盐的形式提供,以提高其在生化和代谢研究中的溶解度和稳定性。烟酸单核苷酸 (NAMN) 是一种重要的代谢物,是 NAD+ 生成的直接前体。NAD+ 是一种重要的辅酶,参与多种细胞过程,包括氧化还原反应、DNA 修复和细胞信号传导。它是研究 NAD+ 代谢、细胞能量学和年龄相关代谢紊乱的宝贵工具。
生物活性&实验参考方法
靶点
In the NAD+ biosynthesis pathway, nicotinic acid mononucleotide triethylamine is the product of the first committed step of the Preiss-Handler pathway. It is formed from nicotinic acid (NA) by the enzyme Nicotinic Acid Phosphoribosyltransferase (NAPRT). Following its formation, NAMN is then adenylylated by Nicotinamide Mononucleotide Adenylyltransferase (NMNAT) to form Nicotinic Acid Adenine Dinucleotide (NAAD). NAAD is subsequently amidated by NAD+ Synthase to produce the final product, NAD+. By providing this intermediate, the compound allows researchers to bypass upstream enzymatic steps in the pathway and specifically study the activity of downstream enzymes like NMNAT. As a substrate for these enzymes, it is a critical tool for metabolic pathway dissection.
体外研究 (In Vitro)
烟酸单核苷酸三乙胺的体外活性取决于其作为NMNAT底物的作用。在体外酶活性测定中,它用于测量NMNAT酶的动力学参数。NMNAT将NAMN转化为NAAD的过程与比色或荧光读数相结合。作为NAD+合成的构建模块,它也可用于细胞培养,以提高表达NAPRT的细胞中NAD+的水平。在细胞培养中,向培养基中添加烟酸(NA)会导致该中间体的生成;然而,直接添加这种带电荷的单核苷酸可能无法有效穿透细胞膜。三乙胺盐主要用作无细胞或生化测定标准品,用于定量生物样品中的NAMN水平。
体内研究 (In Vivo)
烟酸单核苷酸 (NAMN) 的体内效应主要源于其在 Preiss-Handler 通路中作为 NAD+ 前体的作用。由于其带电荷,通常不直接给动物服用,但补充烟酸(维生素 B3)可提高该通路的通量,从而提升 NAD+ 水平。研究表明,NAD+ 水平升高能够激活 sirtuins 蛋白,改善线粒体功能,并在动物模型中起到保护作用,预防代谢性疾病。三乙胺盐主要用作分析标准品,通过液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS) 定量分析组织提取物、血浆和尿液中的 NAMN 水平。这对于理解各种疾病状态下 NAD+ 补救途径的代谢通量至关重要。
酶活实验
无细胞酶活性测定用于表征烟酸单核苷酸三乙胺作为底物。NMNAT 活性测定:在 96 孔板中加入反应混合物,其中包含 50 mM Tris-HCl(pH 7.5)、10 mM MgCl2、1 mM DTT 和浓度范围为 0 至 500 uM 的底物(烟酸单核苷酸)。加入重组 NMNAT1-3 酶(例如,10 ng/孔)和 ATP(1-5 mM)启动反应。将反应板在 37℃ 下孵育 30-60 分钟。可以使用偶联酶法实时监测酶活性,或者使用 EDTA 终止反应并使用 NAD/NAAD 检测试剂盒进行检测。或者,也可以使用高效液相色谱法 (HPLC) 或液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS) 对产物 (NAAD) 进行定量,方法是将峰面积与已知浓度的 NAMN TEA 盐生成的标准曲线进行比较。这样就可以计算 NMNAT 酶的 Km 和 Vmax 值。
细胞实验
细胞或组织样本中的NAMN水平可通过LC-MS/MS进行定量。典型的实验步骤如下:将细胞(例如HEK293细胞或原代肝细胞)接种于6孔板中,并用烟酸(NA,10-1000 uM)处理24-48小时。吸出培养基,用冰冷的PBS缓冲液洗涤细胞。加入500 uL冰冷的80%甲醇/20%水(v/v)溶液(含内标物,例如¹3C-NAMN)提取代谢物。刮取细胞,转移至微量离心管中,并在-80℃下孵育10分钟。将裂解液在4℃下以15,000 rpm离心10分钟,并将上清液转移至新的离心管中,使用SpeedVac真空离心浓缩仪干燥。将干燥提取物用合适的液相色谱-质谱联用流动相复溶。将复溶后的样品注入到与三重四极杆质谱仪联用的C18反相色谱柱中,质谱仪可在正离子或负离子模式下运行。通过比较峰面积比(分析物/内标)与由已知量的烟酸单核苷酸三乙胺标准品生成的校准曲线,确定NAMN的浓度。
动物实验
典型的体内实验方案包括给予烟酸 (NA) 作为前体,随后检测 NAMN(本化合物)作为生物标志物。成年 C57BL/6 小鼠通过灌胃或腹腔注射给予烟酸(50-200 mg/kg)。在不同时间点(0、0.5、1、2、4、6、8、12 和 24 小时)通过眼眶后静脉或尾静脉采血。血浆经离心分离后储存于 -80℃。同时采集肝组织并立即液氮速冻。采用甲醇提取法从血浆 (100 μL) 或组织 (50 mg) 中提取代谢物。提取的样品通过液相色谱-串联质谱 (LC-MS/MS) 分析 NAMN 的含量。NAMN 的 TEA 盐用作一级标准品,用于生成校准曲线并验证质谱方法的特异性。这些数据用于计算 NA 向下游代谢物转化的 PK 参数。
药代性质 (ADME/PK)
烟酸单核苷酸三乙胺盐(分子式:C17H29N2O9P,分子量:436.4 g/mol)是一种稳定的研究级化合物。应以粉末形式储存于-20℃,并防潮,在此条件下可稳定保存长达3年。三乙胺反离子用于提高这种高极性单核苷酸的水溶性。它可溶于水和二甲基亚砜(DMSO)。本品不适用于体内治疗。作为一种天然代谢物,由于其快速被细胞摄取并进一步被NMNAT酶代谢,预计其在循环中的半衰期非常短。它主要用作高质量的分析标准品和体外生化实验的底物。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
本产品为研究用试剂,不可食用。由于它是NAD+生物合成途径中的中间体,而NAD+是生命必需的物质,因此在研究剂量下未发现其具有直接毒性。然而,用于复溶的溶剂或载体(DMSO、甲醇)可能具有毒性。应遵循标准的实验室安全操作规程。本产品不适用TFA盐形式;本产品为三乙胺(TEA)盐,通常认为其毒性低于TFA。主要潜在危害是TEA成分,高浓度下可能具有刺激性,但其含量为化学计量比。该化合物仅供研究使用,其危害通常仅限于处理细粉的物理危害(吸入、眼睛接触)。
参考文献

[1]. Nicotinamide adenine dinucleotide metabolism as an attractive target for drug discovery. Expert Opin Ther Targets. 2007 May;11(5):695-705.

[2]. Targeting NAD+ metabolism in the human malaria parasite Plasmodium falciparum. PLoS One. 2014 Apr 18;9(4):e94061.

其他信息
该化合物是代谢组学和生物化学研究的重要工具。Preiss-Handler 途径是哺乳动物体内 NAD+ 合成的三条途径之一(另外两条分别是色氨酸从头合成途径和烟酰胺补救途径)。它是将膳食烟酸(维生素 B3)转化为 NAD+ 的主要途径。烟酸单核苷酸 (NAMN) 是 Preiss-Handler 途径活性的特异性可定量生物标志物。研究人员使用该化合物作为标准,以了解代谢性疾病、衰老或药物治疗如何影响 NAD+ 的稳态。三乙胺盐形式是一种常用的合成抗衡离子,用于提高核苷酸中间体的溶解度和操作性,以用于研究应用。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C11H14NO9P.1.7C6H15N
相关CAS号
Nicotinic acid mononucleotide;321-02-8
外观&性状
Off-white to light yellow solid powder
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O :~125 mg/mL (~372.91 mM)
DMSO :~100 mg/mL (~298.33 mM )
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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