NH2-KLGADTDGEQDQHMTYGGQ-COOH

目录号: V76702 纯度: ≥98%
NH2-KLGADTDGEQDQHMTYGGQ-COOH 是一种合成肽链,其羧基连接到谷氨酰胺,胺基连接到赖氨酸。
NH2-KLGADTDGEQDQHMTYGGQ-COOH 产品类别: Peptides | 多肽
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
NH2-KLGADTDGEQDQHMTYGGQ-COOH 是一种合成肽链,其中羧基连接在谷氨酰胺上,氨基连接在赖氨酸上。
NH2-KLGADTDGEQDQHMTYGGQ-COOH 是一种合成的、研究级的、具有明确序列的肽。它以三氟乙酸盐的形式存在,以提高其溶解度和稳定性。该序列对应于人胸腺基质淋巴细胞生成素 (TSLP) 的第 37-55 位氨基酸残基,TSLP 是一种关键的上皮来源细胞因子,可触发炎症反应。它通过促进树突状细胞的活化和初始 CD4+ T 细胞分化为 Th2 细胞,在哮喘、特应性皮炎和其他过敏性疾病中作为 2 型炎症反应的关键启动因子发挥作用。该肽可作为研究 TSLP-受体相互作用、理解其结构-功能关系以及开发潜在抑制剂的研究工具。其分子量为 2051.11 g/mol,分子式为 C83H127N25O34S。
生物活性&实验参考方法
靶点
The primary biological target of this peptide is the Thymic Stromal Lymphopoietin Receptor (TSLPR). The full-length TSLP cytokine binds to a heterodimeric receptor complex composed of the TSLP receptor (TSLPR) chain and the interleukin-7 receptor alpha (IL-7Ralpha) chain. This peptide is a fragment of the TSLP ligand, specifically derived from its N-terminal region. It may function as an antagonist or a partial agonist by binding to the TSLP receptor, thereby blocking the interaction with the full-length active TSLP cytokine. Blocking this interaction would inhibit the downstream activation of STAT5 and JAK signaling pathways, which are central to the development of Th2-mediated allergic inflammation. It serves as a tool to explore the molecular mechanism of TSLP binding and activation.
体外研究 (In Vitro)
搜索结果中未找到该特定肽段的体外活性数据。然而,由于它是TSLP蛋白的一个片段,其活性可能与其与TSLP受体的相互作用能力有关。在构效关系(SAR)研究中,研究人员会使用该肽段进行结合实验,以确定其与TSLP受体复合物的亲和力(Kd值)与全长细胞因子相比的差异。作为片段,其结合亲和力可能低于母体分子(全长TSLP,其Kd值在低纳摩尔范围内)。预计该肽段本身不具有显著的直接细胞毒性或免疫调节活性,而是作为一种竞争性结合剂发挥作用。
体内研究 (In Vivo)
目前尚无该肽的具体体内数据。TSLP 的体内作用机制已基本明确。在过敏性哮喘动物模型(例如,卵清蛋白 (OVA) 或屋尘螨 (HDM) 致敏小鼠)中,给予 TSLP 中和抗体可降低气道高反应性、嗜酸性粒细胞增多和 Th2 细胞因子水平。相反,肺部 TSLP 过表达会诱发哮喘样症状。该肽可能通过与 TSLP 受体结合并阻断内源性 TSLP 的活性,在体内用作诱饵受体拮抗剂。其体内疗效和半衰期尚需确定,但由于其肽链较小(20 个氨基酸),其血浆半衰期可能较短,需要持续输注或重复给药。它是一种研究工具,而非药物。
酶活实验
利用表面等离子共振 (SPR) 技术可以进行无细胞结合分析。TSLP 受体复合物(TSLPR/IL-7Rα 异二聚体)固定在传感器芯片上。NH2-KLGADTDGEQDQHMTYGGQ-COOH 肽溶解于运行缓冲液(例如,含 0.005% Tween-20 的 PBS,pH 7.4)中。以恒定流速将肽的系列稀释液(0.1-1000 uM)注入芯片表面。监测结合和解离过程。将所得传感器图拟合到 1:1 结合模型,以确定动力学参数(ka、kd)和平衡解离常数 (KD)。该肽可用于竞争性 SPR 实验,将其与全长 TSLP 同时注入,以确定其是否与全长 TSLP 竞争受体上的同一结合位点。
细胞实验
可利用对TSLP有反应的细胞系进行基于细胞的功能分析。一种标准分析方法使用稳定转染了人TSLP受体复合物(TSLPR和IL-7Rα)的Ba/F3细胞系。细胞在含有IL-3的培养基中培养。分析前,用培养基洗涤细胞三次以去除IL-3,然后饥饿培养4小时。将1×10⁵个细胞接种于96孔板中。随后,在有或无不同浓度的测试肽(0.01-100 uM)的情况下,用全长重组人TSLP(10 ng/mL)刺激细胞。在37℃刺激20分钟后,加入冰冷的PBS终止反应并离心。裂解细胞沉淀,并使用磷酸化STAT5 ELISA试剂盒检测STAT5磷酸化水平(pSTAT5)。肽的存在导致pSTAT5信号降低,表明该肽作为拮抗剂,阻断了TSLP介导的激活。在没有TSLP的情况下,该肽本身不应诱导pSTAT5的表达。
动物实验
研究TSLP功能的常用体内模型是BALB/c小鼠(雌性,6-8周龄)的卵清蛋白(OVA)诱导的过敏性气道炎症模型。小鼠于第0天和第7天通过腹腔注射10 μg OVA(溶于氢氧化铝佐剂)进行致敏。从第14天到第20天,每天用1% OVA(溶于PBS)气雾剂对小鼠进行30分钟的激发。在每次OVA激发前1小时,经鼻给予TSLP肽(或对照肽)(例如,50 μg TSLP肽溶于50 μL生理盐水中)。第21天,处死小鼠,通过气管插管并用1 mL PBS冲洗肺部收集支气管肺泡灌洗液(BALF)。对支气管肺泡灌洗液 (BALF) 进行总细胞计数,并在 Diff-Quik 染色后的细胞涂片上进行细胞分类计数(嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞)。采用 ELISA 法检测 BALF 中 Th2 细胞因子(IL-4、IL-5、IL-13)的水平。采集肺组织进行组织学检查(H&E 染色和 PAS 染色),以评估气道炎症和黏液分泌情况。该模型可用于评估该肽阻断 TSLP 驱动的过敏性炎症的能力。
药代性质 (ADME/PK)
该肽以三氟乙酸盐(TFA盐)形式供应,分子量为2051.11 g/mol,纯度通常>96%。冻干粉末应储存于-20℃,避光保存,在此温度下可稳定保存长达3年。溶液储存方面,建议在-80℃下保存长达6个月,或在-20℃下保存长达1个月。该肽可溶于水(25 mg/mL,12.19 mM),建议超声处理以促进溶解。由于其高分子量和肽的特性,该肽在血清中易受蛋白水解酶降解,并会迅速被肾脏清除。使用三氟乙酸盐形式是为了改善其理化性质,以满足研究需求。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
本产品仅供研究使用,不可用于人体治疗。目前尚无该肽的具体毒性数据。盐形式中存在的三氟乙酸 (TFA) 反离子在高浓度(通常 >0.1%)下可能对细胞具有细胞毒性,但在肽测定的标准工作浓度下,这通常不是问题。处理该化合物时,应遵循标准的实验室安全操作规程,包括使用个人防护装备 (PPE),例如手套和护目镜。动物研究表明,类似肽在研究剂量下毒性极低,但这可能因生物活性而异。
其他信息
该肽段是全长人TSLP蛋白的片段,由159个氨基酸组成。TSLP通过异二聚体受体复合物,经由JAK/STAT5通路启动2型免疫应答。该肽段(氨基酸残基37-55)位于TSLP的预测受体结合域内。它被用作表位定位、结构-功能分析以及开发基于肽的过敏性疾病抑制剂或疫苗的研究工具。它并非药物,也未获得FDA批准。一些供应商还提供该化合物的反向序列形式(NH2-QGGYTMHQDQEGDTDAGLK-COOH),其序列基本相同,但从C端到N端书写(与给定产品相反)。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C83H127N25O34S
分子量
2051.11
外观&性状
White to off-white solid powder
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.4875 mL 2.4377 mL 4.8754 mL
5 mM 0.0975 mL 0.4875 mL 0.9751 mL
10 mM 0.0488 mL 0.2438 mL 0.4875 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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