| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
NK2 receptor[1]
The primary target of Neurokinin A(4-10) TFA is the tachykinin NK2 receptor, a G protein-coupled receptor (GPCR). It acts as a potent and selective NK2 receptor agonist. The C-terminal amidated methionine is critical for high-affinity binding and full agonistic activity. Structure-activity relationship (SAR) studies using this fragment have defined the essential amino acid residues for receptor affinity and efficacy. The NK2 receptor is primarily responsible for mediating the contractile effects of tachykinins in smooth muscle tissues, especially in the gastrointestinal tract, urinary bladder, and respiratory tract. Upon binding, NK2 activates the Gq/11 signaling pathway, leading to an increase in intracellular calcium (Ca2+), which in turn activates myosin light chain kinase (MLCK) and results in smooth muscle contraction. The peptide is selective for NK2 over NK1 and NK3 receptors. It is a potent spasmogen of the human colon circular muscle. A high density of NK2 receptors has been demonstrated in human colon circular muscle using in vitro autoradiography. NKA(4-10) shows its effects exclusively via NK2 receptors. The C-terminal amide is essential for receptor binding and activity. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
神经激肽A (NKA) 及其短链对应物NKA(4-10) 是强效致痉剂，仅作用于人结肠环形肌中的速激肽NK2受体。为了确定氨基酸残基对NK2受体在人结肠环形肌中的效力、效价和亲和力的影响，我们对神经激肽A (NKA) 片段NKA(4-10) 进行了构效关系研究。放射性配体结合和体外放射自显影实验表明，该组织中NK2受体密度很高[1]。
体外研究已证实神经激肽A(4-10) TFA具有高效性和选择性。在离体人结肠环形肌条中，全长NKA和截短的NKA(4-10)均为强效致痉剂，EC50值通常在低纳摩尔范围内。其收缩作用可被选择性NK2受体拮抗剂（例如SR 48968）完全阻断，证实其作用完全由NK2受体介导。在这些组织中，NK1或NK3选择性激动剂均未观察到收缩反应。该肽已被广泛用于构效关系研究，以绘制NK2受体的结合口袋。NKA(4-10)序列中的各种氨基酸替换已被用于确定哪些残基对高亲和力结合至关重要，以及哪些残基负责受体激活。该片段是完全激动剂，对人结肠平滑肌具有高效的致痉剂作用。 EC50 值在低纳摩尔范围内（<10 nM）。该效应完全通过 NK2 受体介导。无细胞毒性作用。TFA 盐的比活性与游离碱相同。高纯度确保受体结合和功能测定结果的可重复性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
搜索结果中没有关于该TFA盐的具体体内数据。然而，NK2受体激动剂的体内药理学特性已得到充分阐明。在啮齿动物体内全身给药NKA或NKA(4-10)可诱发多种效应，包括低血压（由于血管舒张）、支气管收缩和肠道蠕动增强。它对膀胱具有强烈的收缩作用。NK2受体的体内作用主要位于外周而非中枢神经系统。在哮喘动物模型中，雾化NKA可诱发支气管收缩，这可用于筛选NK2拮抗剂类支气管扩张剂。在膀胱过度活动症模型中，NK2激动剂可增强膀胱收缩力。该肽是体内和体外实验的标准药理学工具。它常用于表征新型NK2受体拮抗剂在体内的选择性，本身并不用作治疗药物。TFA盐性质稳定，经适当配制后适用于体内注射。由于降解迅速，该肽在血浆中的半衰期很短（数分钟）。其体内效应呈剂量依赖性（通常静脉注射剂量为1-100 ug/kg）。它是一种强效且选择性的NK2受体激动剂。
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| 酶活实验 |
采用无细胞结合实验测定NKA(4-10)TFA与人NK2受体的亲和力(Ki)。从稳定表达人NK2受体的CHO-K1细胞中制备细胞膜。实验缓冲液为50 mM HEPES（pH 7.4）、5 mM MgCl2、1 mM CaCl2、0.5% BSA和40 ug/mL杆菌肽（用于防止肽降解）。将10 ug膜蛋白与0.1 nM放射性配体[3H]-SR 48968（一种选择性NK2拮抗剂）或[¹2⁵I]-NKA以及不同浓度的未标记神经激肽A(4-10)TFA（1 pM至100 uM）在200 uL总体积中孵育。将混合物在 25°C 下孵育 60 分钟。在 1 uM 未标记的 NKA 存在下测定非特异性结合。反应通过预先用 0.3% PEI 浸泡的 GF/B 滤膜快速过滤终止。滤膜用冰冷的洗涤缓冲液（50 mM HEPES，pH 7.4，0.5% BSA）洗涤三次。滤膜干燥后，计数残留的放射性。NKA(4-10) 在 NK2 受体上的 Ki 值通常在低纳摩尔范围内（例如，0.1-1 nM）。IC50 由竞争曲线计算，Ki 值使用 Cheng-Prusoff 方程确定。NKA(4-10) 对 NK2 的选择性高于 NK1 和 NK3（Ki > 1 uM）。该结合实验证实了其高亲和力。该配体是一种强效的竞争性激动剂。
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| 细胞实验 |
NK2受体激活的功能性细胞检测方法是测量细胞内钙动员。将稳定表达人NK2受体的CHO-K1细胞以每孔30,000个细胞的密度接种于96孔黑色壁透明底板中，并使其贴壁24小时。然后，将细胞置于含2 uM Fluo-4 AM和0.02% Pluronic F-127的HBSS缓冲液（含Ca2+和Mg2+）中，于37℃孵育60分钟，随后在室温下进行30分钟的脱酯化处理。之后，将培养板置于荧光酶标仪（例如FlexStation 3）中。测量基线荧光强度20秒（激发波长494 nm，发射波长516 nm）。随后加入浓度递增的神经激肽A(4-10) TFA（从0.001 nM到10 uM），并持续监测荧光120秒。计算峰值荧光强度（峰值减去基线），并将其归一化至饱和浓度全长NKA（1 uM）诱导的最大反应。根据浓度-反应曲线确定NKA(4-10)的EC50值。钙动员的典型EC50值在低纳摩尔范围内。该实验表明NKA(4-10)是一种完全激动剂，这意味着它可以达到与母体NKA相同的最大反应。该功能性实验用于筛选NK2受体拮抗剂：在加入NKA(4-10)之前，将拮抗剂预孵育15分钟。 NKA(4-10) 也用于分离的平滑肌条（例如，人结肠环形肌）的组织浴槽实验。将组织置于器官浴槽中，并累积加入肽（1 nM-10 uM）。记录收缩力（克张力）。这种离体实验是 NK2 功能的经典功能性生物测定方法。
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| 动物实验 |
用于研究人结肠组织中NK2受体功能的离体实验方案是标准方案。从手术切除的结肠组织中获取人结肠环形肌条（宽约2-3 mm，长约10-15 mm）（已获得伦理批准）。将肌条置于装有5-10 mL含氧（95% O2，5% CO2）Krebs-Henseleit缓冲液的器官浴槽中，温度保持在37℃。肌条在1-2 g的初始张力下放置60分钟以达到平衡，每15分钟更换一次缓冲液。平衡后，用高钾（KCl，60 mM）溶液刺激肌条，以确定组织的最大收缩反应。洗涤并重新平衡后，绘制神经激肽A(4-10) TFA（1 nM至10 μM）的累积浓度-反应曲线。每种浓度持续作用2-5分钟，并使用连接至数据采集系统的力位移传感器记录产生的峰值等长张力。计算收缩的EC50值。为验证受体选择性，在累积添加NKA(4-10)前15分钟，向浴槽中加入NK2拮抗剂SR 48968 (1 μM)。浓度-反应曲线右移且最大反应值未降低表明存在竞争性拮抗作用。该方案证明了NKA(4-10)的高效性（低nM EC50）及其NK2介导的作用。收缩效应迅速且可逆。NKA(4-10)是目前已知对人类结肠最有效的致痉剂之一。该离体模型用于药物发现，以筛选治疗胃肠道疾病的新型NK2拮抗剂。该肽是一种高效且选择性的NK2受体激动剂，可用于绘制NK2受体分布图。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
神经激肽A(4-10) TFA的分子式为C36H55F3N8O12S，分子量为880.93 g/mol。其序列为Asp-Ser-Phe-Val-Gly-Leu-Met-NH2 (DSFVGLM-NH2)，C端带有酰胺基团。冻干粉末应储存在-20℃的密封容器中，并防潮，在此条件下可稳定保存长达3年。溶液储存时，应在-80℃下保存长达6个月，或在-20℃下保存长达1个月。该产品水溶性低（<0.1 mg/mL）。因此，进行体外实验时，需先用DMSO配制储备液（例如，10 mg/mL）。用于体内注射时，采用 DMSO:PEG300:Tween80:生理盐水 (10:40:5:45) 的配制方法制备澄清溶液。三氟乙酸盐用于提高溶解度和稳定性。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
该肽是一种强效且选择性的NK2受体激动剂。其母体化合物是神经激肽A (NKA)，一种由10个氨基酸组成的肽。NK2受体属于G蛋白偶联受体(GPCR)。C端酰胺基团对其活性至关重要。该肽是人结肠环形肌的强效致痉挛剂，可用于筛选NK2受体拮抗剂。该化合物仅供研究使用。应遵循标准安全预防措施。三氟乙酸(TFA)含量可能对某些细胞类型造成影响。该肽纯度高(>95%)，被认为是受体药理学研究的有力工具。NK2受体是哮喘、肠易激综合征(IBS)和膀胱过度活动症的靶点。该肽可用于研究受体-配体相互作用。NKA(4-10)的构效关系(SAR)确定了结合和激活的关键残基。该肽是一种完全激动剂，可产生与全长肽相同的最大反应。TFA盐用于提高溶解度和稳定性。该化合物是一种激动剂，对NK2受体具有选择性结合。人结肠环形肌中NK2受体密度很高。其收缩EC50值在低纳摩尔范围内。该化合物是激动剂，而非拮抗剂。
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| 分子式 |
C36H55F3N8O12S
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| 分子量 |
880.93
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| 相关CAS号 |
Neurokinin A(4-10);97559-35-8
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O :< 0.1 mg/mL
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.1352 mL | 5.6758 mL | 11.3516 mL | |
| 5 mM | 0.2270 mL | 1.1352 mL | 2.2703 mL | |
| 10 mM | 0.1135 mL | 0.5676 mL | 1.1352 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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