| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
M2e, human TFA targets the immune system, specifically inducing antibodies that bind to the extracellular domain of the influenza A virus M2 ion channel protein expressed on the surface of infected cells, leading to antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC).
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| 体外研究 (In Vitro) |
M2e(人源TFA)是一种有效且用途广泛的候选疫苗,可对抗包括季节性流感和流行性流感在内的多种甲型流感病毒株。作为一种合成肽,当与佐剂适当配制时,它可以诱导交叉保护性免疫反应。
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| 体内研究 (In Vivo) |
体内动物研究表明,基于M2e的疫苗能够诱导针对异源甲型流感病毒攻击的保护性免疫反应。当与适当的佐剂一起经鼻内或肠外途径给药时,M2e可诱导产生抗体,从而降低病毒载量并预防发病和死亡。
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| 酶活实验 |
通常进行M2e肽的非细胞结合试验以评估其免疫原性或检测抗M2e抗体。对于检测抗M2e抗体的ELISA,将96孔板用1-5 ug/mL的M2e肽和人TFA溶于PBS中包被,并在4℃下孵育过夜。室温下用3% BSA或5%脱脂奶粉封闭2小时,然后用含0.05% Tween-20的PBS-T洗涤。将系列稀释的血清样本(来自免疫动物)加入孔中,孵育2小时。洗涤后,加入HRP标记的抗小鼠(或抗人)IgG,随后加入TMB底物。用H2SO4终止反应,并在450 nm处测量吸光度。对于肽-MHC结合试验,可采用计算方法或使用纯化的MHC II类分子进行体外复性试验。或者,可以使用 M2e 特异性单克隆抗体进行表面等离子共振 (SPR) 来确定结合亲和力。
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| 细胞实验 |
M2e 和人 TFA 的细胞学检测采用从 M2e 免疫小鼠或人体内分离的原代免疫细胞(脾细胞、外周血单核细胞)。对于 T 细胞记忆反应,将 5×10⁵ 个脾细胞接种于 96 孔板中,并用 1-50 ug/mL 的 M2e 或人 TFA 刺激 48-72 小时。收集细胞培养上清液,并通过 ELISA 检测细胞因子(IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-10)的产生。对于 T 细胞增殖,在 M2e 刺激前用 CFSE(5 uM)标记细胞,并在 72-96 小时通过流式细胞术分析增殖情况(CFSE 稀释)。对于 B 细胞 ELISpot 检测,将 96 孔 PVDF 板包被抗小鼠 Ig 捕获抗体,然后加入脾细胞和 M2e 肽。 16-24小时后,使用HRP标记的检测抗体和AEC底物检测抗体分泌细胞,并使用自动ELISpot读板仪计数斑点。对于细胞内细胞因子染色(ICS),将细胞用M2e肽和布雷菲德菌素A刺激4-6小时,固定和透化后,进行表面标志物(CD4、CD8)和细胞内细胞因子(IFN-γ、TNF-α、IL-2)染色,然后进行流式细胞术分析。
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| 动物实验 |
在体内免疫研究中,6-8周龄的雌性BALB/c或C57BL/6小鼠接受M2e(一种人源TFA)免疫,该TFA与佐剂(例如弗氏佐剂、明矾或更先进的佐剂,如CpG ODN或AddaVax)配制而成。小鼠每次接受10-50 μg的M2e肽,可通过腹腔注射、皮下注射或鼻内给药,通常间隔2-4周,分2-3次给药。在基线和每次免疫后10-14天,通过眼眶后静脉丛取血,并通过ELISA检测血清抗体滴度。在攻毒试验中,末次免疫后4-6周,小鼠用异氟烷麻醉,经鼻内感染致死剂量(例如1-10×LD50)的甲型流感病毒(例如H1N1、H3N2或禽流感H5N1)。每日监测小鼠体重和存活率,持续14-21天。感染后3-7天,处死小鼠以测定病毒载量。将肺组织在PBS中匀浆,离心澄清,然后使用MDCK细胞进行噬斑试验或通过流感M基因的定量RT-PCR (qRT-PCR)测定病毒滴度。同时,将肺组织样本固定、切片,并用苏木精-伊红(H&E)染色,用于炎症和肺损伤的组织病理学分析。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
作为一种基于肽的免疫原,人TFA M2e(分子量约为2738.83 Da)并非传统药物,其药代动力学特性尚未得到充分研究。当与佐剂联合使用时,该肽会在注射部位停留数天至数周(药物储存效应),具体时间取决于佐剂配方。注射部位的抗原呈递细胞(树突状细胞、巨噬细胞)通过吞噬作用和巨胞饮作用摄取该肽。内化后,M2e经加工处理,并通过MHC II类分子呈递给CD4+ T细胞,并通过MHC I类分子交叉呈递给CD8+ T细胞。TFA盐形式可提高制剂的溶解度。完整肽的全身吸收极少。由于其免疫原作用机制,消除半衰期并不重要。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
由于M2e(人源TFA)是一种研究性肽,因此其具体的毒性数据有限。在使用M2e肽和佐剂进行动物免疫研究中,毒性主要取决于佐剂而非肽本身。在典型的免疫剂量(每只小鼠10-50微克)下,M2e肽通常耐受性良好,未观察到明显的全身毒性迹象。局部注射部位反应(轻微肿胀、发红)可能由佐剂成分引起。由于该化合物仍处于研究阶段,因此尚无长期安全性研究数据。高剂量下,TFA反离子可能引起刺激。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
M2e(基质蛋白2胞外结构域)在人类甲型流感病毒株中高度保守,因此是开发“通用”流感疫苗的关键靶点,该疫苗无需每年重新配制即可提供针对多种毒株的保护。M2e(人源三氟乙酸盐)被用作此类疫苗研发的研究工具。其作用机制是诱导产生与感染细胞上的M2蛋白结合的抗体,从而通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒性作用(ADCC)清除病毒。该肽尚未获得用于人体的监管批准,但已在临床前和早期临床试验中得到广泛研究。三氟乙酸盐形式可提高其溶解度和稳定性,使其更适合研究用途。
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| 分子式 |
C109H171F3N32O43S2
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| 分子量 |
2738.83
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| 相关CAS号 |
M2e, human;251359-24-7
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~100 mg/mL (~36.51 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.3651 mL | 1.8256 mL | 3.6512 mL | |
| 5 mM | 0.0730 mL | 0.3651 mL | 0.7302 mL | |
| 10 mM | 0.0365 mL | 0.1826 mL | 0.3651 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。