| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
p300 50-500 nM (IC50)
Lys-CoA TFA targets the p300 histone acetyltransferase (HAT), an enzyme that acetylates lysine residues on histones and non-histone proteins, thereby regulating gene expression. It also inhibits PCAF (p300/CBP-associated factor) with much lower affinity. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在人类正常黑素细胞中，Lys-CoA TFA（0.1 和 1 mM；60 小时）促进衰老表型[3]。
Lys-CoA TFA 是一种高选择性的 p300 HAT 抑制剂，IC50 值为 50-500 nM。它对 p300 的选择性比 PCAF（IC50 = 200 uM）高 100 倍以上。Lys-CoA TFA 能有效抑制依赖于 p300 HAT 活性的转录激活。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
体内实验表明，Lys-CoA TFA能够抑制细胞和动物模型中p300介导的转录激活。它可以抑制由p300驱动的基因表达程序，包括参与细胞增殖、分化和炎症的基因表达程序。
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| 酶活实验 |
使用纯化的重组p300 HAT结构域进行Lys-CoA TFA的非细胞结合和活性测定。标准的HAT测定方法测量乙酰基从[3H]-乙酰辅酶A或[14C]-乙酰辅酶A转移到组蛋白底物或肽上的情况。反应混合物包含50 mM Tris-HCl（pH 8.0）、0.1 mM EDTA、10%甘油、1 mM DTT、100 uM [3H]-乙酰辅酶A（比活度2-4 Ci/mmol）、10-50 uM组蛋白H3或生物素标记的肽底物（例如H3(1-21)）以及不同浓度的Lys-CoA TFA（0.1 nM至100 uM）。反应通过加入纯化的p300 HAT蛋白（5-50 ng）启动，并在30℃下孵育30-60分钟。反应通过将反应混合物点样至P81磷酸纤维素滤纸片或链霉亲和素包被的滤板（用于生物素化肽）上终止。滤膜用10 mM磷酸钠缓冲液（pH 7.0）或50 mM碳酸氢钠缓冲液（pH 9.2）洗涤3-5次，以去除未结合的[3H]-乙酰辅酶A。干燥后，将滤膜置于闪烁瓶中，加入闪烁液，并使用液体闪烁计数器测量放射性。IC50值由剂量-反应曲线计算得出。为了进行动力学分析，在不同的乙酰辅酶A浓度（0.1-200 uM）下进行反应，以确定抑制模式。为了进行选择性测定，该化合物将与其他 HAT（包括 PCAF、GCN5 和 Tip60）进行测试。
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| 细胞实验 |
细胞增殖测定[3]
细胞类型： 正常人黑素细胞 测试浓度： 0.1 和 1 mM 孵育时间： 60 小时 实验结果： 几乎完全抑制细胞增殖，诱导高水平的 SA-β-Gal，并以剂量依赖的方式抑制细胞周期蛋白 E 的表达。 对于细胞实验，将细胞系（例如 HeLa、HEK293、U2OS 或癌细胞）以 50-70% 的汇合度接种于 6 孔板或 96 孔板中。向培养基中加入浓度为 1-50 uM 的 Lys-CoA TFA，培养 12-72 小时。DMSO 浓度应保持在 0.1-0.5% 以下，以避免细胞毒性。对于组蛋白乙酰化分析，收集细胞，用 RIPA 裂解缓冲液（含蛋白酶抑制剂和丁酸钠，一种去乙酰化酶抑制剂）裂解细胞，并使用酸提取法（0.2N HCl）提取组蛋白。提取的组蛋白（10-20 ug）经SDS-PAGE（15%凝胶）分离后，转移至PVDF膜，并用乙酰化H3K9（Ac-H3K9）或乙酰化H3K18（Ac-H3K18）特异性抗体进行免疫印迹。总H3或H4用作上样对照。基因表达分析方面，使用TRIzol提取总RNA，进行逆转录，并对p300靶基因（例如p21、MYC、Cyclin D1）进行qRT-PCR检测。细胞活力检测方面，细胞用Lys-CoA TFA（1-100 uM）处理48-72小时，并用MTT或CellTiter-Glo法检测细胞活力。细胞凋亡检测方面，进行Annexin V-FITC/PI染色和流式细胞术分析。对于细胞周期分析，将固定的细胞用碘化丙啶染色，并通过流式细胞仪进行分析。 |
| 动物实验 |
在体内研究中，Lys-CoA TFA 已被用于小鼠癌症、纤维化和炎症模型。对于肿瘤异种移植模型，将 5×10⁶ 个癌细胞（例如 HCT116、MDA-MB-231 或 A549 细胞）皮下植入 6-8 周龄的雌性裸鼠体内。当肿瘤体积达到 100-200 mm³ 时，将小鼠随机分为治疗组（每组 n=8-10）。Lys-CoA TFA 以 10-50 mg/kg 的剂量腹腔注射给药，通常每日一次或隔日一次，持续 2-4 周。每 2-3 天使用游标卡尺测量肿瘤体积（V = 长 × 宽² × 0.5）。监测体重变化以评估毒性反应。研究结束时，切除肿瘤，称重，并进行免疫组织化学（IHC）处理，检测 Ki-67（增殖）、裂解型 caspase-3（凋亡）和乙酰化组蛋白（Ac-H3K9、Ac-H3K18）。采集血液进行血清生化（ALT、AST、BUN）和血液学分析。在药代动力学研究中，通过腹腔注射（IP）或静脉注射（IV）给小鼠给予 Lys-CoA TFA（10-20 mg/kg）。分别于给药后 0、0.25、0.5、1、2、4、6、8、12 和 24 小时采集血样。分离血浆，并用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定 Lys-CoA TFA 的浓度。采用非房室模型分析计算药代动力学参数（Tmax、Cmax、AUC、t½、CL、Vd）。该化合物作为研究用化学品提供，详细的药代动力学参数可能不会公布。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
Lys-CoA TFA（分子量约1108.82 Da，TFA盐）是一种细胞可渗透的CoA偶联双底物抑制剂，可模拟HAT催化反应的过渡态。该分子含有一个与CoA连接的赖氨酸，使其能够同时占据乙酰辅酶A结合口袋和肽底物结合位点，从而具有高亲和力和选择性。TFA盐可提高其溶解度。由于其较大的极性CoA部分（分子量约770 Da），该化合物的膜渗透性有限。因此，与纯化酶测定（IC50 50-500 nM）相比，细胞测定通常需要更高的浓度（10-50 μM）。由于CoA偶联物代谢和清除迅速，预计其在小鼠体内的血浆半衰期较短（数分钟至<2小时）。分布容积有限（Vd ~0.2-0.5 L/kg），提示其主要分布于血管和细胞外间隙。由于分子大小和极性，口服生物利用度较差。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
赖氨酸辅酶A三氟乙酸（Lys-CoA TFA）的主要毒性与其抑制p300酶的机制有关。p300酶参与细胞生长和存活，因此长期抑制可导致细胞毒性，尤其是在快速分裂的细胞中。在细胞培养中，Lys-CoA TFA表现出浓度依赖性的细胞毒性，在多种癌细胞系中，其IC50值约为20-50 μM（72小时暴露）。动物研究表明，10-20 mg/kg（腹腔注射）的剂量通常耐受性良好。较高剂量（50-100 mg/kg）时，由于正常组织中p300酶的抑制，可能出现体重减轻、活动减少和胃肠道不适等毒性症状。目前尚未发表正式的LD50或慢性毒性研究。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Lys-CoA TFA 是一种用于研究 p300 HAT 在基因调控、癌症、炎症和发育中作用的研究工具。其作用机制是与乙酰辅酶A竞争结合位点，从而阻断 p300 的活性位点。该化合物在证明 p300 HAT 活性对于许多转录因子（例如 p53、NF-κB、HIF-1α 和 STAT3）的活性至关重要。尽管该化合物已在体外和体内用作化学探针，但尚未获得临床应用的监管批准。
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| 分子式 |
C33H54F3N10O21P3S
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|---|---|
| 分子量 |
1108.82
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O :~70 mg/mL (~63.13 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.9019 mL | 4.5093 mL | 9.0186 mL | |
| 5 mM | 0.1804 mL | 0.9019 mL | 1.8037 mL | |
| 10 mM | 0.0902 mL | 0.4509 mL | 0.9019 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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