| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Lonodelestat TFA targets human neutrophil elastase (hNE), a serine protease released by activated neutrophils. NE plays a crucial role in host defense but also contributes to tissue damage and inflammation in chronic lung diseases.
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| 体外研究 (In Vitro) |
Lonodelestat TFA 是一种强效且选择性的人中性粒细胞弹性蛋白酶 (hNE) 肽抑制剂。作为一种蛋白表位模拟物 (PEM)，它能与 NE 的活性位点结合，从而阻断其蛋白水解活性。该药物设计用于口服或气雾剂给药。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在HNE处理的小鼠中，隆诺地司他（POL6014）显著有效地降低了急性肺损伤（ALI）的炎症反应[1]。隆诺地司他（POL6014，0.1、0.5、2和10 mg/kg，鼻内给药）可显著且呈剂量依赖性地降低支气管肺泡灌洗液（BAL）中巨噬细胞、上皮细胞、中性粒细胞和淋巴细胞的数量。在2 mg/kg剂量下，中性粒细胞减少了65%（p<0.001），上皮细胞减少了68%（p<0.001），巨噬细胞减少了33%（p<0.001），淋巴细胞减少了77%（p<0.001），这是抑制效果最显著的剂量[1]。
在HNE处理的小鼠中，洛诺地司他显著有效地降低了急性肺损伤（ALI）的炎症反应。支气管肺泡灌洗液（BAL）中回收的巨噬细胞、上皮细胞、中性粒细胞和淋巴细胞的数量均显著且呈剂量依赖性降低。在2 mg/kg剂量下，中性粒细胞减少了65%（p<0.001），上皮细胞减少了68%（p<0.001），巨噬细胞减少了33%（p<0.001），淋巴细胞减少了77%（p<0.001），这是抑制作用最强的剂量。 |
| 酶活实验 |
使用纯化的人中性粒细胞弹性蛋白酶 (hNE) 进行洛诺地司他 TFA 的非细胞酶活性测定。通常使用荧光肽底物（例如 MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC）。测定缓冲液由 50 mM Tris-HCl (pH 7.5)、150 mM NaCl 和 0.01% Tween-20 组成。在 96 孔板中制备洛诺地司他 TFA 的系列稀释液（0.001-1000 nM）。向每个孔中加入荧光底物，使其最终浓度为 50-200 uM。加入 0.5-5 nM 纯化的 hNE 启动反应。在荧光酶标仪中，于 37℃ 下，监测 5-30 分钟内荧光强度（激发波长 380 nm，发射波长 460 nm）的动态变化。计算初始速度 (v0)。IC50 值由剂量反应曲线（log[抑制剂] 与活性百分比）确定。为测定 Ki 值，在有/无固定浓度洛诺地司他的情况下，于不同底物浓度 (10-500 uM) 下进行测定。动力学数据拟合米氏方程。为进行选择性测定，使用特异性荧光底物，测试洛诺地司他与其他丝氨酸蛋白酶（例如，组织蛋白酶 G、蛋白酶 III、胰蛋白酶、糜蛋白酶）的抑制活性。
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| 细胞实验 |
使用从外周血中分离的人中性粒细胞进行lonodelestat TFA的细胞活性测定。中性粒细胞通过密度梯度离心（Ficoll-Paque）分离，随后进行葡聚糖沉降。将分离的中性粒细胞（1×10⁶个细胞/mL）与浓度为0.1-1000 nM的lonodelestat TFA在37℃下预孵育15-30分钟。加入佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯（PMA，1 uM）或趋化肽fMLF（1 uM）以及细胞松弛素B（5 ug/mL）可刺激中性粒细胞释放弹性蛋白酶。30-60分钟后，离心沉淀细胞，收集上清液。通过加入荧光底物（如上所述）并监测荧光来测定上清液中的中性粒细胞弹性蛋白酶活性。或者，可以使用显色底物（例如，MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-pNA），并在 405 nm 处测量对硝基苯胺 (pNA) 的释放。抑制率的计算以溶剂对照组为基准。在细胞毒性试验中，将中性粒细胞用洛诺地司他 (0.1-10 uM) 处理 4-24 小时，并使用台盼蓝排除法或基于发光的检测方法 (CellTiter-Glo) 评估细胞活力。
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| 动物实验 |
已在小鼠肺部炎症模型中开展了体内动物研究。对于急性肺损伤（ALI）模型，将6-8周龄的C57BL/6小鼠经气管内注射人中性粒细胞弹性蛋白酶（hNE）（0.5-2 U/kg）以诱导ALI。随后，将Lonodelestat TFA以0.1、0.5、2和10 mg/kg的剂量经鼻内给药，可进行预防性给药（例如，在hNE给药前30分钟）或治疗性给药（在hNE给药后1小时）。在hNE刺激后6-24小时，处死小鼠，并通过气管插管并注入和抽吸PBS收集支气管肺泡灌洗液（BALF）。将BALF离心，并测定总细胞计数。对经Wright-Giemsa染色的细胞涂片进行细胞分类计数（中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞、上皮细胞）。测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中的蛋白质浓度，作为血管渗漏的指标。将肺组织固定于10%福尔马林溶液中，石蜡包埋，切片，并进行苏木精-伊红（H&E）染色，用于组织病理学分析。在亚慢性烟草烟雾（TS）模型中，小鼠暴露于香烟烟雾（4支/天，5天/周）2-4周，并每日经鼻内给予lonodelestat（0.5-2 mg/kg）。研究结束时，按上述方法分析BALF和肺组织。采用ELISA法测定BALF中细胞因子（KC、MIP-2、IL-6、TNF-α）的水平。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
Lonodelestat TFA（POL6014，分子量约1592.8 Da）是一种肽类抑制剂，配制成雾化吸入剂（例如，使用Pari eFlow系统）。已在动物模型和人体中进行了临床前药代动力学研究。吸入后，该化合物直接输送到肺部，在肺部达到较高的局部浓度，而全身暴露量极低。在健康志愿者和囊性纤维化患者中，吸入的lonodelestat耐受性良好，全身吸收率低（符合肽类药物的预期）。由于局部滞留和从上皮衬液中缓慢清除，其在肺部的消除半衰期可能延长。TFA盐形式可提高溶解度和稳定性。目前尚无公开的详细人体药代动力学参数（例如，Cmax、Tmax、AUC）。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在临床前毒理学研究中，lonodelestat 在动物和健康志愿者中均表现出良好的耐受性。在健康志愿者和囊性纤维化患者中，吸入 POL6014 的单剂量递增研究中，该化合物总体上安全且耐受性良好。未报告严重不良事件。在动物模型中，鼻内给药 lonodelestat 剂量高达 10 mg/kg 时未引起明显的毒性（无体重减轻，无临床症状）。高剂量下，TFA 反离子可能具有刺激性。尚未发表遗传毒性或致癌性研究。作为宿主防御机制（中性粒细胞弹性蛋白酶）的抑制剂，理论上存在增加感染易感性的风险；然而，在临床研究中并未观察到这种情况。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
洛诺地司他 (POL6014) 是一种蛋白表位模拟物 (PEM)，曾处于治疗囊性纤维化 (CF) 的临床开发阶段。气道中性粒细胞弹性蛋白酶 (NE) 的活性是 CF 和其他慢性肺部疾病炎症和组织损伤的关键驱动因素。洛诺地司他是一种强效且选择性的 NE 抑制剂，可减轻肺部炎症。在健康志愿者和 CF 患者中进行的 I 期临床试验表明，该药物具有良好的安全性和耐受性。然而，该药物的进一步临床开发可能已经终止或暂停。该化合物尚未获得监管机构（FDA/EMA）的上市批准。TFA 盐用于研究；临床使用的制剂很可能是游离碱。该产品仅供研究使用。
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| 分子式 |
C73H112F3N15O21
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|---|---|
| 分子量 |
1592.75
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| 相关CAS号 |
Lonodelestat;906547-89-5
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O :~50 mg/mL (~31.39 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.6278 mL | 3.1392 mL | 6.2784 mL | |
| 5 mM | 0.1256 mL | 0.6278 mL | 1.2557 mL | |
| 10 mM | 0.0628 mL | 0.3139 mL | 0.6278 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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