LB Broth Base, powder (Luria-Bertani Base)

目录号: V76834 纯度: ≥98%
LB 肉汤基粉(Luria-Bertani Base)通常用于维持大肠杆菌的生长。
LB Broth Base, powder (Luria-Bertani Base) 产品类别: Biochemical Assay Reagents
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
LB肉汤基础粉(Luria-Bertani基础液)通常用于维持大肠杆菌的生长。1升LB培养基的成分为:10克蛋白胨、5克酵母提取物和5克氯化钠。
LB肉汤底粉(Luria-Bertani底粉)是一种粉末状微生物生长培养基,用于培养细菌,特别是大肠杆菌(E. coli)。
生物活性&实验参考方法
靶点
As a culture medium, LB Broth Base does not have molecular targets. Its components (peptone, yeast extract, sodium chloride) provide nutrients-carbon sources, nitrogen sources, amino acids, vitamins, and inorganic salts-to support bacterial growth.
体外研究 (In Vitro)
LB基础培养基是细菌培养的标准培养基,广泛应用于分子生物学领域,用于制备感受态细胞、扩增质粒DNA、进行蛋白质表达以及开展各种微生物学检测。它能支持大肠杆菌和许多其他细菌物种的旺盛生长。
体内研究 (In Vivo)
LB培养基仅用于体内实验,即向动物体内接种在该培养基中培养的细菌,以建立感染模型。该培养基本身不作为治疗剂用于动物。在LB培养基中培养的细菌的生长特性已得到充分证实且可重复。
酶活实验
LB培养基本身是一种成分复杂的混合物,不用于受体结合实验。然而,当重组蛋白在大肠杆菌中表达时,它可以作为非细胞酶活性测定的组分。例如,将大肠杆菌培养在LB培养基中以表达目标蛋白,随后纯化该蛋白,并将其用于无细胞结合实验,例如表面等离子共振、ELISA或荧光偏振。该培养基的成分可确保细菌的最佳生长和高蛋白产量,以满足此类下游应用的需求。
细胞实验
LB培养基基础液不用于真核细胞的细胞培养实验,其主要用途是细菌细胞培养。细菌培养时,将粉末状的LB培养基基础液用蒸馏水复溶(通常每升水加入25克粉末),并在121℃下高压灭菌15分钟以达到无菌状态。固体培养基则在高压灭菌前加入1.5%的琼脂(15克/升)。将大肠杆菌(例如DH5α、BL21(DE3))从甘油菌种或琼脂平板上接种到5-10毫升液体LB培养基中,并在37℃下以200-250转/分钟的转速振荡培养8-16小时。通过测量600纳米波长处的吸光度(OD600)来监测细胞生长。当表达培养物的 OD600 值达到 0.4-0.6 时,加入 IPTG(异丙基-β-D-1-硫代半乳糖苷,0.1-1 mM)诱导蛋白表达。转化筛选时,在 LB 培养基中加入氨苄青霉素(100 ug/mL)、卡那霉素(50 ug/mL)或其他抗生素。制备化学感受态细胞时,将细胞在 LB 培养基中培养至对数生长期中期(OD600 值约为 0.4),然后收集细胞并用 CaCl2 处理。
动物实验
LB肉汤底液不直接用于动物。它用于制备动物感染模型所需的细菌接种物。在体内感染研究中,细菌菌株(例如大肠杆菌、沙门氏菌、李斯特菌)在LB肉汤中培养过夜。第二天,将培养物以1:100的比例稀释到新鲜的LB肉汤中,并培养至对数生长期中期(OD600约为0.5-0.6)。通过离心收集细菌沉淀,用无菌PBS洗涤,并重悬于PBS或适当的稀释液中。然后将细菌悬液通过各种途径(包括静脉注射(尾静脉)、腹腔注射或灌胃)给予小鼠或大鼠(通常每只动物10⁶-10⁸ CFU)。对于致死性感染模型,使用预先设定的可杀死50-100%动物的剂量来评估抗菌化合物的疗效。在感染后的不同时间点采集血液和组织样本,接种到 LB 琼脂平板上,并在 37°C 下培养过夜,以计数活细菌(CFU/g 组织)。
药代性质 (ADME/PK)
LB肉汤基础培养基是一种非治疗性生长培养基,无需进行药代动力学评估。其各成分(蛋白胨、酵母提取物、氯化钠)均为营养物质,当作为动物饲料口服给药时,会按照正常的生理途径被吸收、代谢或排泄。蛋白胨和酵母提取物被消化成氨基酸和小肽,在小肠内被吸收,并参与蛋白质合成或分解代谢。氯化钠被吸收后参与电解质平衡。对于肠外给药(例如在细菌感染期间,培养基成分与细菌同时给药时),这些成分会迅速从血液中清除。目前尚无动物感染模型中LB肉汤基础培养基各成分的具体药代动力学参数。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
LB培养基通常被认为可安全用于细菌培养。其成分——蛋白胨(蛋白质水解物)、酵母提取物和氯化钠——均为食品级材料,毒性较低。经高压灭菌后,培养基无菌,不含活微生物。在实验室环境中,意外摄入或注射LB培养基可能导致轻微的胃肠道不适或注射部位刺激。LB培养基无明显的急性或慢性毒性。处理粉状培养基时应遵循实验室标准操作规程,避免吸入粉尘颗粒,以免引起呼吸道刺激。
参考文献
[1]. Jia Y, et al. Hydrogel dressing integrating FAK inhibition and ROS scavenging for mechano-chemical treatment of atopic dermatitis. Nat Commun. 2023 Apr 29;14(1):2478.
其他信息
LB培养基,也称为Luria-Bertani培养基或LB培养基,是分子生物学和微生物学中最常用的培养基之一。每升LB培养基的标准成分为:10克蛋白胨(提供氮源、氨基酸和肽)、5克酵母提取物(提供维生素和微量元素)以及5-10克氯化钠(提供电解质并维持渗透压平衡)。LB培养基支持大肠杆菌的快速生长,并用于感受态细胞的制备(包括化学感受态细胞和电感受态细胞)、质粒DNA的提取(小量提取、中量提取、大量提取)、在BL21(DE3)细胞中利用pET载体等系统进行重组蛋白表达、噬菌体扩增以及细菌的常规培养和保存。LB培养基有多种变体,包括Miller氏LB培养基(含10克/升氯化钠)和Lennox氏LB培养基(含5克/升氯化钠)。 LB肉汤底料仅供研究使用,未经批准不得用于人类食用或临床用途。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
外观&性状
Typically exists as solid at room temperature
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O :≥ 100 mg/mL
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们