| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
JF646 Maleimide does not target a specific biological receptor or enzyme; its reactive maleimide group targets free thiol groups (-SH) on cysteine side chains. The dye itself is a fluorophore used for visualizing labeled biomolecules. The maleimide reacts specifically with reduced thiols at pH 6.5-7.5 to form stable thioether bonds, enabling site-specific labeling of proteins.
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| 体外研究 (In Vitro) |
λmax(nm)=646;λem(nm)=664[1]。JF646,马来酰亚胺,经过修饰。红色荧光染料JF646具有高消光系数、光稳定性好、可透过细胞膜[2]。
JF646 马来酰亚胺不用于酶/受体结合分析,而是用作标记剂。其光谱特性(最大吸收波长约 646 nm,最大发射波长约 664 nm)在无细胞缓冲溶液中测定。该染料具有高量子产率(通常 >0.3)和优异的光稳定性,使其适用于单分子定位显微镜 (SMLM) 和受激发射损耗 (STED) 显微镜。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在无细胞体系中,将JF646马来酰亚胺与含有工程改造的半胱氨酸残基的纯化蛋白孵育。通过SDS-PAGE和凝胶内荧光扫描分析标记效率和特异性。马来酰亚胺优先与还原型硫醇反应;过量的试剂用β-巯基乙醇或DTT淬灭。如果半胱氨酸并非必需,则标记的蛋白仍保持其功能活性。
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| 酶活实验 |
对于硫醇标记,将纯化的蛋白质(10-100 uM)用 TCEP(1-5 mM)在室温下还原 30 分钟,以确保硫醇基团游离。通过缓冲液交换去除还原剂。加入 JF646 马来酰亚胺(3-10 倍摩尔过量),并在室温下孵育 1-2 小时或在 4℃ 下过夜。用过量的 β-巯基乙醇终止反应。通过脱盐或透析去除未结合的染料。通过质谱分析确认标记效率。
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| 细胞实验 |
将表达带有半胱氨酸标签(或通过抗体标记)的目标蛋白的活细胞或固定细胞与 JF646 马来酰亚胺孵育。对于表面硫醇标记,将细胞在 PBS 缓冲液中用染料(1-10 uM)于 4℃ 处理 15-30 分钟,然后洗涤。对于胞内标记,首先固定并透化细胞。使用共聚焦显微镜或超分辨率显微镜对标记的细胞进行成像。通过用 N-乙基马来酰亚胺预封闭硫醇来控制特异性。
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| 动物实验 |
JF646 马来酰亚胺用于体内成像研究,通常与靶向配体(例如抗体、肽)偶联。将偶联物静脉注射到小鼠体内(0.1-5 mg/kg)。成像采用近红外荧光成像系统,激发波长为 640 nm。该染料具有低背景和良好的组织穿透性。生物分布可通过离体器官成像在 1-24 小时后进行评估。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
作为一种小分子染料(分子量约为 800-1000 Da),JF646 马来酰亚胺本身清除迅速且分布不具有特异性。当与靶向载体偶联后,其药代动力学性质主要受偶联物的影响。该染料具有良好的水溶性和光稳定性,在血清中可稳定保存数小时。马来酰亚胺基团在 pH > 8 时会缓慢水解;建议在惰性气氛下于 -20℃ 保存。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
JF646 马来酰亚胺在典型标记浓度(≤10 μM)下无毒。在动物实验中,使用偶联物未报告明显的毒性。该染料不干扰细胞活力或正常生理功能。应遵循标准安全预防措施(戴手套、穿实验服)。该化合物不适用于人体;目前尚无临床毒性数据。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
JF646 马来酰亚胺是一种仅供研究使用的荧光探针,由 Janelia 研究园区开发。它未获准用于诊断或治疗用途。该染料属于 Janelia Fluor® 系列,以其高亮度和光稳定性而闻名。这种马来酰亚胺衍生物能够对体外和活细胞中的硫醇进行位点特异性标记。它与多种显微镜技术兼容,包括 STED、PALM 和共聚焦成像。
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| 分子式 |
C35H34N4O5SI
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| 分子量 |
618.75
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| 相关CAS号 |
Janelia Fluor® 646, SE;1811539-59-9;Janelia Fluor® 646, Azide;Janelia Fluor® 646 TFA
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| 外观&性状 |
Light green to green solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6162 mL | 8.0808 mL | 16.1616 mL | |
| 5 mM | 0.3232 mL | 1.6162 mL | 3.2323 mL | |
| 10 mM | 0.1616 mL | 0.8081 mL | 1.6162 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。