| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
JF646 Azide does not target a specific biological receptor. The azide group is a bioorthogonal chemical handle that reacts specifically with alkyne-functionalized molecules via click chemistry. The fluorophore itself is used for visualization. The azide is inert toward biological nucleophiles, enabling specific labeling in complex environments such as live cells or lysates without interfering with native functions.
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| 体外研究 (In Vitro) |
JF646的最大吸收波长(λabs)和发射波长(λem)分别为646 nm和664 nm[1]。对于自标记标签(如HaloTag),JF646可作为配体[1]。根据Janelia Fluor 646.6的描述,JF646可修饰叠氮化物。JF646具有高消光系数、良好的膜渗透性和光稳定性,是一种红色荧光染料[2]。
在无细胞体系中,JF646叠氮化物可用于点击化学反应,标记炔基修饰的生物分子。其光物理性质(吸收/发射最大值、量子产率、光稳定性)在缓冲液或有机溶剂中进行表征。该染料具有高荧光量子产率(>0.3)和优异的抗光漂白性,使其适用于超分辨率显微镜。叠氮基团不影响染料的光谱性质。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
叠氮化物JF646本身不具有生物活性,而是用作标记试剂。在体外,它能与含炔烃的底物发生点击化学反应。标记产物可通过SDS-PAGE、Western blot或荧光成像进行可视化。叠氮化物-炔烃反应的特异性可通过与游离炔烃的竞争性抑制或省略铜催化剂(对于CuAAC反应)来验证。
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| 酶活实验 |
典型的无细胞标记反应:将炔基修饰的蛋白质(10-50 uM)与 JF646 叠氮化物(20-100 uM)在含有 CuSO4(1 mM)、THPTA 配体(2 mM)和抗坏血酸钠(5 mM)的 PBS 缓冲液(pH 7.4)中于室温孵育 1 小时。对于无铜 SPAAC 反应,则使用环辛炔修饰的底物。反应用 EDTA 终止,并通过离心过滤去除未结合的染料。标记效率通过质谱或荧光凝胶扫描进行分析。
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| 细胞实验 |
将表达炔基标记生物分子(例如,通过炔基修饰的糖或氨基酸进行代谢标记)的活细胞或固定细胞与JF646叠氮化物孵育。对于无铜标记,将叠氮化物染料(1-10 uM)直接加入细胞培养基中,孵育30-60分钟。对于CuAAC反应,由于铜的毒性,细胞必须固定并进行透化处理。洗涤后,使用共聚焦显微镜或超分辨率显微镜对细胞进行成像,以观察标记生物分子的亚细胞定位。
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| 动物实验 |
对于体内成像,JF646叠氮化物通常在给药前通过点击化学与靶向基团(例如炔基修饰的抗体)偶联。或者,游离的叠氮化物染料可以与环辛炔修饰的探针共同注射,进行体内点击化学反应(预靶向)。在小鼠模型中,染料偶联物通过静脉注射给药(0.5-5 mg/kg)。成像在640 nm激发波长下进行,并监测荧光信号随时间的变化(0-48小时)。生物分布通过器官解剖进行评估。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
JF646叠氮化物是一种分子量约为700-900 Da的小型亲水性染料。其药代动力学取决于其偶联物;游离染料主要通过肾脏排泄迅速清除。叠氮基团在血液中可保持数小时的化学稳定性。该染料的非特异性蛋白结合极低。应避光储存于-20℃。点击反应动力学迅速,半衰期为数分钟至数小时,具体取决于炔烃配体。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
JF646叠氮化物在工作浓度(细胞内≤10 μM)下毒性较低。铜催化的点击反应需要Cu(I),而Cu(I)可能具有细胞毒性;因此,对于活细胞,最好采用无铜方案。目前尚未报道该染料本身具有急性或慢性毒性。应遵循标准的实验室安全操作规程。该化合物不适用于临床;尚无正式的毒理学研究数据。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
JF646叠氮化物是由Janelia研究园区开发的一种研究级荧光探针。它是Janelia Fluor®系列产品的一部分,该系列产品针对单分子定位显微镜(SMLM)和受激发射损耗显微镜(STED)进行了优化。这种叠氮化物衍生物能够对活细胞、组织和生物体中的炔基标记分子进行生物正交标记。它尚未获准用于诊断或治疗用途。该染料与多种成像平台兼容。
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| 分子式 |
C37H44N6O6SI
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| 分子量 |
696.87
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| 相关CAS号 |
Janelia Fluor® 646, SE;1811539-59-9;Janelia Fluor® 646 TFA;Janelia Fluor® 646, Maleimide
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| 外观&性状 |
Light green to green solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。 (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.4350 mL | 7.1749 mL | 14.3499 mL | |
| 5 mM | 0.2870 mL | 1.4350 mL | 2.8700 mL | |
| 10 mM | 0.1435 mL | 0.7175 mL | 1.4350 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。