Janelia Fluor® 646 TFA (JF646 TFA)

目录号: V76869 纯度: ≥98%
Janelia Fluor® 646 TFA (JF646 TFA) 是一种红色荧光染料,可用于合成/制备 Janelia Fluor 646 HaloTag 和 SNAP-Tag 配体。
Janelia Fluor® 646 TFA (JF646 TFA) 产品类别: Fluorescent Dye
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
10mg
Other Sizes

Other Forms of Janelia Fluor® 646 TFA (JF646 TFA):

  • JF-646, SE (NHS)
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InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用
产品描述
Janelia Fluor® 646 TFA (JF646 TFA) 是一种红色荧光染料,可用于合成/制备 Janelia Fluor 646 HaloTag 和 SNAP-Tag 配体。Janelia Fluor® 646 TFA 也可用于活细胞成像实验。Janelia Fluor® 产品已获得美国专利号 9,933,417、10,018,624、10,161,932 以及霍华德·休斯医学研究所的其他专利许可。
Janelia Fluor® 646 TFA (JF646 TFA) 是红色荧光染料 Janelia Fluor® 646(激发波长约 646 nm,发射波长约 664 nm)的游离酸形式,带有三氟乙酸根反离子。这种非反应性形式可用作参考标准、直接染色或作为定制偶联的前体。它具有高亮度和光稳定性,适用于荧光成像应用。
生物活性&实验参考方法
靶点
JF646 TFA does not target a specific receptor or enzyme. The free acid form contains a carboxylate group that can be activated (e.g., to NHS ester) for covalent labeling. The fluorophore itself is used for non-covalent staining of hydrophobic environments or as a tracer. The TFA salt improves solubility and facilitates handling. No specific biological target is engaged; the dye is an optical tool.
体外研究 (In Vitro)
JF646 TFA:λmax(nm)=646,λem(nm)=664[1]。
在无细胞检测中,JF646 TFA 的特性通过其在不同溶剂中的吸收和发射光谱来表征。游离酸形式具有高消光系数(通常 >100,000 M-¹cm-¹)和良好的量子产率(~0.3-0.5)。光稳定性通过连续光照进行测定;JF646 TFA 可长时间抵抗光漂白,使其适用于延时和超分辨率显微镜。TFA 反离子不影响其光谱特性。
体内研究 (In Vivo)
JF646 TFA 不用于典型的生物活性测定。然而,其光谱特性使其可用作仪器校准的荧光标准、标记效率的定量分析,或作为细胞摄取研究中的非反应性对照。由于其具有中等的疏水性,它也可用于亲脂性细胞器的直接(非共价)染色,但不能保证特异性标记。
酶活实验
JF646 TFA 的纯度和结构经高效液相色谱 (HPLC) 和质谱分析确认。作为标准品,将该化合物溶解于二甲基亚砜 (DMSO) 中配制成浓度为 1-10 mM 的储备液。通过紫外-可见吸收光谱测定其浓度(使用最大吸收波长处的消光系数)。荧光发射光谱使用荧光分光光度计记录。该化合物在 -20℃ 的 DMSO 溶液中可稳定保存数月。在无细胞结合研究中,它可用作非特异性荧光的对照。
细胞实验
将细胞与 JF646 TFA (0.1-10 uM) 在培养基中孵育 15-60 分钟,然后洗涤。由于其理化性质,该染料可能在溶酶体或脂滴中积聚。使用共聚焦显微镜对细胞荧光进行成像。作为对照,细胞可预先用反应性形式(例如 JF646 NHS)处理,以比较特异性染色和非特异性染色。预期不会出现靶标特异性信号;任何观察到的荧光均表明非特异性摄取。
动物实验
JF646 TFA 可静脉注射给小鼠(例如,0.5-2 mg/kg),作为示踪剂用于成像或评估染料的生物分布。荧光成像采用近红外系统。游离染料通过肾脏滤过迅速从循环中清除,半衰期仅为几分钟。如果染料发生聚集,则可能在肝脏和脾脏中蓄积。注射后 1-24 小时的离体器官成像显示,信号主要出现在肾脏和膀胱,证实了肾脏清除。
药代性质 (ADME/PK)
JF646 TFA 的分子量约为 700 Da。它极易溶于 DMSO,在含 TFA 盐的水性缓冲液中溶解度中等。由于带负电荷,其游离酸形式的细胞渗透性有限。在体内,它分布和消除迅速。小鼠血浆半衰期约为 10-30 分钟。该染料代谢不明显,以原形排出体外。该化合物应避光储存于 -20℃。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
JF646 TFA 仅少量用于研究,尚未有明显的毒性报告。在细胞培养中,浓度高达 10 μM 时,未观察到对细胞活力或形态的不良影响。在小鼠中,已给予高达 10 mg/kg 的剂量,未观察到明显的毒性。TFA 反离子含量低,无毒。标准安全防护措施(手套、实验服)即可。目前尚无临床毒性数据。
参考文献

[1]. A general method to fine-tune fluorophores for live-cell and in vivo imaging. Nat Methods. 2017;14(10):987-994. doi:10.1038/nmeth.4403.

其他信息
JF646 TFA 是 Janelia Fluor® 系列的一种仅供研究使用的荧光染料,未获准用于临床或诊断用途。其游离酸形式是合成反应性衍生物(NHS 酯、马来酰亚胺、叠氮化物)的前体。在某些应用中,它也可用作非共价染色剂。该染料经过优化,具有高亮度和光稳定性,可用于 STED、PALM 和共聚焦成像等先进的显微镜技术。请避光保存。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C31H29F3N2O6SI
分子量
610.65
相关CAS号
Janelia Fluor® 646, SE;1811539-59-9;Janelia Fluor® 646, Azide;Janelia Fluor® 646, Maleimide
外观&性状
Blue to dark blue solid powder
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO :~100 mg/mL (~163.76 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.6376 mL 8.1880 mL 16.3760 mL
5 mM 0.3275 mL 1.6376 mL 3.2752 mL
10 mM 0.1638 mL 0.8188 mL 1.6376 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们