1. 首页
  2. 产品
  3. Signaling Pathways 信号通路
  4. Others | 其他产品
  5. Fluorescent Dye

Janelia Fluor® 525, SE (JF525, SE; JF525, NHS)

目录号: V76871 纯度: ≥98%
COA 产品数据 产品说明书 SDS
Janelia Fluor 525, SE (JF525, SE) 是一种黄色荧光染料（Ex = 525 nm；Em = 549 nm）。
Janelia Fluor® 525, SE (JF525, SE; JF525, NHS) 产品类别: Fluorescent Dye
产品仅用于科学研究，不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
Other Sizes
加入购物车 结帐 大包装询价
020-31522723 sales@invivochem.cn
点击了解更多
  • 与全球5000+客户建立关系
  • 覆盖全球主要大学、医院、科研院所、生物/制药公司等
  • 产品被大量CNS顶刊文章引用
InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用
产品描述
Janelia Fluor 525, SE (JF525, SE) 是一种黄色荧光染料（激发波长 = 525 nm；发射波长 = 549 nm）。Janelia Fluor 已获得美国专利号 9,933,417、10,018,624、10,161,932 以及霍华德·休斯医学研究所的其他专利许可。
Janelia Fluor® 525, SE (JF525, SE) 是一种明亮、光稳定的绿色荧光染料（激发波长约 525 nm，发射波长约 545 nm），与琥珀酰亚胺酯 (SE, NHS 酯) 反应基团偶联。它设计用于蛋白质、肽和其他含胺生物分子上伯胺（赖氨酸残基和 N 端）的共价标记。
生物活性&实验参考方法
靶点
JF525 SE does not target a specific biological receptor. The NHS ester reacts specifically with primary amines under mild conditions (pH 7-9) to form stable amide bonds. The dye itself is a fluorophore for visualization. The SE group is highly reactive toward amines; therefore, the compound is used as a labeling reagent rather than as a ligand.
体外研究 (In Vitro)
在无细胞体系中，JF525 SE 的光物理性质具有以下特点：最大吸收波长约为 525 nm，最大发射波长约为 545 nm，消光系数高，且光稳定性优异。它适用于单分子定位显微镜 (SMLM) 和受激发射损耗显微镜 (STED)。NHS 酯在水性缓冲液中可水解；水解速率取决于 pH 值，pH 值越高，水解速率越快。标记效率通过荧光凝胶扫描测定。
酶活实验
典型的蛋白质标记方案：将蛋白质（1-10 mg/mL）溶于 PBS 缓冲液（pH 7.2-7.5）中，并与 5-20 倍摩尔过量的 JF525 SE（DMSO 储备液）混合。反应在室温下避光孵育 1 小时或在 4℃ 下过夜。用 50 mM Tris 或甘氨酸（pH 7.5）终止未反应的 NHS 酯。标记后的蛋白质通过凝胶过滤或透析纯化。染料与蛋白质的比例通过 525 nm 处的吸光度测定。
细胞实验
细胞标记时，将固定细胞与 JF525 SE (1-10 uM) 在 PBS 缓冲液中于室温孵育 30-60 分钟。该染料可与细胞表面和细胞内胺基反应。洗涤后，使用荧光显微镜对细胞进行成像。通常不建议进行活细胞标记，因为 NHS 酯会与血清蛋白和膜蛋白发生非特异性反应，导致毒性和背景干扰。或者，也可以在使用前将该染料与特异性抗体偶联。
动物实验
JF525 SE 可与靶向抗体偶联，然后将偶联物静脉注射到小鼠体内（例如，0.5-2 mg/kg）。使用配备绿色荧光激发/发射滤光片的荧光成像系统进行体内成像。监测偶联物在一段时间内的生物分布（0-48 小时）。或者，由于游离 NHS 酯水解迅速且具有非特异性反应性，因此不建议在体内使用。离体器官成像证实了靶向特异性蓄积。
药代性质 (ADME/PK)
作为一种NHS酯，JF525 SE在水性介质中不稳定，必须在-20℃下干燥保存。偶联后，标记蛋白的药代动力学性质受载体蛋白的影响。游离染料的分子量约为700 Da，且清除迅速。该染料具有较高的光稳定性，可用于长期成像。偶联物应在制备后数小时内使用，或冷冻保存于-80℃。该染料与标准的固定和透化方法兼容。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
JF525 SE 在标记浓度（固定细胞≤10 μM）下无毒。NHS酯若摄入或接触皮肤可能引起轻微刺激。在动物实验中，使用缀合物未报告明显的毒性。该化合物仅供研究使用；目前尚无临床毒性数据。应遵循标准安全防护措施（戴手套、穿实验服、使用通风橱）以避免接触。
参考文献

[1]. A general method to fine-tune fluorophores for live-cell and in vivo imaging. Nat Methods. 2017 Oct;14(10):987-994.
其他信息
JF525 SE 是 Janelia Fluor® 系列的研究级荧光染料，经优化，具有高亮度和光稳定性。它尤其适用于超分辨率显微镜（STED、PALM）。该琥珀酰亚胺酯衍生物能够高效、特异性地标记蛋白质和肽中的伯胺。该染料未获准用于临床或诊断用途。应在氩气保护下于 -20°C 保存，避光，并在开封前使其恢复至室温。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C31H21F4N3O7
分子量
623.51
外观&性状
Typically exists as solid at room temperature
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。  (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
View More

注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。
View More

口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.6038 mL 8.0191 mL 16.0382 mL
5 mM 0.3208 mL 1.6038 mL 3.2076 mL
10 mM 0.1604 mL 0.8019 mL 1.6038 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器
计算 重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？
  • 在分子量（MW）框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。
计算 重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：
  • 在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
  • 在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中
g/mol
计算 重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：
  • 分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
  • 摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。
/
计算 重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。
+
+
+
计算 重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们
电话: 020-31522723 传真: 463611831 邮箱: sales@invivochem.cn
获得最新产品资讯、折扣和优惠
姓名
邮箱

InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售

Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1

 粤公网安备 44011102003439号

联系我们
Home Classify Cart Member