| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
IRBP derived peptide R16 targets the immune system, specifically T-cell receptors (TCRs) on CD4+ T cells that recognize the peptide presented by MHC class II molecules (e.g., I-Ak or I-Ab in mice). This recognition triggers an autoimmune response against retinal antigens, leading to uveitis. The peptide is used to model autoimmune ocular inflammatory diseases.
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在无细胞实验中,R16肽能与纯化的MHC II类分子(例如I-Ak)结合。结合亲和力可通过竞争性ELISA或SPR测定。该肽对其限制性MHC等位基因具有中等至高的亲和力(Kd值在纳摩尔至微摩尔范围内)。这种结合是T细胞活化所必需的。该过程不涉及酶活性,而是一种受体-配体相互作用。
|
| 体内研究 (In Vivo) |
体外实验表明,R16肽(0.1-10 uM)可刺激从IRBP免疫小鼠中分离的T细胞或针对该表位的T细胞杂交瘤的增殖和细胞因子(IFN-γ、IL-17)的产生。活化程度可通过[3H]-胸苷掺入法或细胞因子ELISA法进行检测。该肽特异性识别R16表位;序列打乱的肽段不诱导免疫应答。醋酸盐不影响其活性。
|
| 酶活实验 |
MHC结合活性可通过无细胞竞争性分析法测定。纯化的I-Ak MHC II类分子与荧光标记的参考肽和不同浓度(0.01-100 uM)的未标记R16肽孵育。孵育后,结合肽和游离肽可通过尺寸排阻色谱法分离,或用抗MHC抗体捕获。测量荧光强度并计算IC50值。或者,也可采用无细胞表面等离子共振(SPR)分析法。
|
| 细胞实验 |
将经R16免疫的B10.A或C57BL/6小鼠的脾细胞或淋巴结细胞接种于96孔板中,并加入R16肽(0.001-10 uM)培养48-72小时。在最后16-18小时,通过[3H]-胸苷掺入法检测细胞增殖。收集上清液,采用ELISA法检测细胞因子(IFN-γ、IL-17、IL-2)。同时,通过流式细胞术检测CD25和CD69的表达来评估T细胞活化。对照组不添加肽或添加无关肽。
|
| 动物实验 |
为诱导实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU),将小鼠(例如B10.RIII或C57BL/6)皮下注射R16肽(50-200 μg),该肽乳化于完全弗氏佐剂(CFA)中,并添加结核分枝杆菌。在免疫当天和/或48小时后腹腔注射百日咳毒素(0.5-1 μg)。每日观察小鼠的葡萄膜炎临床症状(例如,眼红、分泌物、眼底改变)。于第14-21天采集眼组织进行炎症组织学分级。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
作为一种肽,R16乙酸盐由于易被蛋白水解,在体内半衰期很短(仅几分钟)。当与完全弗氏佐剂(CFA)乳化后,它会在注射部位形成药物储存库,从而在数天内持续释放抗原。单独使用时,该肽会被迅速清除。乙酸盐可提高其水溶性。在诱导实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)时,将该肽与CFA混合以形成稳定的乳液。该肽的分子量约为2000 Da。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
R16肽在诱导实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)的剂量(50-200微克/只小鼠)下耐受性良好。疾病本身是预期结果;该肽对动物无毒。未见非靶器官毒性报道。佐剂(完全弗氏佐剂,CFA)可能引起局部肉芽肿和全身炎症。单独使用肽(不含佐剂)无毒。请遵循标准操作规程。本品不可用于人类。
|
| 其他信息 |
R16肽(IRBP161-180)是诱导实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)的标准抗原,EAU是人类自身免疫性葡萄膜炎的动物模型。它广泛用于研究眼部炎症性疾病的发病机制和测试免疫调节疗法。乙酸盐形式因其稳定性而常用。该肽仅供研究使用,不得用于人类的治疗或诊断。
|
| 分子式 |
C64H96N16O24.XC2H4O2
|
|---|---|
| 分子量 |
1473.54 (free acid)
|
| 相关CAS号 |
IRBP derived peptide, R16;145821-83-6
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
H2O :~7.69 mg/mL
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。