IRBP derived peptide, R16 acetate

目录号: V76881 纯度: ≥98%
IRBP 衍生肽,R16 乙酸酯是一种生物活性肽。
IRBP derived peptide, R16 acetate 产品类别: Peptides | 多肽
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
IRBP衍生肽R16乙酸酯是一种具有生物活性的肽。(R16是IRBP(视网膜间视黄酸结合蛋白)衍生肽。IRBP是一种视网膜感光细胞蛋白,能够在易感品系中诱导实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)。)
IRBP衍生肽R16乙酸盐是一种合成肽,来源于视网膜间质视黄酸结合蛋白(IRBP)。特异性R16肽(也称为IRBP161-180)是诱导易感动物品系发生实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)的主要致病表位。乙酸盐可提高其溶解度和稳定性。
生物活性&实验参考方法
靶点
IRBP derived peptide R16 targets the immune system, specifically T-cell receptors (TCRs) on CD4+ T cells that recognize the peptide presented by MHC class II molecules (e.g., I-Ak or I-Ab in mice). This recognition triggers an autoimmune response against retinal antigens, leading to uveitis. The peptide is used to model autoimmune ocular inflammatory diseases.
体外研究 (In Vitro)
在无细胞实验中,R16肽能与纯化的MHC II类分子(例如I-Ak)结合。结合亲和力可通过竞争性ELISA或SPR测定。该肽对其限制性MHC等位基因具有中等至高的亲和力(Kd值在纳摩尔至微摩尔范围内)。这种结合是T细胞活化所必需的。该过程不涉及酶活性,而是一种受体-配体相互作用。
体内研究 (In Vivo)
体外实验表明,R16肽(0.1-10 uM)可刺激从IRBP免疫小鼠中分离的T细胞或针对该表位的T细胞杂交瘤的增殖和细胞因子(IFN-γ、IL-17)的产生。活化程度可通过[3H]-胸苷掺入法或细胞因子ELISA法进行检测。该肽特异性识别R16表位;序列打乱的肽段不诱导免疫应答。醋酸盐不影响其活性。
酶活实验
MHC结合活性可通过无细胞竞争性分析法测定。纯化的I-Ak MHC II类分子与荧光标记的参考肽和不同浓度(0.01-100 uM)的未标记R16肽孵育。孵育后,结合肽和游离肽可通过尺寸排阻色谱法分离,或用抗MHC抗体捕获。测量荧光强度并计算IC50值。或者,也可采用无细胞表面等离子共振(SPR)分析法。
细胞实验
将经R16免疫的B10.A或C57BL/6小鼠的脾细胞或淋巴结细胞接种于96孔板中,并加入R16肽(0.001-10 uM)培养48-72小时。在最后16-18小时,通过[3H]-胸苷掺入法检测细胞增殖。收集上清液,采用ELISA法检测细胞因子(IFN-γ、IL-17、IL-2)。同时,通过流式细胞术检测CD25和CD69的表达来评估T细胞活化。对照组不添加肽或添加无关肽。
动物实验
为诱导实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU),将小鼠(例如B10.RIII或C57BL/6)皮下注射R16肽(50-200 μg),该肽乳化于完全弗氏佐剂(CFA)中,并添加结核分枝杆菌。在免疫当天和/或48小时后腹腔注射百日咳毒素(0.5-1 μg)。每日观察小鼠的葡萄膜炎临床症状(例如,眼红、分泌物、眼底改变)。于第14-21天采集眼组织进行炎症组织学分级。
药代性质 (ADME/PK)
作为一种肽,R16乙酸盐由于易被蛋白水解,在体内半衰期很短(仅几分钟)。当与完全弗氏佐剂(CFA)乳化后,它会在注射部位形成药物储存库,从而在数天内持续释放抗原。单独使用时,该肽会被迅速清除。乙酸盐可提高其水溶性。在诱导实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)时,将该肽与CFA混合以形成稳定的乳液。该肽的分子量约为2000 Da。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
R16肽在诱导实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)的剂量(50-200微克/只小鼠)下耐受性良好。疾病本身是预期结果;该肽对动物无毒。未见非靶器官毒性报道。佐剂(完全弗氏佐剂,CFA)可能引起局部肉芽肿和全身炎症。单独使用肽(不含佐剂)无毒。请遵循标准操作规程。本品不可用于人类。
其他信息
R16肽(IRBP161-180)是诱导实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)的标准抗原,EAU是人类自身免疫性葡萄膜炎的动物模型。它广泛用于研究眼部炎症性疾病的发病机制和测试免疫调节疗法。乙酸盐形式因其稳定性而常用。该肽仅供研究使用,不得用于人类的治疗或诊断。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C64H96N16O24.XC2H4O2
分子量
1473.54 (free acid)
相关CAS号
IRBP derived peptide, R16;145821-83-6
外观&性状
White to off-white solid powder
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O :~7.69 mg/mL
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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