| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Superoxide anion (O2•−). HKSOX-1m hydrobromide is a fluorescent chemosensor that specifically reacts with superoxide to generate a highly fluorescent product. It does not target a specific protein; its action is based on chemical oxidation. It is cell-permeable and can be used to monitor superoxide production in live cells. The methyl group may confer different cellular distribution (e.g., mitochondrial accumulation) compared to HKSOX-1r. The 5/6 mixture contains both regioisomers. This probe is used in flow cytometry, fluorescence microscopy, and microplate assays. There is no pharmacological target; it is a chemical reagent for detecting ROS.
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| 体外研究 (In Vitro) |
在极低激光功率输出条件下，HKSOX-1m(5/6混合物)氢溴酸盐（10 μM）能够灵敏地捕获分化的人类THP-1细胞的基础信号以及被抗霉素A（1 μM）激活的信号。蔡司LSM 510 Meta激光扫描显微镜在514 nm激发波长下测得的线粒体O2信号（强度为1%）[1]。1. HKSOX-1m(5/6混合物)氢溴酸盐工作液的制备 1.1 制备储备液。要制备10 mM的储备液，将1 mg HKSOX-1m(5/6混合物)氢溴酸盐用79 μL无水DMSO稀释。建议将HKSOX-1m(5/6混合物)氢溴酸盐储备液分装后，避光保存于-20°C或-80°C。 1.2 配制功能性溶液 使用加热的无血清细胞培养基或PBS稀释储备液配制1-10 μM的HKSOX-1m（5/6混合物）氢溴酸盐工作液。注意：请根据实际情况调整HKSOX-1m（5/6混合物）氢溴酸盐工作液的浓度。2. 用细胞染色悬浮细胞 2.1 离心细胞，加入PBS，每次洗涤5分钟，共洗涤两次。细胞密度为1×10⁶/mL。2.2 加入1 mL氢溴酸盐工作液HKSOX-1m（5/6混合物），室温静置5-30分钟。2.3 以400 g离心3-4分钟，弃去上清液。2.4 加入PBS后，洗涤细胞两次，每次5分钟。 2.5 将细胞重悬于1毫升PBS或无血清培养基中，并使用流式细胞仪或荧光显微镜进行观察。3. 贴壁细胞染色 3.1 使用无菌盖玻片培养贴壁细胞。3.2 将盖玻片从培养基中取出后，吸出多余的培养基。3.3 用100微升染料工作液完全覆盖细胞，轻轻摇晃，孵育5至30分钟。3.4 吸出染料工作液，并用培养基洗涤两次，每次5分钟，然后使用流式细胞仪或荧光显微镜进行观察。
体外实验表明，HKSOX-1m（5/6混合物）氢溴酸盐（1-10 uM）能特异性地与黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶产生的超氧阴离子反应，导致荧光强度显著增强（激发波长510 nm，发射波长580 nm）。该反应对其他活性氧（ROS）（如H2O2、•OH、ONOO-、NO）具有选择性。甲基的存在可能提高反应速率或略微改变光谱性质。在细胞实验中，将HKSOX-1m（5 uM）在37℃下孵育细胞30-60分钟，随后用PMA（佛波酯）或LPS刺激细胞，可观察到荧光强度增强，该增强可通过流式细胞仪或显微镜检测。氢溴酸盐提高了溶解度，减少了对有机溶剂的需求。该探针在工作浓度下无细胞毒性。与DHE相比，它对超氧阴离子具有更高的特异性。它用于测量免疫细胞、神经元和癌细胞中的超氧化物。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
不适用。HKSOX-1m 氢溴酸盐并非药物，而是用作体外和体内研究的探针。它可以注射到动物体内以检测组织中超氧化物的产生。例如，在急性肝损伤（对乙酰氨基酚过量）小鼠模型中，静脉注射该探针（1-5 mg/kg）可导致肝脏出现荧光，且荧光强度与超氧化物的生成量相关。氢溴酸盐便于配制生理盐水。该混合物仅用于研究，不具有治疗用途。
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| 酶活实验 |
为验证超氧化物特异性，在96孔黑色板中进行无细胞检测。配制5 uM的HKSOX-1m氢溴酸盐PBS溶液（pH 7.4）。加入黄嘌呤（100 uM）和黄嘌呤氧化酶（0.1 U/mL）以生成超氧化物。于37℃孵育30分钟。测量荧光强度（激发波长510 nm，发射波长580 nm）。以超氧化物歧化酶（SOD，100 U/mL）作为阳性对照，应能抑制信号。为验证特异性，分别用H2O2（100 uM）、ONOO-（10 uM）、NO（DETA-NONOate，100 uM）和羟基自由基（Fe2⁺/H2O2）进行测试。只有超氧化物才能产生信号。该探针在4℃避光条件下稳定。将DMSO储备液（10 mM）溶于水或PBS缓冲液中。氢溴酸盐的水溶性很高。5/6混合物的溶解行为类似。
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| 细胞实验 |
对于细胞实验，将 RAW 264.7 细胞以 2×10⁴ 个细胞/孔的密度接种于 96 孔黑色板中，培养基为含 10% FBS 的 DMEM。过夜培养。移除培养基，加入 5 uM 的 HKSOX-1m（溶于不含酚红的 HBSS 缓冲液中）。37℃ 孵育 30 分钟。用 PBS 洗涤两次。加入 100 nM 的 PMA 或溶剂对照。37℃ 孵育 30-60 分钟。使用酶标仪读取荧光值（激发波长 510 nm，发射波长 580 nm）。对于流式细胞术，使用 15 mL 离心管；上样和刺激后，用胰蛋白酶消化细胞，洗涤后，使用流式细胞仪进行分析（激发波长 488 nm，发射波长 585 nm）。对于显微镜观察，使用活细胞共聚焦显微镜。由于氢溴酸盐溶于水，因此 DMSO 浓度较低。对照组：刺激过程中加入SOD（100 U/mL）以淬灭信号。另设DMSO对照组。该探针在5 uM浓度下孵育4小时内无细胞毒性。所有实验均重复三次。5/6混合物直接使用。
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| 动物实验 |
对于体内成像，可使用小鼠炎症模型。腹腔注射LPS（10 mg/kg）诱导小鼠全身炎症。4小时后，经尾静脉注射HKSOX-1m氢溴酸盐（1 mg/kg，溶于100 μL无菌生理盐水）。30分钟后，处死小鼠，收集肝脏、肺脏和脾脏，并测量组织匀浆中的荧光强度。或者，也可使用IVIS成像仪。对于局部炎症模型（角叉菜胶诱导的足爪水肿），将角叉菜胶注射到小鼠足爪，然后静脉注射探针，并对足爪进行成像。氢溴酸盐适用于注射。所有动物实验均需获得IACUC批准。该探针仅供研究使用。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
不适用。该探针并非药物；未进行药代动力学研究。它会迅速从血液循环中清除。无 ADME 数据。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
无毒性。小鼠静脉注射剂量高达 5 mg/kg 时，未见不良反应报道。细胞培养中，浓度高达 50 μM，持续 4 小时，不影响细胞活力。符合实验室安全标准。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
HKSOX-1m 是 HKSOX-1 超氧化物探针的甲基化变体，具有不同的细胞分布（可能定位于线粒体）。氢溴酸盐可提高其水溶性。5/6 混合物是区域异构体的混合物。它可用作活细胞中超氧化物的选择性荧光指示剂。它并非药物，仅供研究使用。
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| 分子式 |
C49H37BR2F10N2O10PS2
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| 分子量 |
1258.72
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| 相关CAS号 |
HKSOX-1m (5/6-mixture);1786411-19-5
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~200 mg/mL (~158.89 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.7945 mL | 3.9723 mL | 7.9446 mL | |
| 5 mM | 0.1589 mL | 0.7945 mL | 1.5889 mL | |
| 10 mM | 0.0794 mL | 0.3972 mL | 0.7945 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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