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| 1mg |
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| 靶点 |
I1-imidazoline receptor (primary), alpha2-adrenergic receptor, Monoamine Oxidase A (MAO-A). Harmane-d (harmane-d1) is the deuterium-labeled form of harmane. Harmane is a beta-carboline alkaloid that acts as a high-affinity ligand for the I1-imidazoline receptor (IC50 = 30 nM), with 1000-fold selectivity over the alpha2-adrenergic receptor (IC50 = 18 microM). It is also a reversible and selective inhibitor of monoamine oxidase A (MAO-A). The I1-imidazoline receptor is a non-adrenergic, non-dopaminergic binding site involved in the central regulation of blood pressure, neuroprotection, and other CNS functions. Harmane's interaction with the I1 receptor has implications for hypertension and neuroprotection. The MAO-A inhibition may contribute to its effects on monoamine neurotransmitters (serotonin, norepinephrine, dopamine). Harmane also binds to the benzodiazepine binding site of GABA_A receptors, contributing to its neurotoxic effects (tremor). The deuterium label (d1) does not alter the binding affinity or pharmacological properties of the parent compound. This product is used as an analytical standard.
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| 体外研究 (In Vitro) |
药物化合物中通常包含碳、氢和其他元素的稳定重同位素，主要用作药物研发过程中定量分析的示踪剂。由于氘代可能改变药物的药代动力学和代谢特性，因此备受关注[1]。
体外实验表明，哈尔满（未标记的母体化合物）是I1-咪唑啉受体的高亲和力配体，IC50值为30 nM，对α2-肾上腺素能受体的选择性比其高1000倍（IC50 = 18 uM）。它也是单胺氧化酶A (MAO-A) 的可逆抑制剂。在SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞中，哈尔满（1-100 uM）可抑制MAO-A活性，导致单胺类神经递质水平升高。浓度过高时，哈尔满会诱导神经毒性和细胞凋亡。在大鼠脑突触体中，哈尔满抑制5-羟色胺、多巴胺和去甲肾上腺素的摄取。受体结合实验表明，哈尔满也能与GABAA受体的苯二氮卓类结合位点结合，IC50值在低微摩尔范围内。氘代类似物哈尔满-d通常不用于这些活性测定；它用作质谱分析的内标。因此，目前尚无该标记化合物的具体体外活性数据。未标记的哈尔满也能在动物模型中诱发震颤，并且是致震颤β-咔啉类化合物的组成成分。本实验不使用三氟乙酸盐；所用化合物为游离碱形式的哈尔满-d。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，哈尔满（未标记的母体化合物）是一种强效的致震颤神经毒素。在啮齿动物中，全身给药（腹腔或皮下）哈尔满（5-50 mg/kg）可产生剂量依赖性的动作性震颤（姿势性震颤、运动性震颤），这些震颤是可逆且选择性的。震颤被认为是由哈尔满与GABAA受体苯二氮卓类结合位点结合以及其对下橄榄核神经元的影响介导的。哈尔满还已知会产生其他行为效应，包括焦虑、幻觉和惊吓反应增强。氘代类似物哈尔满-d不用于体内药效研究；它用作药代动力学或毒代动力学研究的内标。当作为示踪剂给药时，哈尔满-d（0.1-1 mg/kg，静脉注射）用于定量分析哈尔满在体内的分布和代谢。该化合物为研究用化学品，不用于治疗用途。哈尔满-d并非药物，而是一种稳定同位素标记的分析标准品。
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| 酶活实验 |
对于非细胞结合实验，可使用大鼠脑膜（额叶皮层、海马）进行 I1-咪唑啉受体的放射性配体结合实验。制备脑膜的方法是：将组织在结合缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.4、5 mM EDTA、1 mM MgCl2）中匀浆。在 96 孔板中，将脑膜（100-200 ug 蛋白）与 1-2 nM [3H]-可乐定（或在 10 uM 萝芙木碱存在下使用 [3H]-伊达唑啉以阻断 α2-肾上腺素能受体）以及不同浓度的未标记哈尔满（0.01-10000 nM）在缓冲液中于 25℃ 孵育 60-90 分钟。在 10 uM 可乐定或 1 uM 依法罗沙（I1 受体拮抗剂）存在下测定非特异性结合。通过预先浸泡在 0.3% 聚乙烯亚胺 (PEI) 中的 GF/B 滤膜快速过滤，分离结合的和游离的放射性配体。通过液体闪烁计数定量结合的放射性。测定 IC50 值，并使用 Cheng-Prusoff 方程计算 Ki 值。哈尔满对 I1 受体的 Ki 值为 30 nM。对于 MAO-A 抑制试验，使用重组人 MAO-A 酶。将酶 (0.1-1 ug) 与不同浓度的哈尔满 (0.1-1000 nM) 在测定缓冲液（100 mM 磷酸钾，pH 7.4）中孵育 15 分钟。加入底物犬尿胺 (50-100 uM)，并孵育 30-60 分钟。用 2 N NaOH 终止反应，将产物（4-羟基喹啉）萃取到环己烷中，并测量荧光强度（激发波长 315 nm，发射波长 380 nm）。计算 IC50 值。如有需要，哈尔满-d 可作为这些测定中的竞争剂，但并非常规做法。
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| 细胞实验 |
对于基于细胞的检测，使用未标记的化合物。哈尔满-d通常不用于细胞活性检测，因为氘标记不会改变活性，但价格更高。作为参考，SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞培养于含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中。将细胞接种于96孔板（5-10 × 10^3个细胞/孔）或6孔板（2-5 × 10^5个细胞/孔）。用哈尔满（0.1-1000 uM）处理24-72小时。细胞活力检测采用MTT或CellTiter-Glo试剂盒。哈尔满在浓度>50 uM时表现出细胞毒性。对于细胞中MAO-A活性的检测，处理细胞24小时后，洗涤、裂解细胞，并使用荧光MAO检测试剂盒（例如Abcam）测定MAO-A活性。单胺类神经递质的测定方法为：处理细胞4-24小时，然后裂解细胞，并通过高效液相色谱-电化学检测法（HPLC-ECD）或酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清素、多巴胺和去甲肾上腺素的含量。哈尔满可通过抑制MAO-A来提高单胺类神经递质的水平。对于活细胞受体结合试验，应使用表达I1-咪唑啉受体的细胞（例如，天然表达I1位点的PC12细胞）。将细胞与[3H]-可乐定和不同浓度的哈尔满在4℃下孵育60分钟，洗涤后定量结合的放射性。哈尔满-d可作为示踪剂用于摄取或分布研究，方法是将其添加到细胞中，并通过液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定细胞内浓度。然而，这并非标准方案。此处不使用三氟乙酸盐，而是使用游离碱形式。哈尔满-d (d1) 是一种分析标准品，而非用于细胞药理学试验的工具。
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| 动物实验 |
在体内研究中，哈尔满-d 不作为药理活性物质使用；它用作哈尔满 LC-MS/MS 生物分析中的内标。在哈尔满的药代动力学研究中，CD-1 小鼠或 Sprague-Dawley 大鼠腹腔注射哈尔满（5-10 mg/kg）或哈尔满-d（作为示踪剂）。分别于给药后 0、5、15、30、60、120、240 和 480 分钟采集血液。取 50 μL 血浆与含有已知浓度哈尔满-d（作为内标）的乙腈混合。蛋白质沉淀后，取上清液，采用正离子电喷雾模式进行 LC-MS/MS 分析（哈尔满的 MRM 跃迁：m/z 183.1 → 115.1；哈尔满-d 的 MRM 跃迁：m/z 184.1 → 116.1）。样品中哈尔满的含量通过校准曲线（在空白血浆中制备的哈尔满标准品）计算得出，计算方法为哈尔满峰面积与哈尔满-d峰面积的比值。计算药代动力学参数（AUC、Cmax、Tmax、t1/2、CL、Vd）。这是氘代化合物的主要体内应用。对于分布研究，采集组织（脑、肝、肾、肺），进行匀浆处理，并以类似方式进行后续处理。哈尔满-d不用于疗效研究（例如，震颤测量）。所有动物实验均需获得机构动物护理和使用委员会（IACUC）的批准。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
作为内标，哈尔满-d在药代动力学研究中并非用于测定其自身的药代动力学性质，而是用于定量未标记的哈尔满。然而，由于单个氘原子的动力学同位素效应（KIE）极小，其药代动力学性质预计与哈尔满基本相同。哈尔满（以及由此衍生的哈尔满-d）是一种亲脂性小分子（分子量183.23）β-咔啉生物碱。腹腔或皮下注射后可迅速吸收，血浆峰浓度（Cmax）在15-30分钟内达到（Tmax）。啮齿动物的血浆半衰期（t1/2）估计为1-3小时。由于其亲脂性（logP ~1.5-2.5），它能够穿过血脑屏障（BBB）。哈尔满-d主要在肝脏中通过细胞色素P450酶（CYP2A6、CYP2D6、CYP1A2）进行广泛的代谢，包括N-氧化、O-去甲基化和芳香族羟基化。代谢产物经尿液和胆汁排泄。血浆蛋白结合率为中等至高（约80-90%）。氘标记稳定，在生理条件下不会还原为氢。哈尔满-d是一种分析标准品，不适用于体内治疗。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无关于氘代哈尔满（Harmane-d，即氘标记的哈尔满）的具体毒性数据。未标记的母体化合物哈尔满的毒性特征已有充分记载。哈尔满是一种强效神经毒素，在啮齿动物中，剂量为 5-50 mg/kg 时可引起严重的动作性震颤和精神症状（幻觉、焦虑）。震颤具有剂量依赖性且可逆。在高剂量（>50 mg/kg）下，哈尔满可引起惊厥、呼吸抑制甚至死亡。长期接触哈尔满与特发性震颤、帕金森病和某些癌症的风险增加有关。体外实验表明，浓度 >50 μM 的哈尔满对神经母细胞瘤细胞具有细胞毒性。由于同位素取代不改变其药理活性，因此预计氘代类似物（哈尔满-d）具有相同的毒性特征。然而，由于氘代化合物仅用作分析标准，且用量极少（毫克级），因此接触到毒性水平的风险很低。鉴于哈尔满-d具有神经毒性，处理时应采取标准的实验室安全防护措施（戴手套、穿实验服、使用通风橱）。该化合物仅供研究使用，未经批准用于人体。本产品不使用三氟乙酸盐，而是游离碱。
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| 参考文献 |
[1]. Russak EM, et al. Impact of Deuterium Substitution on the Pharmacokinetics of Pharmaceuticals. Ann Pharmacother. 2019;53(2):211-216.
[2]. Louis ED, et, al. Blood harmane concentrations and dietary protein consumption in essential tremor. Neurology. 2005 Aug 9;65(3):391-6. [3]. Musgrave IF, et, al. Harmane produces hypotension following microinjection into the RVLM: possible role of I(1)-imidazoline receptors. Br J Pharmacol. 2000 Mar;129(6):1057-9. [4]. Glover V, et, al. β-Carbolines as selective monoamine oxidase inhibitors:In vivo implications [5]. Umezawa K, et, al. Comutagenic effect of norharman and harman with 2-acetylaminofluorene derivatives. Proc Natl Acad Sci U S A. 1978 Feb;75(2):928-30. |
| 其他信息 |
哈尔满（哈尔曼或1-甲基-β-咔啉）是一种天然存在的β-咔啉生物碱，存在于多种植物、咖啡和熟肉（尤其是全熟肉）中。它是美拉德反应的产物，也存在于烟草烟雾中。哈尔满是一种强效神经毒素，可诱发动物动作性震颤，并与人类特发性震颤（ET）的病理生理机制有关。它也是I1-咪唑啉受体的高亲和力配体（IC50 = 30 nM）和单胺氧化酶A（MAO-A）的可逆性抑制剂。哈尔满曾因其通过I1受体发挥潜在的神经保护作用而受到研究，但其致震颤和致精神病作用限制了其治疗潜力。氘标记的哈尔满（Harmane-d，Harmane-d1）用作液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）定量生物样品中哈尔满的内标，例如在临床研究中测量血浆、尿液和脑组织中的哈尔满水平。本产品并非药物，而是一种稳定同位素标记的研究试剂。截至2026年，哈尔满尚未获批上市。Harmane-d仅供研究使用，不得用于人类或兽医用途。
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| 分子式 |
C12H9DN2
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| 分子量 |
183.23
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| 相关CAS号 |
Harmane;486-84-0;Harmane-d2
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~50 mg/mL (~272.88 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 5.4576 mL | 27.2881 mL | 54.5762 mL | |
| 5 mM | 1.0915 mL | 5.4576 mL | 10.9152 mL | |
| 10 mM | 0.5458 mL | 2.7288 mL | 5.4576 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Hydroxylamine (50% w/w in water)
BChE/MAO-B-IN-2
MAO-B-IN-48
MAO-B-IN-46
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