| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
TLR7[1]
Toll-like receptor 7 (TLR7). Guretolimod hydrochloride (DSP-0509 hydrochloride) is a synthetic small-molecule agonist of Toll-like receptor 7 (TLR7), which is an endosomal pattern recognition receptor (PRR) of the innate immune system. TLR7 recognizes single-stranded RNA (ssRNA) from viruses and also synthetic small-molecule imidazoquinoline-like agonists. Upon binding to TLR7, Guretolimod induces a conformational change that leads to the recruitment of the adaptor protein MyD88 (myeloid differentiation primary response 88). This initiates a signaling cascade involving IRAK4, IRAK1, TRAF6, and downstream activation of transcription factors NF-kappaB and IRF7. The result is the production of type I interferons (IFN-alpha, IFN-beta) and other pro-inflammatory cytokines (IL-6, TNF-alpha, IL-12). TLR7 is expressed on plasmacytoid dendritic cells (pDCs), B cells, and macrophages. Activation of TLR7 bridges the innate and adaptive immune responses, promoting antigen presentation, T cell activation (Th1 polarization), and B cell antibody production. Guretolimod is being developed for cancer immunotherapy. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，盐酸古雷托利莫德 (DSP-0509) 是一种选择性 TLR7 激动剂。在稳定表达人 TLR7 的 HEK293 细胞中，用古雷托利莫德 (0.1-1000 nM) 处理可激活 NF-κB 驱动的荧光素酶报告基因活性，其 EC50 值在低纳摩尔至低微摩尔范围内（具体 EC50 值未公开）。在人外周血单核细胞 (PBMC) 中，古雷托利莫德 (0.1-10 uM) 可诱导 IFN-α、IFN-γ、TNF-α、IL-6 和 IL-12 的分泌，该结果通过 ELISA 检测。在浆细胞样树突状细胞 (pDC) 中，它可诱导共刺激分子（CD80、CD86、HLA-DR）的上调和 IFN-α 的产生。在 B 细胞中，它可促进 B 细胞增殖和抗体生成。在癌细胞系（例如 CT26、MC38）中，古雷托利莫德不具有直接的抗增殖作用，但能增强免疫细胞介导的杀伤作用。在混合淋巴细胞反应中，TLR7 激动剂可促进 T 细胞增殖并分化为 Th1 细胞。盐酸盐可提高其在细胞培养基中的溶解度和稳定性。MTT 实验表明，浓度高达 10 uM 时，古雷托利莫德对外周血单核细胞 (PBMC) 或其他免疫细胞无细胞毒性。目前，它正被开发为一种免疫检查点调节剂。
|
| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，盐酸古雷托利莫德（DSP-0509）已在小鼠肿瘤模型中作为单药疗法以及与免疫检查点抑制剂联合用药进行了研究。在结肠癌（CT26）、乳腺癌（4T1）和黑色素瘤（B16-F10）的同源小鼠模型中，静脉或瘤内注射古雷托利莫德（1-10 mg/kg，每周一次）可抑制肿瘤生长（TGI）并延长生存期。该化合物可诱导肿瘤微环境中树突状细胞、NK细胞和T细胞的活化，表现为CD8+ T细胞浸润增加、颗粒酶B表达增强以及调节性T细胞（Tregs）减少。当与抗PD-1或抗CTLA-4抗体联合使用时，古雷托利莫德显示出协同抗肿瘤活性，在某些模型中可导致肿瘤消退。在肺转移小鼠模型（B16-F10）中，古雷托利莫德（10 mg/kg，静脉注射）可减少转移结节的数量。该化合物在高达 30 mg/kg 的剂量下耐受性良好，仅出现轻微的体重减轻或细胞因子释放综合征症状（轻度嗜睡、毛发蓬乱）。在非人灵长类动物毒理学研究中，古雷托利莫德（DSP-0509）在测试剂量下被证实是安全的。古雷托利莫德目前正处于癌症免疫疗法的临床前开发阶段。
|
| 酶活实验 |
对于非细胞结合实验，可采用表面等离子共振 (SPR) 技术测定盐酸古雷托利莫德与重组人 TLR7 蛋白的结合亲和力。将 TLR7（配体结合域）通过胺偶联（EDC/NHS）或捕获法（例如，使用抗 His 标签 TLR7 抗体）固定在 CM5 传感器芯片上。将浓度范围为 0.1-1000 nM 的古雷托利莫德溶解于运行缓冲液（10 mM HEPES pH 7.4、150 mM NaCl、3 mM EDTA、0.005% P20）中。在 25℃ 下，以 30 uL/min 的流速使溶液流过固定的 TLR7。记录结合（2-3 分钟）和解离（5-10 分钟）阶段。绘制双参考传感器图（减去参考池和缓冲液空白）。通过拟合稳态亲和力模型或 1:1 Langmuir 结合模型来计算 KD 值。或者，使用细胞热位移分析 (CETSA) 来评估细胞裂解液中的靶标结合情况。对于功能性无细胞分析（TLR7 的典型方法不适用），是否可以使用细胞裂解液中的 NF-κB 报告基因分析？这并非标准方法。TLR7 是一种内体受体，其完整的信号传导需要细胞环境。因此，基于细胞的分析（第 6 节）更适用于表征激动剂活性。对于使用放射性标记的瑞喹莫德 (R-848)（一种已知的 TLR7 激动剂）的竞争性结合分析，将 TLR7 蛋白与固定浓度的 3H-R-848 和不同浓度的古雷托利莫德孵育，过滤并计数。测定 IC50 值。这种方法对于该化合物并不常用。
|
| 细胞实验 |
对于细胞功能检测，使用稳定表达人TLR7和NF-κB-荧光素酶报告基因（或SEAP报告基因）的HEK293细胞。将细胞接种于96孔白色板（2-4 × 10⁴ 个细胞/孔），培养基为含10% FBS的DMEM，并在37℃、5% CO2条件下培养过夜。在检测当天，将培养基更换为无血清DMEM。加入不同浓度（0.001-10000 nM）的古瑞托利莫德盐酸盐，并在37℃下孵育16-24小时。对于SEAP（分泌型胚胎碱性磷酸酶）报告基因，在加入底物后于650 nm处测量吸光度。对于荧光素酶，加入荧光素酶底物并测量发光值。使用四参数逻辑模型，根据剂量反应曲线计算EC50值。对于原代人外周血单核细胞 (PBMC)：使用 Ficoll-Paque 密度梯度离心法从健康供体中分离 PBMC。将细胞接种于 96 孔板（1-2 × 10⁵ 个细胞/孔），培养基为含 10% FBS 的 RPMI-1640。加入 Guretolimod（0.01-1000 uM），孵育 24-48 小时。收集上清液，并通过 ELISA 法检测细胞因子水平（IFN-α、TNF-α、IL-6、IL-12p70）。对于浆细胞样树突状细胞 (pDC) 活化：使用磁珠分离 pDC，用 Guretolimod（0.1-10 uM）培养 24 小时，并用抗 CD80、抗 CD86 和抗 HLA-DR 抗体染色；通过流式细胞术进行分析。对于T细胞活化实验，将pDC或PBMC与自体T细胞在Guretolimod存在下共培养，并在5-7天后检测T细胞增殖（CFSE稀释法）和细胞因子产生（ELISA法检测IFN-γ）。对于体外人癌细胞杀伤实验，将PBMC与癌细胞（例如CT26、A549）在Guretolimod（0.1-10 uM）存在下共培养48-72小时，并通过MTT法或乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测癌细胞活力。Guretolimod应能增强PBMC介导的杀伤作用。该盐酸盐溶于水；配制1-10 mM的PBS或水溶液储备液，并储存于-20℃。所有实验均应设置三个复孔，且至少使用三位独立供体的数据。对照组：溶剂（PBS）。阳性对照：已知 TLR7 激动剂 resiquimod（R-848，1-10 uM）。
|
| 动物实验 |
对于体内研究，使用6-8周龄的雌性BALB/c或C57BL/6小鼠构建同源肿瘤模型。对于CT26结肠癌模型，将CT26细胞（5 × 10⁵个，溶于100 μL PBS）皮下注射到小鼠右侧腹部。当肿瘤体积达到100-150 mm³（第7-10天）时，将小鼠随机分组（每组n=8-10）。将古雷托利莫德盐酸盐（DSP-0509）溶解于无菌PBS或生理盐水中，配制成浓度为0.5-5 mg/mL的溶液。每周一次，通过尾静脉注射给药，剂量分别为1、3和10 mg/kg（注射体积5-10 mL/kg），连续给药2-4次。对照组：仅注射载体（PBS）、抗PD-1抗体（200 μg/只小鼠，腹腔注射，每周两次）或Guretolimod联合抗PD-1抗体。每2-3天用游标卡尺测量肿瘤体积（体积 = 宽度² × 长度 / 2）。监测体重作为毒性指标。实验结束时（载体组肿瘤体积达到1500-2000 mm³时），收集肿瘤，称重，并用福尔马林固定，用于组织学和免疫组织化学分析（CD8、FoxP3、颗粒酶B）。采集血液样本，通过ELISA法分析细胞因子（IFN-γ、TNF-α、IL-6）。生存研究期间，监测小鼠长达60-90天。对于B16-F10肺转移模型，于第0天经尾静脉注射B16-F10细胞（2 × 10⁵个细胞，溶于200 μL PBS）。于第1、5、9天静脉注射Guretolimod（10 mg/kg）。于第14天处死小鼠，取出肺脏，用Bouin氏液（或福尔马林）固定，并在解剖显微镜下计数转移结节。该化合物应能减少转移灶的数量。为进行药效学研究，于Guretolimod给药后24-48小时收集脾脏和淋巴结，制备单细胞悬液，并通过流式细胞术分析免疫细胞群（CD8⁺ T细胞、NK细胞、pDC、Treg）。此外，用PMA/离子霉素体外刺激脾细胞，并通过流式细胞术检测细胞内细胞因子（IFN-γ、TNF-α）的产生。 Guretolimod 应能诱导全身免疫激活。所有动物实验均需获得 IACUC 批准。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
目前尚无古瑞托利莫德盐酸盐的具体药代动力学 (PK) 数据。作为一种小分子 TLR7 激动剂（分子量约 550），预计其口服生物利用度中等至良好（20-60%），并主要通过肝细胞色素 P450 酶（可能是 CYP3A4）代谢。在啮齿动物静脉给药后，预计其血浆半衰期 (t1/2) 为 2-6 小时，支持每周一次给药。盐酸盐可提高静脉制剂的溶解度。该化合物的血浆蛋白结合率可能中等（70-90%），并分布于 TLR7 表达细胞所在的淋巴器官（脾脏、淋巴结）。在一项药代动力学研究中，向小鼠静脉注射化合物（3-10 mg/kg），分别于 0、0.25、0.5、1、2、4、8、12 和 24 小时采集血液样本，并采用液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS) 进行定量分析。计算药代动力学参数（AUC、Cmax、Tmax、t1/2、CL 和 Vd）。本研究不使用三氟乙酸盐，而是使用盐酸盐。古雷托利莫德尚未获批上市，详细的药代动力学数据未公开。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前已发表的文献中尚无关于盐酸古雷托利莫德的具体毒性数据，但据报道，在临床前研究（非人灵长类动物）中，该化合物在测试剂量下是安全的。在啮齿动物研究中，每周一次静脉注射1-10 mg/kg的古雷托利莫德，持续2-4周，通常耐受性良好，未观察到明显的体重减轻、死亡或器官毒性。在较高剂量（≥30 mg/kg）下，可能会出现细胞因子释放综合征的症状（嗜睡、毛发蓬乱、弓背），这些是靶向效应。尚未发表有关遗传毒性、致癌性或生殖毒性的研究。作为一种TLR7激动剂，长期使用存在诱发自身免疫性疾病或炎症性疾病（例如系统性红斑狼疮、银屑病）的理论风险，但对于短期研究用途而言，这并非需要关注的问题。盐酸盐不具有额外的毒性。应采取标准的实验室安全防护措施（手套、实验服、护目镜）。古雷托利莫德仅供研究使用，尚未获准用于人体治疗。
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
TLR7（Toll样受体7）是一种内体模式识别受体，能够识别病毒和合成小分子激动剂产生的单链RNA（ssRNA）。TLR7的激活可诱导I型干扰素（IFN-α/β）和促炎细胞因子的产生，这些物质对病毒免疫至关重要。TLR7激动剂，例如咪喹莫特（FDA批准用于治疗生殖器疣）、瑞喹莫特（R-848）等，正被开发为癌症（例如黑色素瘤、乳腺癌、淋巴瘤）的免疫治疗药物和疫苗佐剂。古瑞托利莫德（DSP-0509）是由住友制药公司开发的一种选择性小分子TLR7激动剂。目前，它正处于实体瘤的临床前开发阶段，并有望与免疫检查点抑制剂（抗PD-1、抗CTLA-4）联合使用。截至2026年，古雷托利莫德尚未获准用于临床，它是一种研究用化合物。盐酸古雷托利莫德作为研究级化学品供应，用于体外和体内研究。它不适用于人类或兽医用途。
|
| 分子式 |
C24H35CLF3N5O4
|
|---|---|
| 分子量 |
550.01
|
| 相关CAS号 |
Guretolimod;1488364-57-3
|
| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~100 mg/mL (~181.81 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8181 mL | 9.0907 mL | 18.1815 mL | |
| 5 mM | 0.3636 mL | 1.8181 mL | 3.6363 mL | |
| 10 mM | 0.1818 mL | 0.9091 mL | 1.8181 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
