Guanosine-5'-monophosphate-15N5 sodium

目录号: V76950 纯度: ≥98%
鸟苷-5'-单磷酸-15N5(钠)是 15N(氮 15)标记的鸟苷-5'-单磷酸钠。
Guanosine-5'-monophosphate-15N5 sodium 产品类别: Isotope-Labeled Compounds
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
鸟苷-5'-单磷酸-15N5(钠)是 15N(氮 15)标记的鸟苷-5'-单磷酸钠。
鸟苷-5'-单磷酸-15N5钠盐是鸟苷-5'-单磷酸(GMP)二钠盐的稳定同位素标记(15N,氮-15)版本。该化合物含有五个15N原子(15N5),分别掺入嘌呤环和鸟嘌呤碱基的氨基中。这种重氮标记使其质量相对于未标记的GMP增加了5 Da,使其成为基于液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)定量生物样品中GMP和其他核苷酸的理想内标。GMP是一种核糖核苷酸,是RNA的单体单元,也是cGMP(环鸟苷酸环化酶)的前体,参与细胞信号传导。该化合物以钠盐形式提供,是研究级分析标准品。
生物活性&实验参考方法
靶点
None (analytical internal standard). Guanosine-5'-monophosphate (GMP) is a naturally occurring nucleotide that serves as a building block for RNA and is a precursor for the synthesis of cyclic GMP (cGMP), a key second messenger involved in various physiological processes, including vasodilation, neurotransmission, and platelet aggregation. The stable isotope-labeled version, Guanosine-5'-monophosphate-15N5 sodium, is not pharmacologically active; it is a stable isotope-labeled internal standard for quantitative mass spectrometry. It does not have a specific biological target (receptor or enzyme) for pharmacological modulation. The 15N labeling does not alter the chemical properties of GMP significantly, but it changes the mass, allowing it to be distinguished from the endogenous unlabeled GMP in LC-MS/MS analysis. The compound is used to quantify GMP and other nucleotides in complex biological matrices.
体外研究 (In Vitro)
药物化合物中通常包含碳、氢和其他元素的稳定重同位素,主要用作药物研发过程中定量分析的示踪剂。由于氘代可能改变药物的药代动力学和代谢特性,因此备受关注[1]。
不适用。鸟苷-5'-单磷酸-15N5钠是一种稳定同位素标记的内标,不用于生物活性测定,例如测量酶抑制或细胞增殖。未标记的GMP是一种内源性代谢物,也是多种酶的底物,包括鸟苷酸激酶(将GMP转化为GDP)、核苷酸酶(将GMP去磷酸化为鸟苷)和鸟苷酸环化酶(将GTP转化为cGMP)。然而,由于标记后的GMP与未标记的GMP化学性质相同(仅同位素取代不同),因此通常不用于研究这些酶。一些研究人员可能会将其用作代谢通量研究中的示踪剂。例如,可以将细胞培养在含有15N标记前体的培养基中,并通过质谱法测量15N掺入GMP的量,以研究嘌呤从头合成。然而,这并非标准的活性测定方法。体外酶活性测定中使用的是未标记的GMP。因此,目前尚无该化合物的具体体外活性数据。
体内研究 (In Vivo)
不适用。鸟苷-5'-单磷酸-15N5钠是液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)的内标,不用于动物疗效研究。它不作为治疗药物使用。虽然它可以作为示踪剂用于动物以测量核苷酸周转率,但这并非标准方案。在此类研究中,标记化合物(例如,1-10 mg/kg,静脉注射)会被注射到大鼠或小鼠体内,并在不同时间点采集血液或组织样本,通过LC-MS/MS测量15N-GMP的富集度。然而,目前尚无针对该产品的此类研究发表。该化合物仅供研究使用,不可用于体内疗效研究。
酶活实验
不适用。鸟苷-5'-单磷酸-15N5钠用作液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)核苷酸分析方法中的内标,而非用于非细胞结合实验。然而,如果需要进行结合实验(例如,GMP与鸟苷酸激酶或GMP结合蛋白等蛋白质的结合),则该标记化合物可用作竞争性结合实验中的示踪剂。例如,可以设置荧光偏振或放射性配体结合实验,使用固定浓度的未标记GMP和固定浓度的标记GMP(反之亦然),并在分离后测量其与蛋白质的结合情况。但是,这些并非该产品的标准操作规程。该产品的主要用途是分析。对于 LC-MS/MS 方法验证:在空白基质(例如血浆、尿液、组织匀浆)中制备校准标准品和质控样品,方法是向样品中添加已知浓度的未标记 GMP 和固定浓度的 15N5 标记内标(例如 10-100 ng/mL)。使用乙腈沉淀蛋白质或固相萃取 (SPE) 处理样品。将提取物注入配备 C18 色谱柱的 LC-MS/MS 系统。流动相:0.1% 甲酸水溶液 (A) 和乙腈 (B)。对于 GMP,典型的 MRM 转换:未标记 GMP:m/z 364 → 152(或 364 → 79,364 → 97)。对于 15N5-GMP:m/z 369 → 152(或 369 → 84 等)。使用峰面积比(分析物/内标)进行定量。线性范围通常为0.1-1000 ng/mL。这不是结合测定。
细胞实验
不适用。鸟苷-5'-单磷酸-15N5钠不用于基于细胞的生物活性测定。它可以作为核苷酸代谢研究的示踪剂添加到细胞培养基中。例如,将细胞(例如肝细胞、癌细胞)在含有15N5标记的GMP(0.1-10 uM)的培养基中培养1-24小时。然后,用冷甲醇提取细胞内核苷酸,并通过LC-MS/MS测定15N掺入GMP、GDP、GTP和其他核苷酸的情况。这可用于研究核苷酸的周转和转化途径。然而,这并非标准的生物活性(例如细胞毒性或酶抑制)测定方法。未标记的GMP在浓度高达100 uM时不具有细胞毒性。因此,未提供详细的实验方案。对于有兴趣将该化合物用作示踪剂的研究人员,可将其直接添加到细胞培养基中,最终浓度为 1-10 uM(由 1-10 mM 的水溶液储备液配制而成),然后进行细胞处理。所有实验均应包含适当的对照(例如,不添加标记化合物)。该化合物在培养基中可稳定保存长达 24 小时。
动物实验
不适用。鸟苷-5'-单磷酸-15N5钠不用于动物疗效研究。它可用于药代动力学研究,作为内标定量未标记的GMP(如果GMP作为药物给药),或作为代谢研究的示踪剂。在示踪剂研究中,将溶于PBS的15N5-GMP(1-10 mg/kg)静脉注射到大鼠(n=3)体内。分别于0、2、5、10、15、30、60和120分钟采集血液样本,并通过LC-MS/MS测定血浆中15N5-GMP的浓度。根据这些数据,可以计算药代动力学参数(t1/2、CL、Vd、AUC)。然而,这不是疗效研究,而是药代动力学研究。该化合物并非治疗药物,也没有可用于评估其疗效的体内动物实验方案。本产品仅供研究使用。
药代性质 (ADME/PK)
不适用。鸟苷-5'-单磷酸-15N5钠是一种稳定同位素标记的内标,而非药物。因此,由于其用作分析工具,通常不测定该标记化合物本身的药代动力学参数。然而,如果以示踪剂量给药,其药代动力学与未标记的GMP相同。未标记的GMP静脉给药后,由于胞外核苷酸酶的快速水解和肾脏清除,会迅速从循环中清除,血浆半衰期为数分钟(可能为5-15分钟)。GMP的血浆浓度通常非常低(纳摩尔级)。该标记化合物稳定,不会发生同位素交换。该钠盐可溶于水。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
目前尚无鸟苷-5'-单磷酸-15N5钠的具体毒性数据。GMP(未标记)是一种天然存在的核苷酸,通常被认为是安全的(GRAS),可用作食品添加剂(增味剂)。15N同位素无放射性且稳定,将其掺入GMP中不会改变其毒性特征。体外实验表明,GMP(浓度高达10 mM)对大多数细胞系无细胞毒性。体内实验表明,GMP的急性毒性极低(啮齿动物LD50 > 2 g/kg)。该化合物不具有遗传毒性、致癌性或致畸性。使用时应采取标准的实验室安全防护措施(佩戴手套、穿实验服)。本产品仅供研究使用,不得用于人类或兽医用途。
参考文献

[1]. Impact of Deuterium Substitution on the Pharmacokinetics of Pharmaceuticals. Ann Pharmacother. 2019 Feb;53(2):211-216.

其他信息
鸟苷-5'-单磷酸 (GMP) 是一种核糖核苷酸,是 RNA 的组成单元,也是环磷酸鸟苷 (cGMP) 合成的前体。cGMP 是一氧化氮 (NO) 和利钠肽信号通路中的第二信使。GMP 也可用作食品添加剂(增味剂,E 编号 E626)。稳定同位素标记的 GMP(例如 15N5、13C10、15N5 或 13C10,15N5)可用作生物样品中核苷酸定量液相色谱-串联质谱 (LC-MS/MS) 分析的内标。这在代谢组学、生物标志物发现和临床研究中至关重要。使用钠盐是为了提高溶解度和稳定性。鸟苷-5'-单磷酸-15N5 钠并非药物,而是用于质谱分析的研究级标准品。它仅供研究使用,不得用于人类或兽医用途。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C10H1215N5NA2O8P
分子量
412.15
外观&性状
White to off-white solid powder
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.4263 mL 12.1315 mL 24.2630 mL
5 mM 0.4853 mL 2.4263 mL 4.8526 mL
10 mM 0.2426 mL 1.2132 mL 2.4263 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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