Glycerophosphoric acid disodium salt hydrate (α and β mixture)

目录号: V76968 纯度: ≥98%
甘油磷酸(二钠盐水合物)是含有两种异构体α-和β-甘油磷酸的复合物。
Glycerophosphoric acid disodium salt hydrate (α and β mixture) 产品类别: Others 13
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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500mg
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产品描述
甘油磷酸(二钠盐水合物)是一种含有两种异构体(α-甘油磷酸和β-甘油磷酸)的复合物。
甘油磷酸二钠盐水合物(alpha和beta混合物)是一种生化试剂,由alpha-甘油磷酸和beta-甘油磷酸两种异构体混合而成,以二钠盐水合物的形式供应。它是一种内源性代谢产物,也是一种含磷酸盐的有机化合物。该产品广泛应用于细胞生物学、组织工程和生物化学研究,可用作磷酸盐来源、缓冲组分或酶促反应的底物。beta-甘油磷酸常用于成骨分化培养基中以促进矿化。水合物形式表明其晶体结构中存在水分子。本产品并非药物,而是一种实验室试剂。
生物活性&实验参考方法
靶点
None (biochemical reagent). Glycerophosphoric acid (also known as glycerophosphate) is a phosphorylated glycerol derivative. It is an endogenous metabolite involved in phospholipid metabolism and energy metabolism. It serves as a precursor for phospholipid synthesis (e.g., phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine) and is also a component of the glycerol phosphate shuttle, which transfers reducing equivalents from cytosolic NADH into mitochondria. As a disodium salt, it provides sodium ions and phosphate groups. In research, beta-glycerophosphate is widely used as a source of inorganic phosphate in cell culture media, especially to induce differentiation and mineralization of osteoblasts, chondrocytes, and mesenchymal stem cells. The alpha and beta isomers differ in the position of the phosphate group on the glycerol backbone. The alpha isomer has the phosphate on the primary carbon, while the beta isomer has the phosphate on the secondary carbon. This product does not target any specific receptor or enzyme in a pharmacological sense; it is a simple chemical reagent.
体外研究 (In Vitro)
在体外,β-甘油磷酸酯(该混合物的主要成分)是成骨分化培养基的标准成分。浓度为5-10 mM时,它可提供一种有机磷酸盐来源,经碱性磷酸酶(ALP)水解后释放出无机磷酸盐。释放的磷酸盐与钙离子结合形成磷酸钙沉积物,导致细胞外基质矿化,这可通过茜素红S染色或冯·科萨染色证实。β-甘油磷酸酯单独使用不能诱导成骨细胞分化;通常与抗坏血酸(50-100 ug/mL)和地塞米松(10-100 nM)联合使用。在软骨细胞培养中,β-甘油磷酸酯(5-10 mM)用于促进肥大分化过程中软骨基质的矿化。α-甘油磷酸酯和β-甘油磷酸酯的混合物可能具有相似的活性,但β-甘油磷酸酯是分化培养基中更常见的异构体。该化合物还可用作碱性磷酸酶活性测定的底物;与碱性磷酸酶 (ALP) 孵育后,会释放无机磷酸盐,可通过比色法测定。甘油磷酸也可作为代谢组学研究的标准品。其二钠盐和水合物形式不影响其生化活性。
体内研究 (In Vivo)
不适用(生化试剂)。甘油磷酸二钠盐水合物并非设计用于体内治疗。它是一种实验室试剂,用于细胞培养和生化分析。全身给药(例如静脉注射)时,甘油磷酸可作为磷酸盐来源,但这并非该研究级产品的预期用途。由于它并非候选药物,因此目前尚无关于其在动物疾病模型中体内疗效的研究报道。该化合物作为食品添加剂通常被认为是安全的(GRAS),但未获准用于任何医疗用途。动物体内应用(例如磷酸盐替代疗法)时,应使用临床级磷酸盐,而非研究级甘油磷酸。因此,该产品作为“药物”尚无体内活性数据。
酶活实验
不适用。甘油磷酸二钠盐水合物是一种简单的有机盐,通常不用作受体或酶结合测定中的配体。然而,它可以作为碱性磷酸酶 (ALP) 等酶活性测定的底物。ALP 活性测定方法如下:在 96 孔板中加入测定缓冲液(100 mM 甘氨酸-NaOH,pH 10.4,1 mM MgCl2)。加入系列稀释的甘油磷酸溶液(0.5-20 mM),并加入纯化的 ALP(0.1-1 U/mL)以启动反应。反应混合物在 37℃ 下孵育 15-30 分钟。使用孔雀绿磷酸盐测定法或商业试剂盒(例如 QuantiChrom)测定生成的无机磷酸盐。简而言之,将50 uL反应上清液与100 uL孔雀绿试剂混合,孵育10分钟,并在620 nm处读取吸光度。使用磷酸盐标准品(0.1-5 mM)绘制标准曲线进行定量。可使用Lineweaver-Burk作图法确定ALP对甘油磷酸的Km和Vmax值。或者,使用荧光底物(例如4-甲基伞形酮磷酸酯)灵敏度更高,但甘油磷酸不适用于荧光检测。目前尚无针对与其他蛋白质或酶结合的特定方案。该化合物并非任何已知受体的高亲和力配体;它是一种底物或代谢物。
细胞实验
在细胞培养研究中,β-甘油磷酸酯(作为α/β混合物的成分)的主要用途是诱导成骨分化。间充质干细胞(MSCs)、成骨细胞(例如MC3T3-E1)或其他细胞类型以1-3 × 10⁴ 个细胞/cm2的密度接种于6孔或24孔板中,培养基为生长培养基(α-MEM或DMEM,含10% FBS、100 U/mL青霉素和100 ug/mL链霉素)。当细胞汇合度达到70-80%时(通常在第2-3天),将培养基更换为成骨分化培养基,其中含有:5-10 mM β-甘油磷酸酯(来自α/β混合物)、50-100 ug/mL抗坏血酸和10-100 nM地塞米松(可选)。对照组培养的细胞使用不含成骨诱导剂的培养基。细胞培养7-28天,每2-3天更换一次培养基。采用茜素红S染色法评估矿化情况:细胞用4%甲醛固定15分钟,用水洗涤,然后在室温下用40 mM茜素红S(pH 4.2)染色20分钟。洗涤后,用10%氯化十六烷基吡啶脱色1小时,并通过562 nm处的吸光度进行定量。或者,也可以使用von Kossa染色法检测磷酸盐沉积。碱性磷酸酶 (ALP) 活性测定方法为:向细胞中加入 0.1% Triton X-100,然后将裂解液与对硝基苯磷酸酯 (pNPP) 在 ALP 缓冲液(100 mM 甘氨酸,1 mM MgCl2,pH 10.4)中于 37℃ 孵育 30 分钟;测定 405 nm 处的吸光度。细胞活力测定:该化合物在 5-10 mM 浓度下无细胞毒性;较高浓度 (50-100 mM) 可能引起渗透压应激。细胞增殖测定 (MTT):将细胞用不同浓度 (0-50 mM) 的化合物处理 24-72 小时。该产品为水溶性;配制 0.5-1 M 的储备液,过滤除菌后于 4℃ 保存。加入甘油磷酸钠后,应将培养基的 pH 值调节至 7.4。软骨细胞分化:将软骨细胞团培养于含 5-10 mM β-甘油磷酸钠的无血清培养基中 14-21 天,然后用阿利新蓝或番红 O 染色以检测糖胺聚糖。α 异构体可能具有不同的活性;但通常直接使用混合物。所有实验均应设置三个复孔。
动物实验
不适用(体外试剂)。甘油磷酸二钠盐水合物不作为药物用于动物研究;然而,β-甘油磷酸酯(活性异构体)可在研究中作为磷酸盐来源或用于研究磷酸盐对矿化作用的影响而施用于动物。典型的异位骨化(异位骨形成)体内研究:将C57BL/6小鼠麻醉,并将重组人骨形态发生蛋白2 (rhBMP-2,5 μg) 与10 mM β-甘油磷酸酯(来自该混合物)的混合物植入胶原支架中,然后进行肌肉内注射(例如,植入大腿)。2-4周后,取出植入物,固定,并通过微型CT和组织学(苏木精-伊红染色、茜素红S染色)分析矿化组织的形成情况。然而,这并非给药方案;该化合物仅作为植入物的组成部分使用。对于全身性磷酸盐补充(例如,在低磷血症模型中),甘油磷酸酯很少使用;无机磷酸盐是首选。因此,目前尚无针对该产品作为“药物”的详细体内动物实验方案。该化合物仅供研究使用,不得用于动物治疗。
药代性质 (ADME/PK)
不适用。甘油磷酸二钠盐水合物并非药物,目前尚无该化合物在药物研发方面的药代动力学数据。作为一种简单的有机磷酸盐,它易溶于水,预计不会与血浆蛋白结合,静脉给药后可迅速经肾脏清除。β-甘油磷酸酯是其代谢产物,可被碱性磷酸酶 (ALP) 水解,释放甘油和无机磷酸盐。由于其水解迅速,在血浆中的半衰期可能仅为几分钟。α 和 β 异构体的水解速率可能略有不同。该化合物不适用于治疗用途。对于涉及细胞摄取的研究,可以使用放射性标记的甘油磷酸酯(例如,14C 标记)来追踪其代谢,但此类研究并非标准方法。水合物和钠盐形式不会改变其药代动力学。本产品仅为实验室试剂。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
目前尚无甘油磷酸二钠盐水合物的具体毒性数据。β-甘油磷酸酯通常被认为毒性较低。体外实验表明,大多数细胞类型在短时间内(48-72小时)可耐受浓度高达20-30 mM的甘油磷酸酯,但较高浓度(50-100 mM)可导致高渗和细胞活力下降。体内实验表明,腹腔或静脉注射500-2000 mg/kg剂量的甘油磷酸酯可导致啮齿动物出现短暂性低钙血症,这是由于磷酸盐与钙形成络合物所致,进而引起神经肌肉兴奋或强直。然而,此类毒性是由磷酸盐过载引起的,并非甘油磷酸酯特有。α-甘油磷酸酯和β-甘油磷酸酯的混合物以及二钠盐形式均与遗传毒性、致癌性或生殖毒性无关。该化合物不拟用作人类或动物的药物。应采取标准的实验室安全防护措施(手套、实验服、护目镜)。本产品仅供研究使用。
其他信息
β-甘油磷酸酯 (β-GP) 是成骨分化培养基中一种常见的成分。α 和 β 异构体的区别在于磷酸基团的位置。β 异构体的磷酸基团位于中间碳原子 (C2) 上,由于其稳定性更高,不易发生非酶水解,因此在细胞培养中应用更为广泛。α 异构体(磷酸基团位于 C1)也存在。本产品为混合物,因为合成后两种异构体可能同时存在。甘油磷酸酯是一种内源性代谢物,是磷脂(甘油磷脂)和甘油三酯代谢的中间体,也是肯尼迪途径中磷脂合成的前体。作为二钠盐,它提供钠和磷酸盐。水合物含有不同量的水 (x H2O),具体含量在分子式中标明。本产品是一种常见的实验室化学品 (CAS# 154804-51-0)。它并非药物,也没有任何获批的医疗适应症。它仅供研究使用。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C6H14NA4O12P2.XH2O
相关CAS号
β-Glycerophosphate disodium salt hydrate;154804-51-0
外观&性状
Typically exists as solid at room temperature
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O :~100 mg/mL
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们