| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 靶点 |
GLP-1 receptor (GLP-1R). GLP-1 (7-36)-Lys(Biotin), amide, human is a biotinylated analog of the active, naturally occurring form of human GLP-1 (7-36) amide. GLP-1 is an incretin hormone secreted by intestinal L-cells in response to nutrient ingestion. It binds to and activates the GLP-1 receptor (GLP-1R), a class B G protein-coupled receptor (GPCR) expressed on pancreatic beta-cells, as well as in the brain, heart, kidney, stomach, and other tissues. Activation of GLP-1R leads to Gs protein-mediated increase in intracellular cAMP, which potentiates glucose-stimulated insulin secretion (GSIS), inhibits glucagon secretion, promotes beta-cell proliferation and survival, slows gastric emptying, and induces satiety. The biotin moiety (attached to Lysine at the C-terminus) does not interfere with GLP-1R binding or activation, as the C-terminal region is not critical for receptor recognition (the N-terminus is crucial). The amide at the C-terminus (position 36) is the native form, which is more stable and bioactive than the free acid. This biotinylated peptide is not intended as a therapeutic; it is a research reagent for studying GLP-1R pharmacology.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，人源胰高血糖素样肽-1 (GLP-1) (7-36)-Lys (生物素)酰胺保留了与天然GLP-1 (7-36)酰胺相当的完整生物活性。在表达GLP-1R的细胞（例如HEK293-GLP-1R、INS-1、MIN6）中，生物素标记的肽能诱导cAMP积累，其EC50值在低纳摩尔范围内（0.1-1 nM），与未生物素标记的GLP-1相似。它还能刺激β细胞系和分离的胰岛的葡萄糖依赖性胰岛素分泌（GSIS）。生物素标记不会改变肽与GLP-1R的亲和力。该肽可用于基于链霉亲和素的检测方法进行受体结合研究。例如，在基于细胞的ELISA或荧光显微镜检测中，生物素化的GLP-1可与活细胞上的GLP-1受体结合，洗涤后，可使用荧光标记的链霉亲和素（例如FITC-链霉亲和素、Cy3-链霉亲和素）或HRP-链霉亲和素进行检测。这使得受体分布和内化过程得以可视化。在下拉实验中，生物素化的肽段可固定在链霉亲和素-琼脂糖珠上，以从细胞裂解液中捕获GLP-1R，从而鉴定相互作用的蛋白质。该肽段在浓度高达100 nM时对细胞无毒性。文中未提及TFA盐；该化合物似乎以乙酸盐或三氟乙酸盐的形式提供，但并非关键。其序列为：HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR[K(生物素)]-NH2。
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| 体内研究 (In Vivo) |
不适用（研究试剂）。生物素化的GLP-1 (7-36)酰胺用作体外研究工具，不适用于体内给药。由于生物素标记可能改变其药代动力学和免疫原性，因此不用于动物模型进行疗效研究。然而，理论上，如果将该肽与载体偶联，则可用于离体成像或体内靶向表达GLP-1R的细胞，但这并非标准做法。目前尚无该特定生物素化类似物的体内活性数据。天然GLP-1 (7-36)酰胺在动物体内具有显著的降血糖作用（例如，降低糖尿病小鼠的血糖）。但由于成本和必要性，生物素化版本不用于此目的；通常使用天然GLP-1或其长效类似物（例如，艾塞那肽、利拉鲁肽）。因此，本产品不提供体内活性数据。本产品严格意义上属于研究试剂。
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| 酶活实验 |
对于非细胞结合实验（例如，GLP-1 与 GLP-1R 的直接结合），生物素标记的肽可用于基于 ELISA 的结合实验。将 96 孔板用链霉亲和素（5-10 ug/mL，溶于 PBS）包被，4℃ 过夜。用 1% BSA 封闭后，加入生物素标记的 GLP-1 肽（0.1-100 nM），并用链霉亲和素捕获。然后，加入重组 GLP-1 受体蛋白（His 标签或 Fc 标签），使其结合。洗涤后，用抗 GLP-1R 抗体（或抗标签抗体）检测结合的受体，随后用 HRP 标记的二抗和 TMB 底物进行检测。测量 450 nm 处的吸光度。或者，也可以直接固定受体，加入生物素标记的肽，然后用链霉亲和素-HRP 进行检测。对于表面等离子共振 (SPR)：将生物素标记的 GLP-1 肽固定在链霉亲和素包被的传感器芯片（SA 芯片）上。将浓度递增的重组 GLP-1R 蛋白流过芯片。记录结合和解离阶段，并计算解离常数 (KD)。该方法可用于测量结合动力学（Kon、Koff）。这是一种无需细胞的直接结合分析。对于竞争性结合分析，将固定浓度的生物素标记的 GLP-1 与不同浓度的未标记 GLP-1 或其他激动剂在 GLP-1R 蛋白存在下孵育，并测量结合的生物素标记肽的量。确定未标记化合物的 IC50 和 Ki 值。这些分析方法常用于药物发现中筛选 GLP-1R 配体。三氟乙酸/乙酸盐不影响这些分析。该肽在 -20℃ 的 PBS 或水中溶液中稳定。避免反复冻融。
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| 细胞实验 |
在基于细胞的检测中，生物素标记的GLP-1肽用于可视化GLP-1R的结合和内吞作用。将稳定表达人GLP-1R的HEK293细胞接种于8孔腔室载玻片或96孔板中（2-4 × 10⁴个细胞/孔）。24小时后，将细胞置于含0.1% BSA的DMEM培养基中，进行2-4小时的血清饥饿处理。随后，将细胞与生物素标记的GLP-1肽（1-100 nM）在结合缓冲液（DMEM，0.1% BSA，20 mM HEPES）中孵育，分别在4℃（防止内吞）或37℃（促进内吞）下孵育30-60分钟。孵育结束后，用冷的PBS洗涤细胞。检测时，细胞用4%多聚甲醛固定10-15分钟，用0.1% Triton X-100透化（如需研究内吞作用），然后用5% BSA封闭。细胞与荧光标记的链霉亲和素（例如，Alexa Fluor 488-链霉亲和素，1:500）在室温下孵育30-60分钟。细胞核用DAPI复染。细胞通过共聚焦显微镜或荧光显微镜成像。在4℃时，染色主要位于质膜上；在37℃时，观察到点状细胞内染色（内体），表明受体发生了内吞作用。流式细胞术分析：用非酶细胞解离缓冲液将细胞分离，在4℃下与生物素标记的GLP-1（10-100 nM）孵育30-60分钟，洗涤后，用链霉亲和素-PE或链霉亲和素-FITC染色30分钟。洗涤后，用流式细胞仪分析细胞。这可以定量受体结合。对于cAMP积累测定，无需使用生物素标记的肽；使用未标记的GLP-1即可。但是，生物素标记的肽可用于确认生物素标签不干扰信号传导：在GLP-1R细胞中使用生物素标记的肽（0.001-1000 nM）进行cAMP HTRF测定，并将EC50值与未标记的GLP-1进行比较。EC50值应相似（nM范围）。用于鉴定 GLP-1R 相互作用蛋白的下拉实验：将表达 GLP-1R 的细胞裂解液（1-2 mg 蛋白）与生物素标记的 GLP-1 肽（0.1-1 uM）于 4℃ 孵育 2-4 小时。然后加入链霉亲和素-琼脂糖珠（50 uL 悬液），并于 4℃ 孵育过夜。用裂解缓冲液洗涤珠子 3-5 次，用 SDS 上样缓冲液洗脱结合的蛋白，通过 SDS-PAGE 分离，并用质谱或免疫印迹（例如，使用抗 GLP-1R 抗体）进行鉴定。该方法也可用于研究受体寡聚化或与 β-arrestin、GRK 或其他信号分子的相互作用。生物素标记的肽也可用于活细胞的竞争性结合实验：将细胞与生物素标记的GLP-1（10 nM）以及不同浓度的未标记GLP-1或其他化合物在4℃下孵育60分钟，然后用链霉亲和素-PE染色，并通过流式细胞术进行分析。测定未标记化合物的IC50值。所有实验均应包含阴性对照（不含肽、不含细胞，或预先用过量的未标记GLP-1孵育以阻断结合）。肽溶于水或PBS（1-10 mM储备液），并储存于-20℃。避光保存（生物素稳定，但如果后续使用荧光染料，则需避免光漂白）。
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| 动物实验 |
不适用（体外试剂）。生物素标记的GLP-1肽不用于动物疗效研究。然而，它可用于离体组织结合试验。例如，处死小鼠后，制备脑或胰腺切片。将切片与生物素标记的GLP-1（10-100 nM）在结合缓冲液中于室温孵育1-2小时，然后洗涤、固定，并用链霉亲和素-HRP或荧光链霉亲和素进行检测。这样可以观察GLP-1R在组织中的分布。由于该化合物不用于活体动物，因此不适用体内动物实验方案。如果研究人员希望通过静脉注射给药该肽以研究体内GLP-1R靶向作用，他们可能会使用放射性标记的配体（例如，68Ga标记的GLP-1），而不是生物素标记的肽，因为血清中存在内源性生物素和亲和素。因此，不提供体内实验方案。该产品仅为体外研究用试剂。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
不适用（研究试剂）。生物素标记的GLP-1 (7-36)酰胺不适用于体内应用；因此，没有药代动力学数据。作为一种肽（分子量约3.7 kDa），如果静脉注射，由于二肽基肽酶-4 (DPP-4) 在N端（Ala2-Glu3裂解）和其他蛋白酶的快速降解，其血浆半衰期极短（数分钟）。生物素标记可能不会改变这一特性。该肽不具有口服生物利用度。它不用于全身治疗，因此不适用药代动力学研究。该化合物在37℃的细胞培养基中可稳定保存数小时（取决于蛋白酶的存在），但长期储存应在-20℃下进行。该肽通常以冻干粉末（三氟乙酸盐或醋酸盐）的形式供应。为防止吸附在塑料上，应使用含0.1% BSA的水或PBS缓冲液进行复溶。该生物素化肽仅用于体外实验。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无生物素化GLP-1 (7-36)酰胺的毒性数据。非生物素化GLP-1 (7-36)酰胺是一种内源性肽类激素，在生理浓度下通常无毒。生物素部分是一种维生素（维生素B7），也无毒。在基于细胞的检测中，生物素化肽在浓度高达100 nM-1 μM的条件下短时间（1-24小时）使用，未观察到细胞毒性（通过LDH或MTT检测）。尚未进行遗传毒性、致癌性或生殖毒性研究。该肽仅供研究使用，不得用于人类或兽医用途。标准实验室安全防护措施（手套、实验服）即可。TFA/乙酸盐无毒。该化合物并非已获批准的药物。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
GLP-1 (7-36) 酰胺是肠促胰岛素激素 GLP-1 的主要活性形式，约占内源性 GLP-1 的 80%。它由肠道 L 细胞分泌，并通过 GLP-1 受体发挥作用，调节葡萄糖稳态。GLP-1 受体激动剂（例如艾塞那肽、利拉鲁肽、度拉糖肽、索玛鲁肽）已获批准用于治疗 2 型糖尿病和肥胖症。由于 DPP-4 降解，天然 GLP-1 的半衰期非常短；DPP-4 抑制剂（例如西格列汀、沙格列汀）也已获批准。GLP-1 的生物素化是一种非放射性检测方法。生物素-链霉亲和素相互作用是自然界中最强的非共价键之一（Kd 约为 10⁻¹⁵ M）。生物素标签通常添加在C端（例如，通过赖氨酸残基），以避免干扰N端与GLP-1R的结合，因为N端对受体激活至关重要。C端酰胺对活性也很重要。本产品广泛用于GLP-1R结合试验、内化研究和受体相互作用研究。本产品仅供研究使用，并非药物，也未获准用于临床。
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| 分子式 |
C165H252N44O48S
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| 分子量 |
3649.84
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。 (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O :~4 mg/mL (~1.10 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.2740 mL | 1.3699 mL | 2.7398 mL | |
| 5 mM | 0.0548 mL | 0.2740 mL | 0.5480 mL | |
| 10 mM | 0.0274 mL | 0.1370 mL | 0.2740 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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