| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
TLR9 (Toll-like receptor 9). ODN 1018 signals through TLR9 to induce immunoglobulin production by B cells and interferon (IFN-alpha, IFN-beta), interleukin-12 (IL-12), and tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha) production by plasmacytoid dendritic cells (pDCs). As a Class B CpG ODN, it strongly activates B cells, promoting proliferation, antibody production (including IgG and IgM), and pro-inflammatory cytokine release (e.g., IL-6, TNF-alpha). Unlike Class A CpG ODNs, Class B ODNs weakly stimulate IFN-alpha secretion from pDCs but more potently activate B-cell responses. The FITC-labeled version retains TLR9 binding specificity and immune stimulatory activity.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，ODN 1018 可强烈诱导原代人 B 细胞活化、增殖和免疫球蛋白分泌。它还能促进表达 TLR9 的免疫细胞产生包括 IL-6、TNF-α 和 IL-12 在内的促炎细胞因子。在浆细胞样树突状细胞 (pDC) 培养中，ODN 1018 可诱导中等水平的 IFN-α、IFN-β、IL-12 和 TNF-α 的产生，从而促进 Th1 型免疫应答。该化合物还能上调抗原呈递细胞上的共刺激分子（CD80、CD86 和 MHC II 类分子），增强抗原呈递能力。FITC 标记的 ODN 1018 保留了完整的细胞因子诱导活性，因此可以同时进行功能研究、摄取和定位评估。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在动物模型中，ODN 1018 是一种强效的疫苗佐剂，与疫苗抗原联合给药时可增强抗原特异性抗体反应。在非人灵长类动物研究中，ODN 1018 可促进树突状细胞上的抗原呈递和共刺激分子表达，从而增强 T 细胞活化。在小鼠肿瘤模型中，ODN 1018 与利妥昔单抗等免疫疗法联合使用，可通过增强免疫细胞活化发挥抗肿瘤活性。在传染病模型中，ODN 1018 与乙型肝炎表面抗原联合给药可诱导产生高水平的 HBsAg 特异性抗体和 Th1 型细胞免疫。体内给药可导致血清细胞因子水平升高，注射后 2-6 小时内可通过 ELISA 进行定量检测。FITC 标记的 ODN 1018 可用于体内给药后淋巴器官的离体组织分布分析。
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| 酶活实验 |
对于非细胞 TLR9 结合评估，可进行基于 ELISA 的结合实验。将重组人 TLR9 蛋白（50 uL，浓度为 2 ug/mL）包被于 96 孔板中，包被液为碳酸盐-碳酸氢盐缓冲液（pH 9.6），4℃ 过夜。用 PBST（含 0.05% Tween 20 的 PBS）洗涤后，用 3% BSA 于 37℃ 封闭 1 小时。随后加入系列稀释的 FITC 标记的 ODN 1018（0-2000 nM），室温孵育 2 小时。使用 HRP 标记的抗 FITC 抗体和 TMB 底物检测结合的 ODN，并在 450 nm 处测量吸光度。竞争性结合实验可通过在加入标记的 ODN 之前，先用未标记的 ODN 1018 预孵育包被 TLR9 的孔板来进行。或者，SPR 可用于实时结合亲和力测量。
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| 细胞实验 |
为了进行细胞摄取和功能评估，将人外周血单核细胞 (PBMC)、纯化的 B 细胞或稳定表达 TLR9 的 HEK293 细胞接种于 96 孔板中（2 × 10⁵ 个细胞/孔），培养基为含 10% FBS 的 RPMI-1640。用浓度范围为 0.1-20 uM 的 FITC 标记的 ODN 1018 处理细胞 2-48 小时。通过共聚焦激光扫描显微镜（激发波长 495 nm，发射波长 520 nm）观察内体区室中 ODN 的积累情况（TLR9 定位于此），或通过流式细胞术（FL1 通道）进行定量分析，以评估细胞摄取和转运情况。通过收集培养上清液，并使用夹心 ELISA 法定量细胞因子（IL-6、TNF-α、IFN-α、IL-12）的分泌量来检测功能激活情况。 B细胞增殖可通过3H-胸苷掺入法或CFSE稀释法进行评估。与TLR9拮抗剂ODN 2088共同孵育可作为特异性对照。
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| 动物实验 |
在体内分布研究中，动物（小鼠或大鼠）接受单次静脉（尾静脉）、腹腔或皮下注射FITC标记的ODN 1018，剂量范围为10-100 mg/kg。在预定的时间点（注射后0.5、1、2、6、12、24、48和72小时），采集血液，并收集淋巴组织（脾脏、淋巴结、骨髓）、肝脏、肾脏和肺脏。将组织在裂解缓冲液中匀浆，并使用荧光酶标仪测量FITC荧光（激发波长485 nm，发射波长528 nm），并将数值标准化为组织重量。对于组织学分析，将冷冻组织切片（8-10 μm）用DAPI复染，并通过荧光显微镜观察，以确定细胞和亚细胞分布模式。对于疫苗佐剂研究，将 FITC 标记的 ODN 1018 和抗原共同注射到动物体内；注射后 24-48 小时采集引流淋巴结，分析树突状细胞对抗原的摄取和生发中心 B 细胞的活化。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
B类CpG寡核苷酸（如ODN 1018）由于其完整的硫代磷酸酯骨架而具有更强的核酸酶抗性，静脉注射后在小鼠体内的血浆半衰期约为1-2小时，显著长于具有磷酸二酯骨架的A类CpG寡核苷酸。该化合物广泛分布于包括脾脏、淋巴结和派氏淋巴集结在内的淋巴组织，注射后1-2小时内即可达到组织峰值浓度。由于网状内皮系统清除，肝脏和肾脏也会摄取该化合物，但程度低于A类寡核苷酸。完整的硫代磷酸酯骨架还促进了与血浆蛋白的结合，从而降低了肾脏清除率。代谢物经尿液排泄是主要的清除途径。FITC标记不会显著改变母体寡核苷酸的药代动力学性质。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在临床前毒性研究中，ODN 1018 在免疫调节剂量下通常耐受性良好。高剂量或频繁给药时，可能会出现细胞因子介导的不良反应，包括短暂发热、不适、淋巴结肿大和肝转氨酶轻度升高，这与 TLR9 激动剂的类效应一致。在啮齿动物和非人灵长类动物的慢性重复给药毒性研究中，在治疗剂量水平下未报告靶器官毒性、遗传毒性或致癌性。脾脏和淋巴结的淋巴组织增生预计是药效学效应，而非不良毒性。FITC 标签不会引入除母体 ODN 之外的额外毒理学问题。在过渡到新的动物模型时，应进行标准的剂量递增和耐受性评估。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
FITC标记的ODN 1018是一种研究工具，用于研究CpG ODN的细胞摄取、内体转运至含TLR9的区室以及TLR9介导的B细胞活化。未标记的ODN 1018已在临床研究中作为疫苗佐剂进行研究，尤其是在HEPLISAV™（乙型肝炎疫苗）中，它作为免疫刺激佐剂发挥作用；此外，它还与利妥昔单抗联合用于复发或难治性滤泡性淋巴瘤的II期临床试验（NCT00490568）。ODN 1018尚未获得作为独立治疗药物的监管批准；其临床应用是作为佐剂疫苗的组成部分。FITC标记使得利用共聚焦显微镜和流式细胞术等荧光技术可以实时观察和定量ODN的分布。
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| 分子量 |
8171.00
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| 相关CAS号 |
ODN 1826;202668-42-6;Biotin-labeled ODN 1018 sodium
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.1224 mL | 0.6119 mL | 1.2238 mL | |
| 5 mM | 0.0245 mL | 0.1224 mL | 0.2448 mL | |
| 10 mM | 0.0122 mL | 0.0612 mL | 0.1224 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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