| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
The primary target of this peptide is lipid A, the conserved membrane anchor of LPS in Gram-negative bacterial outer membranes. By binding directly to lipid A, the peptide effectively detoxifies LPS and prevents its interaction with Toll-like receptor 4 (TLR4)/MD-2 complex on immune cells, thereby blocking the downstream activation of NF-kappaB and MAPK signaling pathways. This reduces the production of pro-inflammatory cytokines including TNF-alpha, IL-1beta, IL-6, and other mediators of septic shock.
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，内毒素抑制剂TFA能以高亲和力与脂质A结合，抑制LPS诱导的免疫细胞释放细胞因子。它是一种合成肽，能有效中和LPS的生物活性，从而解毒内毒素，并阻止导致脓毒性休克的下游炎症级联反应。该肽对LPS具有高度特异性，与其他细菌成分的交叉反应性极低。
|
| 体内研究 (In Vivo) |
内毒素抑制剂（腹腔注射；0.5 mg/kg）TFA 也可显著降低老年大鼠热暴露引起的体温过低和血浆浓度，以及 IL-1β、COX-2、IκB-β 和 LPS 活性的 mRNA 增加。ACTH 与儿茶酚胺之间的反应[1]。
体内实验表明，腹腔注射（ip；0.5 mg/kg）内毒素抑制剂可显著降低老年大鼠热暴露诱导的IL-1β、COX-2、IκB-β和LPS活性相关mRNA水平的升高，以及热暴露诱导的体温过低反应和血浆ACTH及儿茶酚胺水平的降低。该化合物还能有效抑制LPS引起的发热反应，且毒性和致死率极低。它能够抑制LPS引起的发热反应，并具有良好的毒性特征。 |
| 酶活实验 |
对于LPS结合实验，将LPS（1-10 ug/孔）溶于50 mM碳酸盐-碳酸氢盐缓冲液（pH 9.6）中，包被96孔板，4℃过夜。用1% BSA的PBS溶液封闭。加入生物素标记的内毒素抑制剂TFA（1 nM-1 uM），溶于结合缓冲液（含0.05% Tween-20的PBS）中，25℃孵育2小时。洗涤后，加入HRP标记的链霉亲和素，孵育30分钟，洗涤后，加入TMB底物，并在450 nm处测定吸光度。对于竞争性结合实验，加入不同浓度（1 pM-10 uM）的未标记内毒素抑制剂以及固定浓度的生物素标记肽。通过非线性回归计算IC50和结合亲和力（Kd）。使用表面等离子共振（SPR）技术实时测定脂质A或LPS的结合动力学。
|
| 细胞实验 |
将 RAW 264.7 小鼠巨噬细胞或 THP-1 人单核细胞在含 10% FBS 和 1% 青霉素/链霉素的 DMEM 或 RPMI-1640 培养基中，于 37℃、5% CO2 条件下培养。将细胞接种于 96 孔板（1 × 10⁵ 个细胞/孔）。用浓度为 0.1-100 uM 的内毒素抑制剂 TFA 预处理细胞 30-60 分钟。用浓度为 1-100 ng/mL 的 LPS 刺激细胞 4-24 小时。收集上清液，并通过 ELISA 或多重微珠法检测促炎细胞因子（TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8）。通过 MTT 或 LDH 法评估细胞活力，以排除非特异性细胞毒性。对于 NF-κB 激活检测，可进行 IκB-α 降解和 p65 核转位的蛋白质印迹分析。或者，可以使用带有荧光素酶报告基因的 NF-κB 报告细胞系。对于细胞内信号传导，可通过蛋白质印迹法检测 MAPK（p38、ERK、JNK）的磷酸化水平。
|
| 动物实验 |
对于内毒素血症/脓毒症模型，使用C57BL/6小鼠或Sprague-Dawley大鼠。通过腹腔注射（ip）或静脉注射（iv）LPS（1-10 mg/kg）诱导内毒素血症。在LPS刺激前后，腹腔注射内毒素抑制剂TFA（0.1-5 mg/kg）。监测动物存活情况（通常为24-72小时）。采集血液样本，通过ELISA法检测血浆细胞因子（TNF-α、IL-1β、IL-6）。采集组织（肝脏、肺脏、肾脏）进行组织病理学评估，以检测器官损伤。对于发热研究，通过遥测或直肠探针监测体温。对于老年大鼠模型（18-24月龄），在热暴露或LPS刺激前，腹腔注射内毒素抑制剂TFA（0.5 mg/kg）；检测血浆儿茶酚胺、ACTH和细胞因子水平。对于生存研究，给予单剂量 LPS（致死剂量，15-25 mg/kg 腹腔注射），并用内毒素抑制剂 TFA 治疗；每 6-12 小时记录一次死亡率，持续 72 小时。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
该肽是一种合成十肽（TFA盐的分子量为1908.72）。作为一种肽，它在循环中易受蛋白水解酶降解。TFA盐可提高其溶解度和制剂稳定性。在大鼠腹腔注射0.5 mg/kg剂量后，预计该肽具有较短的血浆半衰期（数分钟至不足1小时）、快速分布和肾脏清除。腹腔注射的生物利用度中等，但由于胃降解，该化合物可能不具有口服生物利用度。对于体内制剂，首先将其溶解于DMSO中（作为储备液），然后用适当的溶剂稀释（例如，5% DMSO + 30% PEG300 + 5% Tween 80 + 60%生理盐水/PBS）。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
内毒素抑制剂TFA具有良好的安全性，动物研究表明其毒性和致死率极低。在有效中和LPS的剂量（0.5 mg/kg，腹腔注射）下，未观察到明显的急性毒性。该化合物单独给药不会引起明显的器官毒性或死亡。该肽不溶血，且免疫原性极低。该化合物能有效预防内毒素本身的主要不良反应（败血症、发热、休克）。目前尚无遗传毒性或致癌性数据，但对于一种短链合成肽而言，预计不会存在相关风险。避免吸入气雾化粉末。应采取标准的实验室防护措施（手套、实验服、护目镜）。
|
| 参考文献 |
[1]. Toshihiko Katafuchi, et al. Endotoxin inhibitor blocks heat exposure-induced expression of brain cytokine mRNA in aged rats. Brain Res Mol Brain Res. 2003 Oct 21;118(1-2):24-32.
|
| 其他信息 |
TFA盐形式含有三氟乙酸根离子作为抗衡离子，可增强肽的溶解度和稳定性。分子量为1908.72，分子式为C67H103F18N15O24S2。序列为Lys-Thr-Lys-Cys-Lys-Phe-Leu-Lys-Lys-Cys，其中Cys4和Cys10之间形成二硫键（构成环状肽结构）。该化合物在某些文献中也被称为Reltecimod TFA或AB-103 TFA。它仅供研究使用，不得用于人类治疗。
|
| 分子式 |
C67H103F18N15O24S2
|
|---|---|
| 分子量 |
1908.72
|
| 相关CAS号 |
Endotoxin inhibitor;147396-10-9
|
| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
H2O :~100 mg/mL (~52.39 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.5239 mL | 2.6196 mL | 5.2391 mL | |
| 5 mM | 0.1048 mL | 0.5239 mL | 1.0478 mL | |
| 10 mM | 0.0524 mL | 0.2620 mL | 0.5239 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
