| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
DALDA acetate specifically targets the micro-opioid receptor (MOR), a G protein-coupled receptor (GPCR) that is the primary molecular target of endogenous opioid peptides (e.g., endorphins, enkephalins, dynorphins) and classical opioid analgesic drugs (e.g., morphine, fentanyl). DALDA acts as a full agonist at the micro-opioid receptor. Binding of DALDA to MOR activates the Gi/o protein signaling pathway, leading to inhibition of adenylyl cyclase, decreased cAMP levels, activation of G protein-coupled inwardly rectifying potassium channels (GIRKs), and inhibition of voltage-gated calcium channels. This results in neuronal hyperpolarization and reduced neurotransmitter release, producing antinociception (analgesia) and, at higher doses, respiratory depression. The Ki of DALDA for the micro-opioid receptor is 1.69 nM. It has weak affinity for delta- and kappa-opioid receptors, showing high selectivity (over 1000-fold).
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
DALDA 醋酸盐比吗啡更具极性和亲水性，因为它在生理 pH 值下具有净正电荷 (3+) [1]。
体外实验表明，DALDA乙酸酯是一种强效的微阿片受体激动剂。在受体结合实验中，它对微阿片受体具有高亲和力（Ki = 1.69 nM），且对δ（Ki > 1000 nM）和κ（Ki > 1000 nM）受体具有极佳的选择性。在功能性实验（例如，使用表达微阿片受体的CHO细胞进行[35S]GTPγS结合实验以检测G蛋白活化）中，DALDA作为完全激动剂，刺激[35S]GTPγS结合，其EC50值在低纳摩尔范围内。在这些实验中，该化合物的效力高于吗啡。由于含有三个碱性氨基酸残基（D-精氨酸、赖氨酸和N端酪氨酸），DALDA乙酸酯在生理pH条件下带净正电荷（3+）。因此，它具有很强的亲水性，并且比带净电荷 +1 的吗啡更具极性。这种增加的极性降低了其通过细胞膜和血脑屏障的被动扩散，使其成为研究外周阿片受体的有用工具。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
用 DALDA 醋酸盐（0–7 nmol/只；一次）治疗大鼠可观察到镇痛和呼吸作用 [1]。当暴露于 DALDA 醋酸盐（0.1 和 1.0 μg/侧；脑室内；一次）时，大鼠的水平运动、直立性和刻板时间行为均呈双相性，表现为初始抑制、中间显著抑制和随后的激活 [2]。
在体内，DALDA醋酸酯通过绕过血脑屏障的途径给药，例如鞘内注射（it，注入脊髓）或脑室内注射（icv，注入脑室），可产生镇痛作用。全身给药（静脉注射、腹腔注射、皮下注射）后，其镇痛效果显著降低，因为DALDA不易穿过血脑屏障。在大鼠鞘内注射DALDA（0.1-10 nmol/只）后，DALDA在甩尾试验和热板试验中均表现出剂量依赖性的镇痛作用，其效力显著高于吗啡。该镇痛作用由微阿片受体介导，因为选择性微阿片受体拮抗剂纳洛酮可阻断该作用。然而，与吗啡相比，DALDA在动物模型中等效镇痛剂量下引起的呼吸抑制作用较轻。呼吸抑制作用的降低归因于其全身给药后对中枢神经系统（CNS）的渗透性较差。在大鼠中，鞘内注射DALDA（0-7 nmol/只）也表现出剂量依赖性的呼吸效应（呼吸频率降低），并改变运动活性，产生双相效应（先抑制后激活）。DALDA在动物模型中也会产生身体依赖性，但由于其口服生物利用度低且难以穿透血脑屏障，因此其滥用风险低于吗啡。 |
| 酶活实验 |
醋酸DALDA是一种强效且高选择性的微阿片受体激动剂。其体外微阿片受体结合亲和力(Ki)为1.69 nM。受体结合实验采用在CHO细胞或HEK-293细胞中表达的大鼠或人微阿片受体(MOR)，或采用大鼠脑膜进行。放射性配体竞争性结合实验中，将膜（50-100 ug蛋白）与0.5-1 nM的放射性标记的微选择性拮抗剂（如[3H]-DAMGO（D-Ala2, N-Me-Phe4, Gly-ol5-脑啡肽）或[3H]-纳洛酮）孵育。将DALDA乙酸盐溶于DMSO（10 mM储备液），并用结合缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.4、1 mM EDTA、5 mM MgCl2、0.1% BSA）进行系列稀释。用10 uM纳洛酮测定非特异性结合。反应在25℃下孵育60-90分钟，结合的放射性通过预先浸泡在0.3%聚乙烯亚胺（PEI）中的GF/B滤膜过滤分离。滤膜用冰冷的缓冲液洗涤三次，并通过液体闪烁计数放射性。Ki值由IC₅0值使用Cheng-Prusoff方程计算得出。对于功能活性（激动剂），进行[3⁵S]GTPγS结合试验。将膜（50 ug 蛋白）置于测定缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.7、100 mM NaCl、5 mM MgCl2、1 mM EDTA、0.1% BSA、50 uM GDP、0.1 nM [3⁵S]GTPγS）中，并加入不同浓度的 DALDA（0.01-10 uM）。在 30℃ 下孵育 60 分钟后，通过快速过滤终止反应。使用 10 uM 未标记的 GTPγS 来测定非特异性结合。计算 EC₅0 值。最大刺激强度 (Emax) 通常大于参考激动剂 DAMGO 的 80%。在这些测定中，DALDA 是一种完全激动剂，其 EC₅0 值约为 5-20 nM。
|
| 细胞实验 |
细胞功能分析（例如 cAMP 抑制）在稳定表达人微阿片受体的 CHO 或 HEK-293 细胞中进行。将细胞以 2 × 10⁴ 个细胞/孔的密度接种于 96 孔板中，培养至 80% 汇合度。用含 0.5 mM IBMX（一种磷酸二酯酶抑制剂）的 HBSS 培养基替换原培养基，孵育 10 分钟。然后用 DALDA 醋酸盐（0.01 pM - 100 nM）处理细胞，于 37℃ 孵育 5-10 分钟。对于 cAMP 抑制实验，随后用福斯克林（1-10 uM）刺激细胞 10 分钟以提高 cAMP 水平。通过裂解终止反应，并使用竞争性 ELISA 或 HTRF（均相时间分辨荧光）cAMP 检测试剂盒（例如 Cisbio）测定细胞内 cAMP 水平。计算抑制 cAMP 积累的 EC50 值。DALDA 的典型 EC50 值在 1-10 nM 范围内。cAMP 的最大抑制率为福斯克林对照组的 70-90%。为了验证受体选择性，使用表达 δ- 或 κ-阿片受体的细胞进行相同的实验。DALDA 在浓度高达 10 uM 时对这些受体几乎没有活性。对于增殖实验（例如，评估细胞毒性），进行 MTT 实验：将细胞（1 × 10⁴/孔）用 DALDA（0.1-100 uM）处理 24-72 小时，并将细胞活力与未处理的对照组进行比较。DALDA 在浓度高达 100 uM 时未显示出明显的细胞毒性。
|
| 动物实验 |
在雄性Sprague-Dawley大鼠（200-250 g）或CD-1小鼠（20-25 g）中评估体内镇痛效果。中枢给药时，在麻醉状态下将鞘内（it）套管植入脊髓蛛网膜下腔（L4-L6）。动物恢复5-7天。DALDA醋酸盐溶解于无菌0.9%生理盐水（或人工脑脊液）中。大鼠鞘内注射0.1、1、3、10和30 nmol的DALDA（小鼠为0.01-3 nmol），注射体积为5-20 μL（大鼠）或5 μL（小鼠），随后用10 μL生理盐水冲洗。对于脑室内（icv）给药，将引导套管植入右侧脑室（坐标：距前囟AP -0.8 mm，ML 1.5 mm，DV 3.5 mm）。采用甩尾试验评估热痛觉：将动物尾部浸入52-55℃的水浴中，记录缩尾潜伏期（截止时间：10秒）。分别在基线和注射后5、10、15、30、45、60、90和120分钟进行测量。最大可能效应（%MPE）的计算公式为：[(测试潜伏期 - 基线) / (截止时间 - 基线)] × 100。ED50（产生50% MPE的剂量）通过对数概率分析计算。在甩尾试验中，DALDA 的 ED50 约为 0.4-0.8 nmol/只大鼠，其效力是吗啡的 10-50 倍。作用持续时间为 45-90 分钟。在呼吸研究中，将大鼠置于全身容积描记仪中，记录呼吸频率、潮气量和分钟通气量。DALDA（0-7 nmol，脑室内注射）可引起剂量依赖性的呼吸频率下降（例如，7 nmol 时下降 20-30%）。在运动研究中，将大鼠置于开放场装置中，记录水平运动、站立和刻板行为。DALDA（0.1-1.0 μg/侧，脑室内注射）产生双相效应：初始抑制（前 5-15 分钟），随后显著抑制，然后激活（30-60 分钟后）。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
DALDA醋酸酯的药代动力学已在啮齿动物中得到表征。静脉注射（例如，大鼠1 mg/kg）后，由于快速的蛋白水解降解和肾脏清除，DALDA的血浆半衰期非常短（t½ < 5分钟）。该化合物不具有口服生物利用度，因为它是一种四肽，会被消化酶广泛降解。由于其在生理pH值（3+）下带净正电荷，该肽具有高度亲水性（logP < 0），这阻止了其被动扩散穿过血脑屏障（BBB）。因此，全身给药后，DALDA进入中枢神经系统（CNS）的渗透性非常有限。CNS与血浆的浓度比小于0.05（即，到达脑和脊髓的血浆浓度不足5%）。这一特性被用于研究外周微阿片受体，而不会产生中枢副作用（例如，在炎症组织中产生镇痛作用，而不会产生镇静或成瘾性）。鞘内注射后，DALDA 从脑脊液中清除的半衰期约为 15-30 分钟，这与镇痛作用的持续时间相符。醋酸盐形式用于研究；醋酸根离子可提高其在水和缓冲液中的溶解度。该化合物以冻干粉末形式储存于 -20℃ 时稳定。体内使用时，应在使用前立即将其溶解于无菌生理盐水或 PBS 中，因为溶液在室温下长时间存放不稳定。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
由于DALDA醋酸酯是一种研究工具而非临床候选药物，因此其毒性尚未得到广泛研究。在镇痛剂量（0.1-3 nmol/只大鼠）下，未观察到急性毒性。在较高鞘内剂量（≥30 nmol/只大鼠）下，由于非特异性作用或扩散至更高脊髓节段，可能出现短暂的运动障碍（共济失调、后肢无力）。在治疗剂量下，鞘内注射DALDA在啮齿动物中未见长期神经毒性（例如神经退行性变）的报道。在呼吸系统研究中，7 nmol剂量下，大鼠呼吸频率下降20-30%，但未危及生命。尚未有关于肝毒性、肾毒性或遗传毒性的研究报道。该化合物在体外不被认为具有细胞毒性（正常细胞IC50 > 100 μM）。处理粉末时应采取标准实验室安全防护措施（手套、实验服、护目镜）。避免吸入和皮肤接触。DALDA醋酸酯仅供研究使用，未获准用于人类或兽医治疗。在许多司法管辖区，它并非管制物质，但作为一种微阿片激动剂，应妥善保管并采取适当的安全措施，以防止滥用。
|
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
DALDA乙酸酯（H-Tyr-D-Arg-Phe-Lys-NH2·CH3COOH）是一种四肽酰胺。DALDA的名称代表D-Arg2, Lys4-Dermorphin (1-4)酰胺。它是dermorphin的类似物，dermorphin是一种内源性七肽（Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2），分离自南美蛙Phyllomedusa sauvagei的皮肤。Dermorphin是最有效的天然微阿片受体激动剂之一。DALDA的设计理念是使其结构更短、亲水性更强，并以D-Arg取代D-Ala，且C端带有酰胺基团，从而增强其对羧肽酶降解的抵抗力。 D-精氨酸的存在增加了净正电荷（从皮吗啡的+2增加到DALDA的+3），从而提高了溶解度并降低了血脑屏障的穿透性，同时保持了对微阿片受体的高亲和力。由于其中枢神经系统穿透性差，DALDA是研究外周微阿片受体介导的镇痛作用（例如，在炎症性疼痛模型中）的宝贵工具，且不会产生镇静、成瘾和呼吸抑制等中枢副作用。然而，在高剂量或中枢给药时，它仍然会产生这些副作用。DALDA尚未获准作为治疗药物，但已被用作开发外周限制性镇痛药的先导化合物。醋酸盐是常用的研究形式；三氟乙酸盐也有售。DALDA应以冻干粉末的形式储存在-20℃，避光防潮。它可溶于水（最高浓度为100 mg/mL）和二甲基亚砜（DMSO）。仅供研究使用。
|
| 分子式 |
C32H49N9O7
|
|---|---|
| 分子量 |
671.79
|
| 相关CAS号 |
DALDA;118476-85-0;DALDA TFA
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~100 mg/mL (~148.86 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.4886 mL | 7.4428 mL | 14.8856 mL | |
| 5 mM | 0.2977 mL | 1.4886 mL | 2.9771 mL | |
| 10 mM | 0.1489 mL | 0.7443 mL | 1.4886 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
