| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
CXCL4-CCL5[1]
The primary molecular target of Cyclic MKEY TFA is the heterodimerization interface of CXCL4 and CCL5. By binding to the surface of CXCL4 (PF4) or CCL5 (RANTES), it sterically prevents the two chemokines from forming the functional CXCL4-CCL5 heterodimer, which is known to promote monocyte adhesion to endothelium and induce inflammatory signaling in vascular cells (endothelial cells, smooth muscle cells, and macrophages). The compound does not inhibit the individual chemokines alone; rather, it specifically disrupts their synergistic interaction. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，环状MKEY TFA可抑制单核细胞（例如THP-1细胞、原代人单核细胞）的CXCL4-CCL5异二聚体依赖性趋化作用。在Transwell迁移实验中，该异二聚体（浓度均为50-100 ng/mL）可显著诱导单核细胞迁移；与环状MKEY TFA（0.1-10 uM）共同孵育后，迁移能力恢复至基础水平。该肽还能阻断靶细胞中异二聚体诱导的Ca2+内流和ERK1/2磷酸化，证实该信号通路依赖于趋化因子异二聚体。单独使用CCL5或CXCL4均无直接抑制作用。
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| 体内研究 (In Vivo) |
环状MKEY TFA已在多种体内疾病模型中进行了评估。在ApoE-/-（易患动脉粥样硬化）小鼠模型中，给予环状肽（5-10 mg/kg，腹腔注射，每周两次，持续8-12周）可显著减少动脉粥样硬化斑块的形成（通过油红O或苏丹IV染色对主动脉进行定量）。这种保护作用与巨噬细胞浸润和炎症细胞因子（TNF-α、IL-6、MCP-1）水平的降低有关。在主动脉瘤小鼠模型（血管紧张素II输注）中，环状MKEY TFA可减少主动脉扩张并预防主动脉破裂。此外，在缺血性中风（大脑中动脉闭塞，MCAO）小鼠模型中，环状 MKEY TFA（闭塞后一小时腹腔注射 10 mg/kg）通过阻断炎症细胞流入大脑，减少梗死体积并改善神经功能评分。
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| 酶活实验 |
环状MKEY TFA与CXCL4或CCL5的结合可通过表面等离子共振(SPR)测定。将固定在CM5传感器芯片上的CXCL4或CCL5暴露于浓度递增（0.1-100 uM）的环状肽中。计算实时结合动力学参数（结合速率常数ka、解离速率常数kd）和平衡解离常数(KD)。通常，亲和力(KD)在低微摩尔范围内（例如，1-5 uM）。或者，可进行荧光各向异性竞争实验：将标记的CXCL4-CCL5异二聚体与浓度递增的未标记环状MKEY TFA孵育；各向异性的降低反映了竞争性置换作用。
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| 细胞实验 |
使用24孔Transwell小室（孔径5 um）评估环状MKEY TFA阻断异二聚体诱导趋化作用的能力。将THP-1单核细胞或新鲜分离的人外周血单核细胞（PBMC）在无血清培养基中培养4小时。下室加入含有CXCL4（50-100 ng/mL）+ CCL5（50-100 ng/mL）的培养基，并分别加入或不加入环状MKEY TFA（0.1-10 uM）。上室加入2 × 10⁵个细胞，悬浮于100 uL无血清培养基中。将细胞置于37℃、5% CO2培养箱中培养2-4小时，使其迁移。收集下室中迁移的细胞，并通过流式细胞仪（计数固定时间内发生的细胞）或CyQuant细胞增殖检测试剂盒（荧光测量）进行计数。迁移抑制百分比是相对于阳性对照（仅异二聚体）计算的。细胞内Ca2+流：细胞用Fluo-4 AM（2 uM，37℃孵育30分钟）加载，然后用CXCL4-CCL5异二聚体（各50 ng/mL）刺激，同时加入或不加入环状MKEY TFA（10 uM）。在酶标仪上记录荧光强度（激发波长488 nm，发射波长525 nm），持续200秒。环状MKEY TFA可阻断Ca2+反应的快速峰值。
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| 动物实验 |
在MCAO卒中模型中评估体内疗效：成年雄性C57BL/6小鼠（8-10周龄，20-25 g）在异氟烷麻醉下，采用管腔内丝线技术进行短暂性（60分钟）大脑中动脉闭塞。通过激光多普勒血流仪确认再灌注。再灌注后1小时和6小时，腹腔注射（ip）环状MKEY TFA（10 mg/kg）或载体对照（生理盐水）。缺血72小时后，处死小鼠。取出脑组织，切成2 mm厚的冠状切片，并用2% 2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色以量化梗死体积（未染色的白色区域）。使用标准化的5分制量表（0：无功能障碍，4：严重功能障碍）评估神经功能缺损。采用抗CD68（巨噬细胞）或抗MPO（中性粒细胞）抗体进行免疫组织化学染色，以评估炎症细胞浸润情况。动脉粥样硬化模型：将6-8周龄的雌性ApoE-/-小鼠喂食高脂饮食（21%脂肪，0.15%胆固醇）12周。随后，每周三次腹腔注射MKEY TFA（5 mg/kg）或PBS（载体），持续12周。收集主动脉，并用油红O进行表面染色。定量分析斑块面积百分比（病变面积/主动脉总面积）。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
作为一种合成环状肽（分子量约为1000-1500 Da），环状MKEY TFA能迅速从循环系统中清除。在小鼠体内，腹腔注射或静脉注射后的血浆半衰期估计为15-60分钟。与线性肽相比，环状结构显著提高了其对蛋白酶的稳定性，但由于其分子量较小，肾脏滤过（肾小球滤过）仍然是主要的清除途径。TFA反离子的存在是为了提高其在水性缓冲液和生理盐水中的溶解度。在体内研究中，通常将该化合物溶解于无菌PBS缓冲液（1-5 mg/mL）中，并进行腹腔注射（以减缓吸收），从而延长药物暴露时间。目前尚未报道其与血浆蛋白有显著的结合。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
环状MKEY TFA在小鼠中表现出较低的急性毒性。在典型的疗效研究中，使用5-20 mg/kg剂量（腹腔注射或静脉注射）时，与溶剂对照组相比，未观察到显著不良反应（体重减轻>15%、明显的行为异常、发病率）。在这些剂量下，未报道肝毒性（ALT/AST升高）或肾毒性（BUN/肌酐升高）。该肽不具有致突变性或致染色体断裂性。然而，作为研究用化学品，应采取标准防护措施（个人防护装备：实验服、手套、护目镜）。避免直接吸入气溶胶粉末。虽然尚未正式报道长期毒性研究，但鉴于中等剂量水平和较短的研究持续时间（2-12周），该物质被认为对研究用途相对安全。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
环状MKEY TFA是一种合成环状肽，其序列源自CXCL4（PF4）和CCL5（RANTES）。“MKEY”序列指的是趋化因子蛋白中负责异二聚体形成的保守基序。根据合成方法的不同，该环状肽通过硫醚或酰胺环化形成，从而将肽锁定在模拟异二聚体界面的构象中。通过阻断CXCL4-CCL5异二聚体，该化合物成为首创的抗炎剂，且不抑制趋化因子单体（趋化因子单体对正常的免疫监视至关重要）。该化合物是研究趋化因子协同作用的宝贵工具，目前正在进行临床前研究，探索其作为治疗慢性炎症性疾病（动脉粥样硬化、腹主动脉瘤）和急性神经炎症（中风）的潜在疗法。环状MKEY TFA仅供研究使用，尚未获准用于人体。
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| 分子式 |
C115H175F3N28O36S2
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| 分子量 |
2644.89
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| 相关CAS号 |
Cyclic MKEY
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.3781 mL | 1.8904 mL | 3.7809 mL | |
| 5 mM | 0.0756 mL | 0.3781 mL | 0.7562 mL | |
| 10 mM | 0.0378 mL | 0.1890 mL | 0.3781 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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