| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
The primary target for enzymatic activation is horseradish peroxidase (HRP), which is an enzyme often conjugated to a primary or secondary antibody, or to a streptavidin complex in a detection system. In the presence of hydrogen peroxide (H2O2), HRP catalyzes the oxidation of the tyramide moiety, generating a tyramide radical that covalently attaches to tyrosine residues in the vicinity of the HRP-labeled probe. There is no specific receptor target; the deposition occurs in a proximity-dependent manner (within 5-10 nm of the HRP molecule).
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
花菁5酪胺本身不具有体外药理活性；其用途在于酶促信号放大。在TSA系统中，与直接荧光标记方法相比，该染料可使荧光信号强度提高10-100倍。应用于组织切片或细胞涂片时，信噪比显著提高，从而能够检测低丰度靶标（例如，稀有mRNA转录本、弱表达蛋白）。其红色发射（Cy5）可与绿色（FITC）和远红外（Cy7）荧光染料进行多重标记。
|
| 体内研究 (In Vivo) |
由于 TSA 是一种用于离体组织染色（固定组织切片、细胞涂片或培养细胞单层）的技术，因此体内活性不适用。HRP 反应是在固定、透化的样本上进行的，而不是在活体动物上。然而，该技术已在数百项离体研究中得到验证，可用于检测小鼠、大鼠和人组织中的生物标志物，这些组织来自异种移植肿瘤模型、转基因小鼠模型和疾病模型。其增强的灵敏度有助于定量低水平的蛋白质表达。
|
| 酶活实验 |
由于酪胺沉积机制涉及酶促反应，因此在无细胞受体结合实验中无法对其进行研究。然而，HRP催化的活化动力学可以在固定化牛血清白蛋白（BSA）的无细胞体系中进行表征。简而言之，将HRP（0.1-1 ug/mL）吸附到96孔微孔板的孔中或硝酸纤维素膜上。在Tris缓冲盐溶液（TBS，pH 7.4）中加入花菁5酪胺（1-10 uM）和H2O2（0.01-0.1%）。5-15分钟后，加入0.1%叠氮化钠终止反应。用TBS-Tween洗涤孔或膜点。通过荧光板读数或密度测定法定量沉积的染料量。信号强度与HRP浓度和酪胺浓度成正比。
|
| 细胞实验 |
花菁5-酪胺甲基吲哚（Cy5 Tyramide methyl indole）用于固定细胞或组织切片的免疫组织化学（IHC）或免疫荧光（IF）染色，以及原位杂交（ISH）（检测mRNA或miRNA）。典型的IHC实验步骤如下：1）将组织切片（4微米厚）脱蜡、复水，并进行抗原修复（使用pH 6.0的柠檬酸缓冲液或pH 9.0的Tris-EDTA缓冲液进行热诱导抗原修复）。2）用3% H2O2的PBS溶液封闭内源性过氧化物酶活性10-15分钟。3）用5%正常血清或BSA封闭切片1小时。4）将一抗（针对靶蛋白，例如Ki-67、HER2、p53）于4℃孵育过夜。 5) 室温下应用HRP标记的二抗30-60分钟。6) 应用花青素5酪胺工作液（用TSA试剂盒提供的扩增缓冲液将原液以1:50-1:200的比例稀释制备）5-15分钟。7) 用TBS-Tween洗涤终止反应。8) 用DAPI（蓝色）对细胞核进行复染。9) 用抗褪色封片剂封片，并用荧光显微镜成像（激发波长620-650 nm，发射波长660-710 nm）。该方法可在靶抗原位点特异性地产生点状或弥散状红色荧光。
|
| 动物实验 |
花菁5酪胺仅用于离体组织染色，不可用于体内动物实验。然而，该技术常用于动物实验所得组织（例如，用测试化合物处理的小鼠的异种移植瘤）。组织处理流程：安乐死后，将器官固定于10%中性缓冲福尔马林溶液中24-48小时，制成石蜡包埋块，切片，并按照“体外细胞实验方案”所述进行染色。本实验不直接给动物注射酪胺试剂。最终结果通过荧光强度（平均荧光强度，MFI）或阳性细胞百分比对靶蛋白表达水平进行定性或半定量分析。图像分析使用ImageJ或其他商业软件。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
由于该化合物不用于活体生物，因此不适用药代动力学分析。它仅用作固定死亡组织的组织学染色试剂。酪胺溶液在 4°C 下可稳定保存数月。工作液（用扩增缓冲液配制）与 H₂O₂ 混合后不稳定，应在数分钟内使用。为最大限度降低背景自发荧光，优选使用红色荧光 Cy5 酪胺，因为生物组织在远红外区域的自发荧光较低。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
该化合物为固体或溶液，需在实验室通风橱内操作。该物质可能对眼睛和皮肤有刺激性。目前尚无急性毒性数据，但与大多数有机染料一样，它被认为对水生生物具有中等毒性。为确保安全操作：请佩戴丁腈手套、实验服和护目镜。避免产生气溶胶。如不慎接触皮肤，请立即用肥皂和大量清水清洗。该化合物含有一个活性酪胺基团，注射后可能作为半抗原发挥作用，但其不适用于全身给药。请按照当地危险化学废物处理法规进行处置。
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
花菁5酪胺甲基吲哚（Cy5 Tyramide methyl indole）属于酪胺信号放大（TSA）家族，也称为催化报告分子沉积（CARD）。TSA是目前最灵敏的信号放大方法之一，能够检测每个细胞中1-10个拷贝的目标分子，检测限低至阿托摩尔级。甲基吲哚修饰可以提高荧光团的化学稳定性和亮度。Cy5是一种远红染料（激发/发射波长：~650/670 nm），可避免红细胞和脂褐素的绿色自发荧光干扰。本产品仅供研究使用，不可用于人体诊断。多家制造商提供TSA试剂盒，其中包含酪胺试剂、HRP封闭试剂和放大缓冲液。信号放大是不可逆的，这意味着染料会永久共价连接到组织上，从而可以对切片进行长期保存。对于多重检测（检测 2-4 个靶标），可以进行连续的 TSA 循环（第一个靶标：Cy3 酪胺；第二个靶标：Cy5 酪胺；第三个靶标：Cy7 酪胺），如果需要，可以在循环之间进行抗体剥离步骤（使用加热或 H2O2）。
|
| 分子式 |
C40H47N3O8S2
|
|---|---|
| 分子量 |
761.95
|
| 相关CAS号 |
Cyanine 5 Tyramide;1431148-26-3
|
| 外观&性状 |
Purple to purplish red solid powder
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.3124 mL | 6.5621 mL | 13.1242 mL | |
| 5 mM | 0.2625 mL | 1.3124 mL | 2.6248 mL | |
| 10 mM | 0.1312 mL | 0.6562 mL | 1.3124 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
