| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Cyanine 3 Tyramide methyl indole is an enzyme substrate, not a receptor ligand. The target is horseradish peroxidase (HRP), a commonly used detection enzyme conjugated to secondary antibodies or streptavidin. In TSA, HRP catalyzes the conversion of the tyramide to a highly reactive radical, which then forms covalent bonds with electron-rich aromatic amino acids (tyrosine, tryptophan) adjacent to the HRP-probe binding site. This deposition amplifies the signal associated with the primary antigen or nucleic acid target.
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| 体外研究 (In Vitro) |
Cy3酪胺的甲基吲哚衍生物经过化学优化，与标准TSA试剂相比，在水性扩增缓冲液中具有更明亮的荧光和更高的稳定性。在标准荧光TSA检测中，Cy3酪胺可提供高信噪比，且非特异性背景极低。其橙色荧光（激发波长~550 nm，发射波长~570 nm）与常用的绿色荧光染料（FITC，激发波长488 nm）和远红外荧光染料（Cy5，激发波长640 nm）兼容，可实现多色检测。未观察到直接的药理作用。
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| 体内研究 (In Vivo) |
该化合物不具有体内活性，仅用于对固定生物标本（福尔马林固定、石蜡包埋 (FFPE) 组织切片、冰冻切片、细胞涂片和载玻片上的培养细胞）进行离体染色。然而，这种 TSA 方法已广泛应用于临床前研究，用于定量分析药物治疗动物（例如，异种移植小鼠模型）组织中的生物标志物。其更高的灵敏度（比标准 IHC 灵敏度高 100 倍）使其能够可靠地检测低丰度磷酸化蛋白或转录因子。
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| 酶活实验 |
在无细胞体系中评估HRP催化的沉积。将96孔微孔板包被BSA（10 ug/孔）。加入溶于PBS的HRP（0.1-10 ng/孔），孵育1小时，然后用1% BSA封闭。加入花菁3酪胺甲基吲哚（由储备液稀释1:100，通常终浓度为10 uM），并加入H2O2（终浓度0.01%），溶于TSA扩增缓冲液（0.1 M硼酸盐缓冲液，pH 8.5，含0.1% Tween-20和10%硫酸葡聚糖）。10-30分钟后，加入0.1%叠氮化钠终止反应。洗涤微孔板，并测量荧光强度（激发波长530-550 nm，发射波长565-580 nm）。 HRP浓度与荧光信号之间的线性关系（R2 > 0.99）证实了酶动力学的正确性。特异性对照包括省略H2O2（无信号）或省略HRP（无信号）。
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| 细胞实验 |
花菁3酪胺甲基吲哚用于对生长在盖玻片、细胞涂片或腔室载玻片上的细胞进行免疫荧光染色。标准操作流程如下：1）用4%多聚甲醛固定细胞15分钟。2）用0.1%-0.5% Triton X-100的PBS溶液透化细胞10分钟。3）用3% H2O2的PBS溶液淬灭内源性过氧化物酶活性10分钟。4）用5%正常血清（与二抗同种）的PBS溶液封闭1小时。5）将一抗（例如，抗活性caspase-3、抗磷酸化ERK等）用封闭缓冲液稀释后，于4℃孵育过夜。6）将HRP标记的二抗（1:200-1:500）于室温孵育30分钟。 7) 将花菁3酪胺工作液（用含新鲜添加的0.01% H2O2的厂家扩增缓冲液以1:50至1:200的比例稀释）滴加到细胞上，孵育5-15分钟。8) 用TBS-Tween缓冲液洗涤3次，每次5分钟。9) 用DAPI（1 ug/mL）对细胞核进行复染，孵育5分钟。10) 用抗淬灭剂封片，并在荧光显微镜下成像（激发波长550 nm，发射波长570 nm）。根据抗原的不同，染色模式应为点状、核内或胞质内。可重复此信号放大步骤进行多重检测。
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| 动物实验 |
由于这是一种染色试剂，因此不用于动物实验。然而，其性能通常在动物疾病模型的组织切片上进行验证。例如，在用抗癌药物治疗的小鼠异种移植模型中，收集肿瘤组织，用10%福尔马林固定，石蜡包埋，并切片（4微米）。切片的处理方法参见“体外细胞实验方案”部分。用Cy3酪胺染色后，使用全玻片荧光扫描仪扫描玻片。通过图像分析软件（例如HALO、QuPath、Visiopharm）量化染色强度，计算H评分或阳性细胞百分比。与直接免疫荧光相比，预期信噪比更高。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
该化合物用作台式染色试剂。未进行药代动力学研究。花菁3酪胺甲基吲哚以粉末或浓缩DMSO储备液的形式储存于-20℃时，至少可稳定保存12个月。务必避光保存。水性缓冲液中的工作溶液应在使用前立即配制，并在实验结束后丢弃，因为H₂O₂会随时间推移诱导酪胺水解。反应产物（与组织共价结合的染料）在4℃避光保存时可稳定保存数月。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
作为一种研究用化学品，花菁3酪胺甲基吲哚不属于高毒性物质。标准安全操作规程：避免接触皮肤和眼睛；操作后洗手。该化合物粉末吸入可能刺激呼吸道。目前尚无急性毒性试验数据，但预计啮齿动物的LD50大于500 mg/kg。酪胺不具有遗传毒性。与所有荧光染料一样，避免直接摄入和吸入。染色液（含有H₂O₂和有机染料）的处理应遵循生物危害废物（如使用组织）或危险化学废物处理规程。该试剂仅供研究使用。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
花菁3酪胺甲基吲哚是一种橙色荧光（Cy3，~550/570 nm）的酪胺衍生物，用于酪胺信号放大（TSA）。TSA是一种强大的低丰度靶标检测方法（低至每个细胞中几个拷贝）。甲基吲哚部分可能是Cy3荧光团的结构修饰，可增强其光稳定性和结合效率。与直接荧光二抗相比，TSA可将信号强度提高10-100倍，从而减少一抗的使用量，降低背景并节约珍贵的抗体。Cy3是双色实验（使用Cy5作为第二个通道）的常用选择，因为它的发射光谱与绿色（FITC）或远红色（Cy5）染料不重叠。该化合物仅供研究使用，不得用于人体诊断或治疗。
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| 分子式 |
C38H45N3O8S2
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| 分子量 |
735.91
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| 相关CAS号 |
Cyanine 3 Tyramide;174961-75-2
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| 外观&性状 |
Brown to dark brown solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。 (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.3589 mL | 6.7943 mL | 13.5886 mL | |
| 5 mM | 0.2718 mL | 1.3589 mL | 2.7177 mL | |
| 10 mM | 0.1359 mL | 0.6794 mL | 1.3589 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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